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开展TORCH检测,需要规范检测流程

 素手葬花ing 2016-07-04

TORCH检测已经被越来越多的应用到孕前实验室检查项目中,TORCH一词最早由Nahmias等学者于1971年提出,它是一组病原微生物的英文首字母缩写,其中T(Toxoplasma gondii, Toxo)代表弓形虫,R(Rubella virus, RV)代表风疹病毒,C(Cytomegalovirus, CMV)代表巨细胞病毒,H(Herpes simplex virus, HSV)代表单纯疱疹病毒,O(Others)代表是其他有关病毒,如EB病毒、HIV、梅毒螺旋体和人细小病毒B19等。


1、 TORCH检测的必要性

孕妇在妊娠早期感染了任一TORCH病原体,均有可能发生胚胎/胎儿流产、早产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡等。例如,无免疫力的育龄妇女,弓形虫的感染几率为75-99%,其宫内感染概率为15-60%,风疹病毒的感染几率约为28%,其宫内感染的概率为20-85%(依感染的时间而有所不同)。另外,区分原发感染和复发及持续感染是很重要的,因为复发感染对胎儿和新生儿的危害相对较小,例如:妊娠期原发CMV感染率为0.7%-4%,其胎儿、新生儿感染率约为30.0%-40.0%【Piper JM, Wen TS. 1999】。妊娠复发性CMV感染远较原发感染多,约1.0%-14.0%,胎儿、新生儿感染率约为0.2%-2.0%。围产期感染致新生儿疾病的分布详见下表【董悦等. 2008】:

表2围产期ToRCH感染致新生儿/儿童疾病的分布


疾病名称

孕期感染率(%

胎儿/新生儿感染率(%

胎儿/新生儿危害

有症状及后遗症发生率(%

诊断方法与价值

诊疗方案

弓形虫感染

0.20~1.00

早期15.00

中期25.00

晚期60.00

中枢神经系统损害,先天性智力障碍

23

血清学参考

磺胺或螺旋霉素

巨细胞病毒感染







原发

0.70~4.00

30.00~40.00

先天性心脏病、肝脾肿大

16



复发

1.00~14.00

0.20~2.00

1



生殖道疱疹病毒感染







原发



ALT升高、黄疸、血小板减少

3



复发



-



微小病毒B19感染



死胎、水肿儿、新生儿贫血、血小板较少

3




 

目前,因缺乏有效的治疗方法,对孕妇进行妊娠期宫内感染监测尤为重要。现在国内临床开展TORCH检验的目的主要为:(1)监测妊娠期感染,TORCH检验现已成为妊娠期常规检验项目。(2)判断新生儿先天感染,为医生及时作出TORCH感染诊断和采取必要的控制感染措施(治疗、终止妊娠等)提供有力证据。避免胚胎/胎儿的流产、早产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡,这对提高优生优育质量有积极的作用。【林贵高李金明. 2008】


2、 TORCH检测方法及临床意义

TORCH常规免疫血清学检测项目包括特异IgM、IgG、IgG抗体亲和力、IgA等,主要的检测方法为ELISA。这些抗体分型在临床应用中分别具有不同的意义【Jenum PA, 1998】。(1)特异IgM抗体是病原体感染后最早出现的抗体,特异IgM抗体检测阳性,尤其是高滴度的特异IgM抗体,提示可能有相应病原体的急性感染。随着感染的进展,特异IgM抗体滴度逐渐下降,直至消失。(2)特异IgG抗体出现,且滴度逐步增加,如果发生在前后不同时间的2次特异IgG抗体检测中,第2次检测较第1次检测的滴度增加4倍以上,则提示为近期感染。(3)特异性IgA抗体也是较早出现的抗体之一,目前临床应用较少。

 

