荧光法的血小板计数解决难缠的冷球蛋白干扰

开心100mm05xkw 2018-11-22

展开全文

患者，男，53岁，非霍奇金淋巴瘤。

初次检测PLT-I结果为817，血小板直方图未见明显异常，给出”Thrombocytosis(血小板增多)”的提示，红细胞直方图可见红细胞波峰左侧出现一明显波峰，为血小板直方图，同时给出”Anisocytosis(红细胞大小不均)”及”Anemia(贫血)”的提示，如图1所示：

图1

操作人员注意到血小板结果较高，复测后依旧，遂观察“Service”界面网织通道中，PLT-O为113，DLT-PLT-O为0.14，说明PLT-I与PLT-O存在很大差异。参考血小板直方图无明显异常，及该患者的临床诊断为非霍奇金淋巴瘤，怀疑可能为少见的冷球蛋白干扰PLT-I计数的情况。使用手握复温15min的方法，检测结果如图2所示：

图2

PLT-I被纠正到109，PLT-O为124，DLT-PLT-O为1.14，二者结果接近，同时PLT直方图无异常提示，RBC直方图红细胞波峰左侧波峰消失，提示手握复温效果明显。

为验证温度对该样本PLT-I的影响，将其置于22℃左右的室温下，每隔30-40min检测一次，检测结果如下表所示：

由上表可见，该例样本在置于22℃左右室温下，随着时间推移，PLT-I呈逐渐升高趋势，这与其在18℃—25℃易生成^【1】的特点相符，而PLT-O结果则很稳定，说明PLT-O可以排除干扰。经过与临床沟通后，该患者曾在外院诊断为冷球蛋白血症，与我们初步的判断一致。

笔者查询了文献及报道，整理出冷球蛋白在低温析出时，镜下形态，如图3、4箭头所示：

图3

图4

冷球蛋白对PLT-I计数的干扰，取决于其在低于37℃析出时的体积，如果体积刚好落于PLT-I的计数范围时，则会影响PLT-I的计数。在影响计数的同时，还会在一定程度上影响MPV(平均血小板体积)^【1】，本案例在复温之后MPV由原来的9.7fL下降至8.9fL，下降幅度接近10%，若冷球蛋白体积较大，则有可能会影响到RBC或者WBC的阻抗法计数结果^【1】。

就其对血小板的干扰作用，相对于其他干扰因素(大血小板，红细胞碎片，小红细胞)，是十分严重的，在计数上，PLT-I的计数往往是PLT真实值的10倍甚至数十倍。在特征上，PLT直方图无法直观地反应出该干扰因素的存在，甚至不会引起仪器报警，具有非常强的隐匿性，极容易造成检验科漏诊及临床误诊。

PLT-O及PLT-F的检测原理是基于荧光染色，与流式细胞分析法原理类似，由于非血小板颗粒不会被荧光染料染色，所以抗干扰能力得以加强。随着该检测方法的普及，血小板干扰因素多样化，相关人员对其的重视程度的增强，我们希望PLT-O及PLT-F可以在不久的将来代替PLT-I，成为血小板计数的常规检测技术，以为临床提供一份可靠的报告！由于冷球蛋白被发现于多种疾病当中，临床医生也应该对冷球蛋白血症引起重视，当怀疑可能存在冷球蛋白血症症状的患者，也应该与检验科室沟通，关注血小板计数，从而避免漏误诊。

附：冷球蛋白血症相关介绍，1947年冷球蛋白被首次描述。冷球蛋白血症(cryoglobulinemia，CG)是指人体血液中含有冷球蛋白的一类疾病^【2】。冷球蛋白是血清中由Ｂ淋巴细胞增殖产生的一种或多种免疫球蛋白,这些免疫球蛋白在温度低于37℃时沉淀,复温后溶解，这一现象是患者体外实验的结果，关于冷球蛋白的研究多以案例分析报道。

根据病因及冷球蛋白成分可将此病分为3型:Ⅰ型多见于血液系统恶性疾病，如淋巴瘤;Ⅱ型，多见于丙型肝炎、乙型肝炎;Ⅲ型，多继发于结缔组织疾病。在一定条件下，冷球蛋白可沉积于血管内，进而诱发免疫复合物的沉积，导致多系统多器官受累^【3】。CG可累及皮肤黏膜、骨关节等。5%～60%的患者有肾脏受累，表现为肾病综合征、肾炎综合征、急性肾损伤。

参考文献：

[1]Fohlen-Walter A，Jacob C, LecompteT, etal. Laboratory identification of cryoglobulinemia from automated blood cellcounts, freshblood samples, and blood films［J］. AmJ Clin Pathol, 2002, 117(4) :606614.