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最近养的细胞真心的是状态不好，细胞状态乱七八糟的还有小黑点。小郭说我这个细胞已经没救了，应该是支原体。 我拿引物检测了一下，果然我的细胞已经被支原体侵蚀了。那咋办？！这细胞就这么一株，要死了就惨了…… 支原体污染的话，确实挺麻烦，最简单的方法就是直接扔掉啦。为了防止这样的事情发生，我们会有这样的准备。 首先，拿到细胞株的时候，就先复苏。扩大培养后，进行冻存保种。大量的保种，可以保证一旦产生支原体污染后，可以重新复苏那些未污染的细胞。 但是一旦没有扩大保种，而且只有这样一株，特别是原代培养的细胞，一旦有了污染就非常可惜。那咋办呢？ 首先可以选择用高温培养，由于支原体对高温比较敏感，间歇性提高培养温度的话，也能降低支原体。但是如果这个都无效的话，改怎么办呢？ 这时候需要用支原体清除剂。这个配方是从这篇Elimination of Mycoplasma Contamination in Cell Cultures文献中（B I O C H E M I C A ，1996，1：48-51）的，他们用细胞系，对支原体的污染及支原体清除剂做了分析。用了这样几种配方： 1）BM-Cyclin，这其实有两种药物，BM-Cyclin1和BM-Cyclin2。BM-Cyclin1其实就是泰妙菌素，BM-Cyclin2就是米诺环素。BM-Cyclin处理细胞的方法是先采用泰妙菌素处理细胞3天，然后采用米诺环素处理细胞4天。泰妙菌素在培养基中的终浓度是10ug/ml，米诺环素在培养基中的终浓度是5ug/ml。 2）环丙沙星，这也是一种支原体较为敏感的抗生素。处理方法是用环丙沙星，10ug/ml在培养基中的终浓度，连续处理14天。 3）MRA，这个是商业化的支原体去除剂（Mycoplasma Removal Agent）是喹诺酮族抗生素的衍生物，主要的成分是4-氧代-3-喹啉羧酸，也叫加替沙星。加替沙星实用浓度较低，就是在培养基中0.5ug/ml，处理8天。 使用后发觉，采用泰妙菌素和米诺环素的效果更好些，支原体耐药率低，同时对细胞的抑制也较低。 有人会说这玩意是不是会很贵！呃，要是要求太高的话，估计是挺贵的，但是，如果实在觉得贵的话，也有便宜的做法。这几种药物呢，怎么说呢……某宝都有售……不过是兽药……如果你不介意的死马当活马医的话，可以稀释溶解后，严格过滤灭菌才能使用，有的粉剂纯度还是较高的（可以达到98%以上），换算一下就行了。 但如果你的细胞真的是挺珍贵的话，建议去买进口的纯度更高当然更贵的这些试剂。好了，姐姐只能帮到你这里了，今天就策到这里吧。
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