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间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是来源于中胚层的多能成体干细胞，广泛存在于脐带、骨髓、脂肪、牙髓、月经血等组织，体外培养可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种类型的细胞。
图1 The Mesengenic Process（图片来源于文献，仅供学习参考用） MSCs具有自我更新能力和多向分化潜能，能够释放出许多具有抗凋亡、免疫调节、促血管生成等功能的生物活性因子，可刺激组织器官再生，并且低水平表达主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类分子，不表达MHC-Ⅱ类分子，不易激活T细胞的免疫反应，具有低免疫原性。这些特点和功能使MSCs成为细胞治疗的首选，美国临床信息公示数据库显示，截止今年9月份，共有1583项MSCs的临床实验，研究主要集中于心血管疾病、新冠肺炎、骨关节损伤、自身免疫性疾病等。
图2 MSCs研究者分布和MSCs研究热点 随着MSCs的研究如火如荼，不同的分离方法、营养体系随之而来，如何评判不同分离方法的MSCs获得率成为了一个难题，为了解决这个问题，2006年，国际细胞治疗学会的间充质和组织干细胞委员会提出了定义人类MSCs的最低标准。 1、MSCs在标准培养条件下必须具有塑料粘附性 MSCs具有异质性，不同物种，不同组织来源大小有所差异，例如猫脂肪来源MSCs脐带来源MSCs小，所以无法单一的从外观判定MSCs，但是几乎所有的MSCs都是贴壁生长，具有较强的贴壁能力，多数MSCs呈纤维细胞样生长，呈梭形或不规则三角形，胞质向外伸出突起。传代后细胞呈旋涡状排列生长。
图3 人骨髓间充质干细胞（图片来源于网络，仅供学习参考用） 2、特异性表面抗原（Ag）的表达 通过流式细胞术测量，95%的MSCs群体必须表达CD105、CD73和CD90。此外，这些细胞必须缺乏CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79a或CD19和HLA II类的表达（5/2%阳性）。 表1 MSCs特异性表面抗原的表达指标
3、在体外具有分化为成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞的能力 三系分化能力是MSCs最独特的鉴定MSCs的方法，向成骨细胞的分化可以通过用茜素红染色或von Kossa染色来证明，向脂肪细胞分化最容易通过油红O染色来证明，成软骨细胞分化通过阿利辛蓝或免疫组织化学染色来证明。
图4 人MSCs成骨分化诱导 abs9453
图5 人MSCs成脂分化诱导 abs9454
图6 人MSCs成软骨分化诱导 abs9455 三系分化小问答： 1、如何解决成骨分化后细胞极易脱壁的现象？ 2、成脂分化时细胞形态变差？ 3、成软骨诱导后软骨球不悬浮或者软骨球碎裂？ 4、软骨球是否可以做冰冻切片？ MSCs鉴定相关的讲解就到这里啦，老师们有细胞培养相关问题可以添加下方交流群一起探讨。 爱必信MSCs相关产品推荐
参考文献 [1] Dominici M, Le Blanc K, Mueller I, et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement[J]. Cytotherapy, 2006, 8(4): 315-317. [2] Caplan A I, Correa D. The MSC: an injury drugstore[J]. Cell stem cell, 2011, 9(1): 11-15. |
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