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漫谈伪狂犬病病毒Bartha-K61株

 木鱼的阅读 2018-09-30
猪伪狂犬病是危害养猪业的主要疫病之一,被世界各国所重视,近年来,欧洲的伪狂犬病根除计划开展的如火如荼,主要采取应用伪狂犬病基因缺失疫苗和配套的检测方法及淘汰野毒感染猪等综合防制措施。
说到基因缺失疫苗,不得不提的就是伪狂犬病病毒Bartha-K61自然基因缺失弱毒株,这株来自遥远匈牙利的弱毒疫苗株被世界许多国家引进应用,免疫效果好,受到一致好评。

匈牙利学者Bartha在1961年从具有神经症状死亡的猪脑分离一株强毒株,命名为K61株,进而将K61强毒株在猪肾细胞培养传代,在37℃的条件下传了50代,接着又在32℃的条件下传20代。用琼脂覆盖培养的病毒,2-3天即可产生蚀斑,直径为2-3毫米的蚀斑约占90%,1-2毫米的蚀斑仅占10%左右。经观察证明,产生小蚀斑的病毒经传代还是形成小蚀斑,而产生大蚀斑的病毒,则继续分离形成大蚀斑和小蚀斑。在病毒传代过程中挑选小蚀斑病毒培养传代,从而培育成了K61弱毒疫苗,用以预防伪狂犬病,为了纪念这位学者,就以他的名字命名为Bartha-K61株。

伪狂犬病强毒株和K61弱毒株特性形成了鲜明的对比,K61弱毒株培养形成小蚀斑,而强毒株则形成大蚀斑;K61弱毒株对胰蛋白酶和热有抵抗性,而强毒株则较敏感;从病原性来看,K61弱毒株对4个月以上的猪(包括新生仔猪)、牛、绵羊和犬没有病原性,而对不足4个月龄的猫和犬,毛皮兽和2公斤左右的家兔具有病原性,其他动物则能抵抗感染,而强毒株则引起多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为特征的急性传染病,对猪的危害最大,常引起妊娠母猪发生流产、死胎、木乃伊胎和产弱仔,新生仔猪大量死亡,育肥猪发生严重的呼吸症状和增重迟缓,种猪不育,给养猪业造成巨大的经济损失。

对于Bartha-K61自然基因缺失弱毒株这一优良的特性,配套合理的检测方法,就能区别疫苗免疫猪和野毒感染猪,对清除伪狂犬病具有天然的优势。那么缺失的是哪些基因呢?有人做过这样的研究,针对大体缺失位置分别设计引物,测序结果与完整的PRV全基因进行比对发现,Bartha-K61株存在缺失位置为第122560~126049位核苷酸,其间包括部分gI基因、全部的gE和Us9基因以及部分Us2基因,共3 489 bp。


目前,以Bartha-K61株作为毒株的伪狂犬病弱毒基因缺失疫苗,被世界上主要动保企业采用,也为我国大多数生物制品公司生产,但基于生产工艺和佐剂要求,各公司生产的疫苗病毒含量也是各有差异,这也就为猪场伪狂犬抗体水平持续的时间问题埋下了隐患。

广东永顺“晶制”伪狂犬病活疫苗采用自创高密度细胞培养工艺,疫苗效价高,异源蛋白含量少,免疫接种应激和过敏反应小等优点,且伪狂犬病病毒含量>106.5TCID50/头份(国标为≥5000 TCID50/头份)。只有保证最基本的病毒含量,才能产生足够的免疫力,才能在伪狂犬病净化的道路上提供保障。

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