 侵袭性肺真菌病临床表现不典型易被基础疾病所掩盖，确诊通常需要侵入性的组织标本，而侵入性的操作过程常因患者的病情所限难以实施。因此有较高的漏诊率。目前国内大多数医院都在开展非侵袭性实验室技术如G试验和GM试验，成为真菌感染的诊断标准之一，以提高真菌感染的阳性率。 根据侵袭性肺真菌病诊断指南，真菌感染的诊断因素包括宿主因素、临床特征、微生物学检查、组织病理学。确诊疾病必须依赖组织病理等有创检查和操作，培养过程又需要一定时间，从而无形中增加了漏诊率，而新的血清学诊断方法，包括G试验、GM试验以及对于真菌特异DNA的PCR技术，与临床征象、微生物培养，尤其是CT扫描一起，为开始抢先治疗、监测疾病病程、评价治疗反应提供了更多有参考价值的资料。其中G试验、GM试验连续2次阳性为有意义的检查结果。 G试验 人体的吞噬细胞吞噬真菌后， 能持续释放1,3-β-D葡聚糖，使血液及体液中含量增高。通过 G 试验检测1,3-β-D葡聚糖的含量能够及时反映真菌感染情况。G试验适用于除隐球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期诊断，虽能测得包括曲霉和念珠菌在内的更多致病性真菌，且初步的临床研究显示有较好的敏感性和特异性，假阳性率较低，但它只能提示有无真菌侵袭性感染，并不能确定为何种真菌感染。 G试验检测一般先于临床症状平均4天，平均早于发热5天，是早期检测的重要手段。G试验检测值<70 pg/ml定义为阴性，此时不建议抗真菌治疗，当检测值在70-95="" pg/ml时定义为灰区，此为观察期，应连续监测，当检测值="">95 pg/ml定义为阳性，建议结合临床症状诊断治疗。  1,3-β-D葡聚糖检测（简称G试验） 原理：1,3-β-D葡聚糖可特异性激活鳌变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。 诊断：侵袭性真菌感染。可诊断多种致病真菌感染：念珠菌、曲霉菌、肺孢子菌、镰刀菌、地霉、组织胞浆菌、毛孢子菌等。不能用于检测隐球菌和接合菌感染。 检测标本：血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等 标本采集：静脉采血2ml（肝素抗凝）。  假阳性的情况 以下情况可出现假阳性：（1）使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；（2）静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）链球菌血症；（4）操作者处理标本时存在污染。另外，使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性，食用菌类，如蘑菇等食物可以导致假阳性。 GM试验 GM试验主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。半乳甘露聚糖（GM）是曲霉细胞壁的一种成分，GM从薄弱的菌丝顶端释放，曲霉菌感染的患者血液内存在GM.曲霉菌不入血，主要是侵袭血管壁，沿血管壁进行侵袭，进入血液。曲霉菌感染部位主要集中在肺部，从而引起肺部侵袭性曲霉，诊断曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长，关键在于其是否合成GM.如果痰液或肺泡灌洗液标本培养到曲霉菌 且GM试验检测结果为阳性，即可诊断为曲霉菌侵袭性感染。GM试验常可在患者临床症状出现前5-8d获得阳性结果和影像学出现异常之前7.2天出现，并可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测，因而往往可以使诊断提前。GM释放量与菌量呈正比，可以反映感染的程度，若两次检测阳性即可以诊断侵袭性曲霉菌感染，GM试验也可作为疗效判断的重要指标。GM实验检测值<0.65 ug/l定义为阴性，此时不建议抗真菌治疗。当检测值在0.65-0.85="" ug/l时定义为灰区，此为观察期，应连续监测，当检测值="">0.85 ug/l时定义为阳性，建议结合临床症状诊断治疗。 所以GM试验是诊断侵 袭性曲霉感染的微生物检查证据之一，通过检测GM值也可以作为治疗效 果的参考指标之一。  半乳糖甘露醇聚糖抗原检测（简称GM试验） 原理：是一种微孔板双抗体夹心法。采用小鼠单克隆抗体EBA-2，检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。半乳甘露聚糖是一种对热稳定的水溶性的物质，是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁中的一类多糖。 诊断：侵袭性曲霉菌感染（IPA） 标本采集：（分离胶管或普通管）。 标本采集：血清标本 假阳性的情况 （1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性：（1）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。 G试验和GM试验联合检测的优势 根据于书娴等 [2] 关于 G 试验和 GM 试验对侵袭性真菌病诊断价值的 Meta 分析研究，联合试验灵敏度可以达到 0．88，特异度可达到 0．81。G 试验的敏感性优于 GM 试验，特异性相似。并联（一者为阳性结果为阳性）的敏感性优于串联（二者均为阳性结果为阳性），串联的特异性优于并联。单独检测时，G 试验和 GM 试验诊断效果相似；联合检测比单独检测有较高的诊断效果，且串联时诊断效果最好。并且据任丽娜等 [3] 研究中显示，在临床抗真菌治疗过程中，根据血清 GM 含量的变化进行疗效监测，调整治疗方案及判断预后，对提高疾病的治愈率、降低病死率有重要的参考价值。 参考文献： [2] 于书娴、崔学范等，G 试验和 GM 试验对侵袭性真菌病诊断价值的 Meta 分析，中华肺部疾病杂志，2016.4，9（22）. [3] 任丽娜、周悦昌等，血清半乳甘露聚糖抗原检测在侵袭性肺曲霉菌病诊断及治疗监测中的应用，临床医药文献杂志，2015.8，A2（22）. 此段来源：丁香园 |
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