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重楼药用资源、特色组织培养及快速繁殖技术 （一）材料选择及消毒 1．材料选择 重楼组织培养外植体选择以展叶期旺盛生长的根茎作外植体，其愈伤组织的诱导频率最高，达16.6%，萌芽期取材次之，在花冠露白期和倒苗期，根茎则很难诱导产生愈伤组织。 2．消毒 取样后，用200mg/L羧苄西林钠或头孢唑林钠进行浸泡处理5小时，浸泡时进行振荡(26℃，112r/min)，取出材料后用无菌水清洗2次，、接着用75%的乙醇漂洗30秒，无菌水清洗1次，lg/L升汞灭菌5分钟，再无菌水清洗3次。晾干后切成0.5cm3左右大小，然后接种子培养基上。 （二）培养基选择及培养条件 1．培养基 以MS培养基为基本培养基，根据不同的外植体选用不同的培养基，并根据需要添加不同种类、浓度的激素配制成诱导其形成球茎、芽分化、生根培养基。 2。培养条件 在温度20℃左右的培养室培养，光照时间为16小时[吉山花瑶]。 （三）芽分化乃生根苗培养 将愈伤组织转接到增殖和分化培养基，约90天左右更换 1次培养基，更换3次，愈伤组织块 由淡黄色逐步变为白色，表面 由粗糙突起逐步变为平滑；再过30天后，逐步分化形成芽。分化芽如果不进行生根诱导，在增殖和分化培养基上继续生长150天左右可展叶形成完整的无根苗。210～240天为1个增殖周期，增殖系数为1-2倍。将分化出的芽接种子生根培养基上，在培养过程中芽的基部逐步褐化伸长成根状茎，培养60天左右，在芽的基部可长出2-3条根。 （四）炼苗移栽 将根长为2- 3cm的芽取出，洗净培养基后移栽于腐殖质土中，置于18- 20℃温度> 下，土壤湿度保持50%～ 60%，180天左右芽可生长出土展叶，形成完整植株，出土展叶成活率可达65 %。 |
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