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第二周第2节

 王博士的御书房 2018-09-18
疾型模法标5恒量不变的情况下,通过改变研究的分子可以发很多文章,也就是同一种相类似的套路研究不同的东西。

要验证某种分子与表型有关,比如上调或下调可以影响表型,首先应该把分子放入细胞模型内。单个的DNA在细胞内是不能转录的,需要依靠质粒和病毒,DNA整合到质粒转染进去细胞后质粒就会开始转录,这样就能提高或减少目的基因的产物量。质粒转染可以用脂质体,还有电穿孔,以及磷酸钙转染

RNA干扰技术(RNAi),人工合成一个siRNA作为工具进入细胞核后与Risc分子结合,然后与相配对的mRNA结合后就可以降解这段mRNA,这样就起到了下调目的基因的作用,但是这种技术只能将目的基因沉默70%,不能完全沉默,所以不能用knockout敲出,只能是knockdown敲减。

miRNA是内源性的调节转录后编码蛋白的非编码RNA,主要与mRNA结合,下调目的基因的产物,但是mRNA量不变。

lncRNA的调控方式和蛋白一样,蛋白能做的它都能做。。。结合,启动增强,竞争,改变蛋白活性,改变蛋白在核质中的定位,连接蛋白等等等等~~功能非常强大。

circRNA可以起到海绵作用,这种RNA是一个闭合环状结构,环内有很多miRNA的结合位点,可以使miRNA吸附在环内形成海绵作用,起到调节miRNA的作用,这是一种竞争作用,这种作用称为ceRNA,ceRNA不是某种RNA只是一种方式名称,从而起到调节目的基因转录后编码蛋白的作用,可以上调目的基因产物。

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