观察全片，浓缩染色体明显是阳性，这应该是个均质型。
在高倍镜下观察，细胞核的荧光呈颗粒样的表现，而且肝片中也不呈均质样的荧光，应该报斑点型。
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作者：上海长海医院 汪怀周 薛苗 间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，IIF）是目前临床上检测自身抗体普遍采用的免疫荧光技术。常使用HEp-2细胞和灵长类肝做为基质，因被检血清中存在不同性质的特异性抗核抗体（ANA），与靶抗原结合后，加入荧光素标记的二抗，通过荧光显微镜呈现形态各异的荧光染色模型。 最近有个标本的荧光模式比较特别（见下图），大家在均质还是斑点上发生了分歧…
HEp-2细胞，40×
猴肝细胞，40× 观察全片，浓缩染色体明显是阳性，这应该是个均质型。 在高倍镜下观察，细胞核的荧光呈颗粒样的表现，而且肝片中也不呈均质样的荧光，应该报斑点型。 好像两个同事说的都有点道理，到底谁对谁错？ 复习一下最常见的荧光模型：斑点型和均质型，鉴别内容见下表：
荧光读片有三个要点： ①应该选取多个视野判断，不宜选取边缘区域； ②分裂间期与分裂期细胞综合看，应注意有丝分裂期的细胞； ③HEp-2细胞要与肝细胞片综合看。 当这几者不能完全吻合时就需要多多思考一下。 我们查了一下这个患者的资料：为一个儿科腹泻患者，抗核抗体谱包括抗dsDNA、抗ssDNA、抗RNP、抗Sm、抗SS-A、抗SS-B、抗Scl-70、抗PM-Scl、抗Jo-1、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体、抗核糖体抗体皆为阴性。 结合患者抗核抗体谱以及荧光模式的特点，我们初步排除了“均质型”，既然不是均质型，为什么浓缩染色体还是阳性的呢？在请教了一些专家和查询了相关的资料后，“致密斑点型“这个词走进了我们的视野。 致密斑点型（Dense fine speckled） 抗核抗体HEp-2细胞间接免疫荧光染色模型分类及命名 注：橙色部分为必报核型，绿色部分为选报核型。 模式特点: 分裂间期HEp-2细胞：核浆呈细颗粒型致密的荧光染色。 分裂期HEp-2细胞：浓缩染色体呈强颗粒状荧光染色，有一些粗糙的斑点突出，染色体区域外为阴性。 猴肝：常呈荧光染色阴性或细颗粒型荧光染色模型，荧光强度弱于HEp-2细胞。 靶抗原：致密细颗粒（DFS）-70，为晶状体上皮细胞衍生的生长因子（LEDGF）和（或）DNA结合转录共激活因子p75。 抗核抗体谱：常为阴性 以下为ANA间接免疫荧光模型命名标准化共识中给出的示例图片：
患者分布： DFS-70抗体模式在很多健康人以及不同的疾病中都可能存在，这种抗体到底是天然的、保护性的还是致病性的仍然不是很清楚。该抗体可见于各种AID（SLE、RA、SS等）、慢性感染性疾病（带状疱疹感染）、慢性疲劳综合征及健康人群中。有文献报道在健康献血者、健康儿童以及常规ANA筛查人群中的阳性率在0-5%。国内也有研究发现在ANA阳性者中DFS阳性占8.79%，且大部分为非AID患者。我们报告的这例致密斑点型，经与临床联系和沟通，患者也无AID疾病的表现。 相关进展： 在ANA HEp-2细胞间接免疫荧光染色模型命名标准化共识中将细胞核致密斑点作为必报荧光模型，而国内自身抗体检测实验室人员对该荧光模型认识相对不足，可能将DFS作为细胞核均质型或者细胞核斑点型报告。其核型的临床意义存在很大不同：中高滴度的细胞核均质型或者细胞核斑点型提示自身免疫性疾病的可能性较大，而DFS并不作为自身免疫性疾病存在的标志。 对于DFS的鉴别除了荧光模式的判断外，也有一些研究者采用ELISA或者免疫印迹测定DFS70抗体进行辅助诊断，或者在血清中加入高浓度的LEDGF抗原中和后进行IIF检测。近来也有公司生产出基因敲除的HEp-2细胞（不表达DFS-70），在同一块板上以9:1的比例包被敲除与未敲除DFS70基因的HEp-2细胞，当自身抗体的靶抗原主要为DFS-70时，可在荧光中很容易的分辨出来。 A：在传统的HEp-2基质上，DFS70阳性反应容易与均质型或颗粒型混淆。
B：在90%细胞为DFS70 KO的基质上，大部分细胞为阴性，仅有少部分未敲除的细胞呈阳性反应（黄色箭头）。 小结： 致密斑点型作为必报核型，与均质型、斑点型容易混淆临床意义却大不一样，需要我们加强这方面的学习和认识，给予临床正确的报告结果。 参考文献： 1. 李永哲, 胡朝军, 周仁芳. 自身抗体免疫荧光图谱[J]. 2014. 2. 胡朝军, 周仁芳, 张蜀澜, 等. 抗核抗体 HEp-2 细胞间接免疫荧光模型及其结果报告方式国际共识解读[J]. 中华检验医学杂志, 2016, 39(011): 804-810. 3. 周仁芳, 曾爱平, 陈瑛, 等. 致密细斑点型抗核抗体在自身免疫性疾病中的临床意义[J]. 中华检验医学杂志, 2015, 38: 173-177. 4. Malyavantham K, Suresh L. Analysis of DFS70 pattern and impact on ANA screening using a novel HEp-2 ELITE/DFS70 knockout substrate[J]. Autoimmunity Highlights, 2017, 8(1): 3.
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