作者:冯杰雄(广州市红十字会医院检验科) 来源:中华检验医学网、检验医学微信公众平台 凝血试验检测结果的准确性与分析前预处理密切相关,在实验室中常遇到可能干扰凝血检测的因素,其中最常见的是高血脂。下面由我科遇到的一例标本展开讨论。 案例一:ICU, 5床,某病人,凝血结果如下:PT:11.4秒,PTINR:0.98,APTT>180秒,TT:70.4秒,FIB:3.2 g/L, D-二聚体:14190ug/L,AT-III:48%.(如图) 图1 图2 对于以上结果:检验人员提出疑问,为何APTT,TT日间差异这么大? 检验科反馈分析如下: 1、标本情况如下,标本严重脂浊,咨询临床病人在输注脂肪乳期间抽血。对于此类标本你会如何处理? 图3
2、仪器图形如下: 图4
APTT结果报警无凝固,直接发>180秒? 发现标本脂浊后,检验科咨询并告知ICU护士,病人在输注脂肪乳期间禁止抽血,应在输注6小时候后再进行抽血。同时,检验科人员将标本血浆用无抗凝剂EP管放置高速离心机 15000 r /min 离心 8min,澄清脂血,用Sysmex CS5100 全自动血凝分析仪进行再次检测,结果如下: 图5 结果检测如上图:APPT:***,检测不出,PT:16.8秒,TT:16.0秒,FIB:3.47g/L,D-二聚体:13800ug/L,AT-III:52%,查看仪器报警如下:前带反应错误:反应太慢(见图6),根据报警,采用手工法检测APPT,最终测得:APTT 85.0秒。 图6
该病人结果:APPT:85秒,PT:16.8秒,TT:16.0秒,FIB:3.47g/L,D-二聚体:13800ug/L,AT-III:52% 一、对于脂浊标本,讨论如下: 根据CLIA 88规定的允许偏差范围,PT、aPTT 允许偏差为 ± 15% , FIB的允许偏差范围为 ± 20%[1,2]。因未对 TT 进行规定,故将 TT 的允许偏差定与 FIB一致为± 20% 。该案例检测结果表明,重度脂血的标本常规凝血离心后在应用 Sysmex CS-5100 比色法上检测出结果受干扰,对在CS-5100 检测APTT、TT 影响均较大,CS-5100 血凝分析仪不能抗高血脂,脂血在CS-5100 检测的结果不能报告, 经高速离心后, 消除脂血对凝血四项的影响,重新在CS-5100上检测,说明高速离心法能够澄清血脂, 消除高血脂的影响而得出准确可靠的结果。 日本 SYSMEX CS-5100 全自动凝血仪集凝固法、发色底物法和免疫法于一体, 采用先进的光电散射配合百分比凝固时间测定原理[3], 其免疫比浊法检测原理是透射比浊、散射比浊, 也可以通过胶乳比浊法。透射比浊法是一定波长的单色光通过待测血浆时, 由于待测血浆中抗原与其对应的抗体反应形成复合物使其浊度增加,透过的光强度减弱。透过的光强度减弱的程度与抗原的量成一定的关系, 通过这一关系可以从透过光强度的变化来检测抗原的量。散射比浊是一定波长的单色光通过待检血浆时, 抗原与其对应的抗体形成复合物, 使溶质颗粒增大, 光散射增强。散射光强度的变化与抗原的量成一定的数量关系, 通过这一数量关系可以从散射光强度的变化来检测抗原的量。随着待检物质与其相应抗体结合, 其复合颗粒增多,光通过它时,透过光强度也就越来越弱, 凝血仪自动算出单位时间的吸光度的变化, 再根据标准曲线推算出待检物质的含量。 正因此原理,应用 Sysmex CS-5100 比色法分析脂血的结果可能出现误差, 其原因有: (1)CS-5100 是以光学比浊法为检测原理,以透光度降低判断终点,所以一般采用光学系统进行测定的仪器不能对高血脂、黄疸或溶血的血浆得出准确的检测结果[4]; (2)脂血会导致吸光强度改变, 进而透射光和散射光的强度也发生改变; (3)脂血标本对血凝的影响主要是吸光度升高导致血凝结果升高; (4)脂血对血浆内血凝因子包裹使血凝试剂不能与血浆凝血因子充分反应,只能检测大部脂肪的吸光度。而STAGO 血凝仪分析是以双磁路磁珠法为检测原理, 突破了标本外观的干扰。临床检测中脂血标本对APTT、TT测定结果有影响[4]。 案例证明:高血脂标本经高速离心后CS-5100 血凝 分析仪所得结果为准确结果。因此, 在实际工作中遇到高血脂标本时,采用高速离心法澄清脂血,消除高血脂对仪器测定的影响是简单可行的办法。并与临床沟通,尽量不要在输注脂肪乳时送检凝血检验。 二、凝血测试一般注意事项 护士标本采集 1、 静脉抽血; 2、穿刺要一针见血,避免淤血,气泡,溶血和组织液污染; 3、为避免血液当中有组织液的渗入,采血时以第二或第三管样品做凝血测试管为佳;如果从导管取样,则需用生理盐水冲洗管道,前面5ml血不能使用; 4、采血后立即与抗凝剂充分混合,尽快送往实验室; 5、采血量必须准确,如果少于计划量的90%,则不能使用;不能在静脉穿刺部位或附近部位采样; 6、尽量不要在输注脂肪乳时送检凝血检验。 影响测定结果的几种因素 1、抗凝剂:草酸钠、EDTA、肝素不适于作抗凝剂; 2、严重黄疸,脂血,重度溶血会影响测定结果,如是因抽血不当或采血时机不当引起的,应尽可能重抽血; 3、使用纤溶药物,如双香豆素,链激酶,尿酶等可使凝固时间延长; 4、超过治疗剂量的肝素使凝固时间延长; 5、 FDP增加使凝固时间延长; 6、 某些药物,如口服避孕药,雌激素,天门冬酰胺酶,钠络酮等影响测试结果; 7、样本采集和处理不当,都会使凝固时间缩短或延长,特别是抗凝比例不当的样本应退回重抽妊娠和急性炎症会影响某些测试结果。 检验科对不合格凝血标本处理如下:
参考文献: [1]程红革 . 凝血试验分析前影响因素及其标准化[J]. 国际检验医学杂志,2010,31( 3) : 298-301 [2]闫朝春,金艳月,徐冬祥,等 . 酸碱度变化对实验检测凝血四项指标结果的影响[J]. 检验医学与临床, 2010, 9( 7) : 783-784 [3]徐方运 . CA-7000 全自动血液凝固分析仪的维护保养及常见故障的处理[J]. 现代检验医学杂志,2003( 4) : 60. [4]郑志友, 徐玉兵, 杨柳生 . 溶血和脂血标本对凝血指标检测的影响因素探讨[J]. 临床输血与检验, 2013, 15( 1) : 25-28. |
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