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科学家Luca Gattinoni 和他的团队首次提出人的外周血中存在着一群细胞，它们既具有记忆T细胞的特性，同时又具有干细胞的特征，因此命名为T memory stem cell (Tscm) (Nat Med. ; 17(10): 1290–1297)。为了研究Tscm的功能，他们首创了Tscm的体外培养方案。首先分选出外周血的CD45RO?CD62L 细胞，然后用α-CD3/CD28 磁珠和细胞1：1混合，300 IU ml?1IL-2， 5 μM TWS119培养两周即可获得大量的Tscm。其中TWS119是一种GSK-3β抑制剂，能够诱导神经细胞的分化，并且有助于细胞获得干性。虽然Tscm具有很多类似初始T细胞的分子表型（CD45RA CD62L ），但是它们又表达记忆T细胞的分子特征分子（CD95 ，IL2Rβ），因此具有部分初始T细胞和记忆T细胞的双重特性。 在发现Tscm后的四年里，研究人员不断优化Tscm的培养方案（后期也建立IL-7/IL-15的培养方案），并进行了一系列体内和体外实验。阶段性里程碑结果在去年二月的Science Translational Medicine发表。研究人员利用逆转录整合位点高通量测序（High-throughput sequencing of retroviral vector integration sites (ISs)）发现体外培养的Tscm回输到人体，可以长期存活达12年，并维持其正常的活力。 丿 NIH著名的免疫学教授rosenberg是世界上最早从事免疫细胞过继治疗的科学家，在他的文章中鲜明的指出Tscm的增殖能力和抗肿瘤活性在所有T细胞亚群中是最强的。 近年来，肿瘤免疫治疗突飞猛进，CAR-T/TCR-T等特异性T细胞疗法在临床上取得了巨大成就。在攻克了血液瘤和淋巴瘤等循环系统的肿瘤后，正在朝着实体留的战场迈进。国内的CAR-T/TCR-T技术也在飞速发展，我们可以从CD19-CART临床试验结果发现，国内外不同公司的临床反应是不一样的，甚至还有较大差异。我相信这里面的影响因素会很多，比如SCFV差异，共刺激分子不同，入组病人病情不一致，病人的预处理方案不同等等。但是也非常重要的一个因素，我认为没有得到应有的重视，即培养的T细胞的表型和功能。事实上，国际最为知名的CAR-T大师Carl H.June和rosenberg在制备T细胞的过程中，无一例外的都采用了α-CD3/CD28磁珠来激活扩增T细胞。 目前国内从事细胞治疗的公司和医院基本都采用IL-2 OKT-3来扩增T细胞，当然国外也有很多公司采用这一方案。这样的事实在部分程度上是由于α-CD3/CD28磁珠制备工艺比较复杂，放眼全球仅life和美天旎两家企业具备生产能力（可能国外还有其它公司，如有疏忽，请多多见谅）。国际上已有研究人员比较了IL-2 OKT-3和α-CD3/CD28 磁珠培养T细胞的表型和功能差异。因此，国内企业突破技术瓶颈，生产出安全有效的磁珠产品迫在眉睫。非常庆幸，据可靠消息证实，近岸蛋白在这一领域已提前布局，相应产品也即将面世。 因为Tscm的重要功能，将其运用到过继免疫细胞治疗领域毫无疑问具备先天优势，在此基础上建立的CAR-T/TCR-T治疗方案也将表现出更好的效果。 参考文献 1. Gattinoni L, Lugli E,Ji Y, et al. A human memoryT cell subset with stem cell-like properties. Nat Med2011;17:1290-7. 2. Biasco L, Scala S, BassoRicci L, et al. In vivo tracking ofT cells in humans unveils decade-longsurvival and activityof genetically modified T memory stem cells. Sci TranslMed 2015;7:273ra13; 3.Relation of clinical culture method to T-cell memorystatus and efficacy in xenograft models of adoptive immunotherapy.Barrett DM, SinghN, Liu X, Jiang S, June CH, Grupp SA, Zhao Y, Cytotherapy (2014) ; 4.Simplified process for the production of anti-CD19-CAR-engineeredT cells. Tumaini B, Lee DW,Lin T, Castiello L, Stroncek DF, Mackall C, Wayne A, Sabatino M, Cytotherapy (2013) 15:1406-1415.
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