【原】自噬经典通路PI3K/Akt/mTOR是如何套路3分文章的

解螺旋 2020-08-27

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作者：蚍蜉玉

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今天小编要给大家分享的题目是《2,5-Hexanedione induces autophagic death of VSC4.1 cells via a PI3K/Akt/mTOR pathway》(回复170807可下载文献，一周有效)，由文章的题目可知该文章是一个常见信号通路的类型，阅读者从题目可熟知的信息量则为：

在该文章中自噬是主要事件，2,5-Hexanedione，2,5-己二酮（HD）是一个诱导剂，能够诱导细胞自噬，VSC4.1细胞系是事件发生的主体，而本文就是探讨诱导剂诱导主体发生主要事件的机制，那快来跟着小编看看新鲜总结的吧!

首先：发现现象HD诱导诱导细胞发生自噬和死亡；

其次：HD诱导诱导细胞自噬和凋亡与信号因子PI3k之间的关系；

再次：HD诱导诱导细胞自噬和凋亡与信号因子Akt之间的关系；

第四：HD诱导诱导细胞自噬和凋亡与信号因子mTOR之间的关系；

最后：HD诱导诱导细胞自噬和凋亡与 PI3K/Akt/mTOR通路之间的关系。

为了方便大家理解，小编特异搜索一个网站探索三者之间的信号网络关系：

丝氨酸/苏氨酸激酶 Akt（又称作蛋白激酶 B 或 PKB）作为一种原癌基因，Akt 调控多个生物过程，包括细胞存活、增殖、生长和糖原代谢。PI3K 相关激酶 (PIKK) 家族成员，包括 DNA-PK，也同样能在 Akt 丝氨酸 473 位点将其磷酸化。Akt 通过作用于 TSC1/TSC2 复合体以及 mTORC 信号转导，进而调节细胞生长。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 (mTOR) 是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸激酶，存在于两个不同的复合体中。第一个为 mTOR 复合体 1 (mTORC1)，乳动物雷帕霉素靶蛋白 (mTOR) 是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸激酶，存在于两个不同的复合体中。第一个为 mTOR 复合体 1 (mTORC1)，由 mTOR、Raptor、GβL 和 DEPTOR 构成，受 rapamycin 抑制。第二种复合体是 mTOR 复合体 2 (mTORC2)，由 mTOR、Rictor、 GβL、 Sin1、PRR5/Protor-1 和 DEPTOR 构成。

发现2,5-己二酮诱导剂可以诱导VSC4.1细胞自噬

培养VSC4.1细胞，并用三个不同剂量的2,5-己二酮（HD）处理之后，作者利用免疫印迹，免疫荧光以及电镜技术发现了HD诱导细胞自噬的现象，并且细胞自噬具有剂量依赖性。

LC3位于细胞质，是自噬的标记性蛋白

发现HD诱导自噬细胞发生细胞凋亡的现象

过度的自噬能够诱导自噬细胞的凋亡，为了检测是否是HD诱导自噬细胞发生细胞凋亡，用HD处理细胞24h后，然后用乳酸脱氢酶（LDH）检测细胞的凋亡情况，结果显示自噬的程度越高细胞凋亡的越多，两者呈正相关的关系。

美腻腻的分割线。。。。。。以上便是主要事件发生在主体上的过程-HD诱导了细胞发生自噬，并且到一定浓度剂量时细胞发生死亡，那么接下来就看机制了。。。

HD与PI3K

在HD和PI3K共在的情况下，细胞凋亡还是比对照组较高，但是 HD诱导的细胞凋亡在PI3K的存在下还是得到了缓解。利用免疫荧光和免疫印迹技术检测这些结果表明HD诱导的细胞凋亡能够被PI3K所阻断。

HD与Akt

在调节自噬神经元死亡中 PI3K/Akt发挥了重要的作用，而且Akt是PI3K的下游的重要因子。为了检测PI3K/Akt的通路是不是受HD所调控和影响，在VSC4.1细胞中加入HD分三个剂量浓度处理24h，然后用蛋白检测Akt的表达水平。

Akt的表达水平在HD处理后没有发生变化，但是磷酸化的Akt显著的下降并且具有剂量依赖性。为了深入了解以上的结果，HD处理 VSC4.1细胞之后，然后分别加入或者不加入740Y-P，740Y-P是PI3K的激活剂。在740Y-P存在的情况下，下降的Akt水平被回升。这表明HD阻止了PI3K/Akt的信号通路。

HD与mTOR

蛋白检测在VSC4.1细胞中，HD诱导下mTOR以及磷酸化mTOR的变化，结果表明磷酸化mTOR的水平与对照组相比显著下降，而且呈现剂量依赖性。为了检测mTOR的下降活性与抑制PI3K/Akt的通路相关，HD诱导的VSC4.1细胞处理740Y-P或者SC79。这些结果表明mTOR的失活抑制了PI3K/Akt通路。