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有很多小伙伴每天照着标准化的流程，按部就班地做着实验，流程很熟，但是问其实验原理，那是一问三不知。就好比知道肝硬化患者会出现腹水，却不知道腹水产生的机制，你的上级医生估计要敲你的头了。 今天我们来讲讲TaqMan探针的原理，因为了解他们会让实验在遇到问题时，你能更好地找到问题的症结所在。 有的小伙伴问：TaqMan探针是什么，我们平时做实验要用么？你的导师不会敲你的头，因为他也不知道那是个什么东西。定量PCR会敲破你的脑袋（很多小伙伴每天都做的实验）。 我们知道定量PCR会产生荧光信号，信号的强度就代表了模板DNA的拷贝数。科研很神奇，一丁点儿的白开水，加上往里面倒点白开水，煮一煮会发光，至于为什么会有产生荧光，小伙伴说不能知道得太多，不然整个人就会不好的。 我偏要讲，因为原理真的很简单。 TaqMan酶由三部分组成：一边一个叫6-Fam的贼（偷盗界璀璨的一颗新星），另一边是一个叫DABCYL的警察（有他在，任何荧光都会为之暗淡），Fam贼和DABCYL警察之间连着一根磁铁制的手铐，因为有DABCYL警察的存在，Fam贼就没有办法展现自己才能。于是Fam做了个艰难的决定，把手铐贴到铁轨上，让Taq酶号列车斩断这根手铐链子（Taq酶号列车以1kb/min的速度从5’端呼啸而来，用坚不可摧的5’-3’外切酶活性切断所有阻碍）。哈哈，Fam贼又自由了，又能发挥他偷鸡摸狗的璀璨光芒了。 有小伙伴问：Taq酶是什么？经常做的PCR要敲你的脑袋了，Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus （Taq）中分离出的具有热稳定性的DNA 聚合酶。 听完了，整个人还没有死掉吧？回复“Taqman”可获得《Taqman探针设计总结》的下载链接哦…… |
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