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使用Spark 10M实时分析干细胞在分化过程中的细胞增殖2

 钟家台 2017-01-27

使用Spark 10M实时分析干细胞在分化过程中的细胞增殖2

二.进一步对MSCDNA合成进行检测,目标为胸苷类似物EdU的摄入量。结果表明,相比控制组,诱导软骨和成骨细胞分化条件下的MSC呈现出显著的EdU摄入量增加。

2. 通过EdU摄入量监测干细胞分化引起的细胞增殖情况

然而,诱导脂肪和神经细胞生成的分化条件下,细胞DNA合成速度无明显变化。因此,在第一组活性实验中,软骨和成骨细胞生成组的活性变化可以认定为细胞增殖的结果。

三.为了排除潜在死细胞对结果评价的影响,我们还进行了最后一组实验,在MSC细胞刚被转移到4组诱导分化培养液后,就对细胞凋亡酶活进行了检测。

3.干细胞分化过程中caspase-3酶的活性监测

虽然在大部分诱导刺激条件下,细胞并没有caspase-3酶活的改变,但在软骨细胞生成组却呈现出强健但短暂的凋亡酶活性。尽管如此,在软骨细胞生成组并没有伴随进一步的细胞死亡发生。因此,caspase诱导的部分细胞死亡似乎并没有影响MSC分化细胞的活性。

    综上所述,在间充质干细胞(MSC)被诱导分化的前60个小时里,分化MSC细胞呈现了显著的细胞数量或活力的提升(相比对照组)。在软骨细胞和成骨细胞生成组,DNA合成速度的提升表明细胞增殖被诱导增加。相反,脂肪细胞和神经细胞分化诱导组的细胞增殖却和对照组表现相当,因此,细胞分化培养液引起的代谢加速可能是导致细胞活力增加的主要原因。

    另外,在软骨细胞诱导组分化早期,我们发现细胞有强劲但短暂的凋亡酶活性,但此凋亡出现似乎对软骨细胞分化生成有积极作用,并没有引起后续细胞死亡。值得注意的是,在体外间充质干细胞启动分化后,细胞分裂并没有立即停止,反而在某些特定条件下细胞增殖却因分化诱导升高了。

    最后,上述实验也表明,在Spark 10M多功能酶标仪多种细胞学实验功能特征的帮助下,可轻松进行细胞计数,铺板以及随后长达数日的干细胞分化培养,真正实现多参数实时自动化检测分析。

 

 

 

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