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侵袭性真菌病（invasive fungal disease，IFD）即以往所说的深部真菌病，是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。据WHO统计，能引起人类疾病的真菌约有270余种，尤其是深部真菌，可侵袭心、肺、血液、胃肠等人体各个器官和系统。真菌感染已成为临床感染学中不可忽略的一部分。 IFD宿主因素包括：免疫抑制性治疗：免疫抑制剂、糖皮质激素、恶性肿瘤、器官移植、放疗化疗等；免疫抑制性疾病：中性粒细胞减少、艾滋病等；长时间使用抗生素：已证实80%-90%的真菌血症主要因素是大量使用抗生素；免疫功能低下的患者：糖尿病、新生儿、肾功能衰退、血液透析、营养不良；长期入住ICU；创伤、烧伤、腹腔手术；体内留置试管；真菌寄殖。 侵袭性真菌感染传统的检测方法包括培养、细胞学检查和组织病理学检查、CT检查、PCR检测，这些诊断方法存在一些问题，比如血培养作用有限，某些播散性感染常常为假阳性，全身使用抗真菌治疗或其它原因易导致假阴性，非无菌部位标本阳性结果，难以判断是真菌定植或感染；细胞学检查和组织病理学检查需侵入性手段获取标本，全身使用抗真菌治疗或其它原因易导致假阴性；CT检查其它某些真菌或细菌感染也有可能出现相似征象，在免疫正常宿主相关研究较少；PCR检测目前尚未标准化，尚在研究阶段。因此，非培养技术对侵袭性真菌的早期诊断和临床用药具有重要意义。 G试验是指检测人体血液中真菌细胞壁成分1,3-β-D-葡聚糖（Glucan，BG）的试验，故称G试验。1,3-β-D-葡聚糖占真菌细胞壁成分＞50%，广泛存在于各种真菌。人体吞噬细胞吞噬真菌后能持续释放该物质，使血液中含量升高，因此可以作为侵袭性真菌的早期检测的重要指标。 GM试验是检测曲霉菌感染的经典血清学方法之一，其主要检测物质是半乳甘露聚糖（Galactomannan，简写GM）抗原。半乳甘露聚糖是曲霉菌特有的细胞壁多糖成份，当机体感染曲霉菌后，随着菌丝生长，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放出来，是最早释放的抗原，被认为是一种可靠的侵袭性曲霉菌感染早期诊断的生物标记物。半乳甘露聚糖抗原具有热稳定性和可溶性，通常可在血清，脑脊液和肺泡灌洗液中检测。GM的释放量通常与感染的菌量成正相关，可反映机体感染的程度。每周两次使用GM试验对高危患者的病情和治疗效果进行监测和评估。 G&GM试验对比表 区别 | G试验 | GM试验 | 诊断疾病 | 临床常见的侵袭性真菌感染 | 侵袭性曲霉菌感染 | 临床意义 | ① 可检测除隐球菌和接合菌外的多种真菌感染 ②对于念珠菌血症，G试验检测是首选检查方法 | ① GM试验阳性是侵袭性曲霉菌感染诊断标准中重要的微生物学依据 ②可实现侵袭性曲霉菌感染的早期诊断 ③可实现对高危人群曲霉菌感染的动态监测 ④可对抗真菌治疗提供用药依据和进行药效学评价 | 检测成分 | 真菌的细胞壁成分：1,3-β-D葡聚糖 | 半乳甘露聚糖 | 检测方法 | 动态显色法 | 酶联免疫法 | 检测原理 | 1,3-β-D葡聚糖可特异性激活鲎（hòu）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固 | 采用小鼠单克隆抗体EBA-2检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖，后者是对热稳定的水溶性物质，广泛存在于曲霉和青霉细胞壁中 | 诊断灵敏度 | 敏感性63%-100% | 敏感性64.5%-100% | 诊断特异性 | 特异性74%-100% | 特异性80%-98.7% | 应用优势 | ①在浅部真菌感染中，1,3-β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，因此可区分定植和感染 ②检测快速，可在1小时得出检测结果 ③G试验检测一般先于临床症状3-10天，是早期检测的重要手段 | ①可比侵袭性曲霉病（IA）临床症状平均早5-8天 ②比高分辨CT扫描平均早7.2天 ③比开始经验性抗真菌治疗平均早12.5天 | 应用缺陷 | 容易引起假阳性，无法区分真菌种类 | 某些药物和食物容易导致假阳性，假阳性率可高达18% | 标本类型 | 静脉血（红帽管）、尿液、脑脊液、胸腹水等 | 静脉血（红帽管）、尿液、脑脊液、胸腹水等 | 注意事项 | 空腹，避免溶血，黄疸和脂血标本会影响检测结果 | 空腹，避免溶血和反复冻融 | 参考范围 | 正常值＜70pg/mL | 正常值＜65μg/mL | 假阳性因素 | ①血液透析、腹膜透析（应用纤维素膜） ②病人输入白蛋白、球蛋白、脂肪乳、凝血因子 ③某些抗肿瘤药物如香菇多糖和磺胺类药物 ④某些细菌败血症（尤其是链球菌败血症） ⑤手术中使用棉纱、棉拭子 ⑥操作者处理标本时存在污染 | ①应用半合成青霉素哌拉西林/他唑巴坦等药物 ②与其他的细菌成分有交叉反应：皮炎芽生菌、拟青霉、马尔尼菲青霉菌、链格胞等 ③食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等 ④肠道中定值的曲霉释放GM进入血液循环 ⑤血液透析和自身免疫性肝炎等 | 假阴性因素 | ①检测隐球菌和接合菌感染（犁头霉、毛霉、根霉） ②抗原-抗体免疫复合物形成 ③抗真菌药的使用，如卡泊芬净，能非竞争抑制BG合成 ④标本放置时间过长（一般不超过6h） | ①释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除 ②以前使用了抗真菌药物 ③病情不严重 ④非粒细胞缺乏的患者 | 指南 | 欧洲癌症治疗研究组织（EORTC） 美国国家过敏症与传染病研究所霉菌病研究组（MSG）批准用于真菌诊断 中国血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则（第3次修改版本） | 欧洲癌症治疗研究组织（EORTC） 美国国家过敏症与传染病研究所霉菌病研究组（MSG）批准用于真菌诊断 中国血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则（第3次修改版本） | 念珠菌属 | + | - | 镰刀菌属 | + | - | 隐球菌属 | - | -/可有假阳性 | 曲霉菌属 | + | + | 青霉素/拟青霉 | + | -/可有假阳性 | 接合菌纲 | - | - | 建议 | ①与GM试验联合可提高阳性率 ②2次或2次以上阳性可降低假阳性率 ③高危患者建议每周检测1-2次 ④高危人群动态监测 | 高危人群动态监测，结合影像学、培养结果综合分析诊断 |
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