图2TORCH抗体IgM、IgG变化如下图所示


特异性亲和力IgG抗体【Akingbade D, 2003】可验证是否近期感染,尤其在特异性IgG抗体阳性的情况下意义重大。其原理是当机体感染病原体后,初次免疫应答后产生的抗体,通常为低亲和力(有功能的亲和力)抗体,经过数周或数月的亲和力成熟后,其与抗原的互补更好,而成为高亲和力抗体。免疫检测中,如果在临床标本中加入尿素或其他变性剂,不能耐受的则为低亲和力抗体,该类抗体的出现,反映的是急性或近期感染。特异IgG抗体高亲和力的测定意义是,可排除患者检测前4-5个月发生的感染,其对怀孕第一个月内检测的妊娠妇女尤其有用,当特异性IgM和IgG抗体均阳性时,如果gG抗体为高亲和力抗体,则说明为孕前感染,对胎儿影响不大。

当血清学检测阳性或有结果疑问时,核酸检验(PCR)为建议选用的确认方法。采用PCR法测定病原体核酸是判断特定病原体急性感染的最直接证据【Kimnra H, 2002】。用于TORCH病原体核酸测定的临床样本主要有血液、羊水、尿液、脑脊液等,但取羊水进行PCR测定对孕妇具有一定的侵害性。


3、 TORCH检测流程及结果解释

国内很多医院在孕期筛查TORCH时只检测IgM,但特异的IgM反应并不能说明被检测者是否真正处于特定病原体的感染状态,既有可能是“假阳性”也有可能是“假阴性。”

“假阳性”结果产生原因可能是:(1)特异IgM抗体在急性感染期过后仍持续存在;(2)多克隆B细胞的非特异性(随机)刺激而产生假阳性结果;(3)再次激活或再次感染后,IgM滴度增高;(4)孕期IgM本底的普遍增高。

“假阴性”结果产生的原因是:(1)IgM应答水平低,延迟应答或缺失;(2)血清部分抗体和抗原形成免疫复合物占据较大空间;(3)特异性IgG对IgM抗原决定簇的封闭。

所以,依靠单一的IgM作为急性期抗体指标具有局限性,建议进行IgM、IgG平行检测以提高临床结果的准确性。

如前文所述,原发感染比复发感染更容易传染给胎儿,且对胎儿造成伤害的几率更大。因此,全面检测IgM、IgG抗体、IgG抗体亲和力,根据不同的检测结果分为原发感染和复发感染。实验室检测方案不当,必然会造成错误的临床决策。因此应建立一个实际可行的TORCH临床检验流程,并对各种结果进行综合分析,这对TORCH检验项目的临床正确使用具有重要意义。以CMV感染为例,根据国外CMV在孕期妇女中的诊断流程,建议CMV检测程序如下(图3)【S. C. Munro etc. 2005】:


 

图3妊娠期CMV检测程序示意图

此外,使用高质量的检测试剂、血清学实验与病原体核酸检测的PCR检验联合、对结果的正确分析,均可大大提高诊断效率。

表3TORCH检测结果解释及下一步检测策略

IgM

IgG

初步判断或解释

下一步检测策略

+

-

近期感染,或急性感染;也可能IgM假阳性。

2周后复查,如IgG阳转,为急性感染,否则判断为假阳性。

+

+

既往感染(IgM持续存在);或近期感染

加做IgG亲和力试验加以鉴别:高亲排除近期感染;低亲可判定为疑似急性感染(加做双份样本观察IgG滴度、亲和力变化以明确诊断;或PCR判断是否宫内感染)。

-

-

无免疫力,易感人群。

定期检测IgMIgG变化

-

+

既往感染,或接种过疫苗;或IgM缺失。

亲和力检测,排除近期感染;

若为既往感染,建议孕晚期监测是否复发。


综上所述,女性孕前、孕期的健康检查非常必要,排除诊断相关疾病,及时干预治疗,对于优生优育至关重要。尤其是对于目前实验室诊断问题较多的免疫类不孕检测(如抗精子抗体、心磷脂抗体)、TORCH检测等更应该采用合理有效的检测方法。总之,采取有效的婚前教育、保健及医学检查,能有效防治出生缺陷,有利于降低婴儿死亡率、减少残疾,提高人口素质,促进家庭幸福和社会和谐发展。


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