一种药物组合物和用途的制作方法

专利名称：一种药物组合物和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种由丹参提取物和降香提取物组成的药物组合物和用途，具体涉及一种由丹参水溶性成分、脂溶性成分和降香挥发油(简称降香油)组成的药物组合物和用途。
背景技术：
丹参Salviamiltiorrhiza是具有活血化瘀功效的传统中药，对心脑血管疾病具有显著疗效，丹参的活性成分可以分为水溶性和脂溶性两部分，丹参的水溶性活性成分主要为丹参酚酸，主要包括丹参酚酸B、迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛等，丹参的脂溶性活性成分主要包括丹参酮IIA、丹参酮I和隐丹参酮。
中药降香为豆科植物降香檀Dalbergia o dorifera T.chen树干和根的干燥心材。降香功能为行气止痛，活血止血，用于心胸闷痛，脘胁刺痛，外治跌打出血。降香能抑制血栓形成，其起抗凝作用的成份可能为挥发油成份訾慧，指导沙明，中药降香研究进展，辽宁中医学院学报，第5卷，第2期，2003年5月。
目前市场上丹香注射液中丹参、降香提取物采用以下方法制备取丹参和降香二味，降香加水浸润后，加水蒸馏，收集蒸馏液，冷藏24小时，分去油层，滤过，水溶液另器收集；丹参加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，加入乙醇使含醇量达75％，冷藏48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，再加入乙醇使含醇量达85％，冷藏48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，即得WS-11489(ZD-1489)-2002，国家药品监督管理局标准(试行)，丹香冠心注射液。
丹参的脂溶性活性成分主要包括丹参酮IIA、丹参酮I和隐丹参酮。丹参的水溶性活性成分主要为丹参酚酸，主要包括丹参酚酸B、迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛等。本发明人经过大量的实验研究，发现由丹参水溶性成分和脂溶性成分以及降香油组成的药物组合物在治疗心血管系统方面的疾病具有协同作用，该药物组合物中丹参水溶性成分和脂溶性成分本身具有协同作用，又与降香油组成协同作用，其在治疗冠心病、心绞痛等心肌缺血疾病方面的作用明显优于传统的香丹注射液。

发明内容
本发明提供了一种由丹参提取物和降香油组成的药物组合物。
本发明还提供了该药物组合物在制备治疗或预防冠心病、心绞痛等药物中的应用。
本发明所述的药物组合物中丹参提取物和降香油的比例为1∶0.11-9。
其中丹参提取物由丹参脂溶性成分和水溶性成分组成，脂溶性成分主要包括丹参酮IIA、丹参酮I和隐丹参酮等，其丹参酮(以丹参酮IIA计)含量在15％以上，优选为50％以上；水溶性成分主要包括丹参酚酸，其含量(以丹参酚酸B计)在20％以上，优选为50％以上；以上含量均指重量百分含量，脂溶性成分与水溶性成分的比为1∶10-20。
本发明提出的药物组合物可以是软胶囊、滴丸、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、微粒剂，优选软胶囊、滴丸，各种制剂均可以按常规方法制备。
本发明提供的药物组合物在用于心血管疾病时，其使用剂量范围是400mg～8000mg，优选为400mg～4000mg。
本发明提出的丹参提取物可以由但不限于以下方法制得丹参粗粉酸水(pH4±0.5)溶胀8小时，用14倍药材体积的酸水(pH4±0.5)渗漉，渗漉液减压浓缩至密度1.1-1.15(60-70℃)，浓缩液用75％乙醇沉淀24小时，上清液减压浓缩(50-60℃)，浓缩后的浸膏减压干燥即得丹参水溶性成分，丹参酸水渗漉后的药渣用95％乙醇浸泡12h，95％乙醇渗漉，渗漉速度5-8ml/min，收集渗漉液10-14倍量。渗漉液减压浓缩(50-60℃)、浓缩后的浸膏减压干燥(60-70℃)，得丹参脂溶性成分的提取物，将丹参水溶性成分与丹参脂溶性成分合并，即得丹参提取物。
本发明提出的降香油可以由但不限于以下方法制得降香粗粉水溶胀4小时，置多功能提取器中，水蒸汽蒸馏8小时，分去水层得降香挥发油。
本发明人进行了下列试验来证实以丹参提取物和降香油为活性成分的药物组合物在制备治疗或预防心血管疾病的药物中的作用，且其作用远强于单用同剂量丹参提取物或降香油或传统香丹注射液，但本发明并不仅限于此。
具体实施例方式
实施例1 制备丹参提取物丹参粗粉1000g，酸水(PH4±0.5)溶胀8小时，用14倍药材体积的酸水(PH4±0.5)渗漉，渗漉液减压浓缩至密度1.1-1.15(60-70℃)，浓缩液用75％乙醇沉淀24小时，上清液减压浓缩(50-60℃)，浓缩后的浸膏减压干燥(60-70℃)得200.0g，其中丹参酚酸含量20％以上。
将丹参经酸水渗漉后的药渣用95％乙醇浸泡12h，95％乙醇渗漉，渗漉速度5-8ml/min，收集渗漉液10-14倍量。渗漉液减压浓缩(50-60℃)、浓缩后的浸膏减压干燥(60-70℃)，得20.0g，其中丹参酮含量15％以上。
实施例2 制备丹参提取物丹参粗粉1000g，酸水(PH4±0.5)溶胀，用14倍药材体积的酸水(PH4±0.5)渗漉，渗漉液上AB-8大孔树脂(0.5g/ml生药)，0.1mol/L酸水洗脱杂质(约5倍柱体积)，95％乙醇洗脱丹参酚酸B，洗脱液减压浓缩、干燥，得70g，其中丹参酚酸含量50％以上。
丹参粗粉1000g加入萃取釜，保持萃取压力15～25MPa，萃取温度45～60℃；CO2流量30L/h，夹带剂加入量400ml(95％乙醇)，萃取时间3小时，分离器压力5～8MPa，温度45～65℃下分离。萃取物减压干燥，得5g，其中丹参酮含量60％以上。
实施例3 制备降香挥发油降香粗粉1000g水溶胀4小时，置多功能提取器中，水蒸汽蒸馏8小时，分去水层得降香挥发油，得25g。
实施例4 制备降香挥发油降香粗粉1000g加入萃取釜，保持萃取压力20～30MPa，萃取温度35～55℃；CO2流量25-35L/h，萃取时间3小时，分离器压力5～8MPa，温度45～65℃下分离，得降香油30g。
实施例 5滴丸的制备丹参提取物16.5g降香油1.9gPEG4000 30.1gPEG6000 4.3g55g(1000丸)制备方法取丹参提取物约16.5g，降香油1.9g，与基质(PEG4000和PEG6000)按比例混合，90-100℃水浴上加热成为熔融液态，混匀后注入滴丸机，维持料液温度110℃左右，滴入5℃二甲基硅油中，取出滴丸擦去二甲基硅油，干燥，选丸，包装，即得成品。
实施例6 软胶囊的制备丹参提取物180g降香油19g蜂蜡 3.5g大豆色拉油适量至350g(1000粒)
制备方法取粉碎过140目筛的丹参提取物约180g，降香油19g，加入事先将蜂蜡3.5g，与大豆色拉油适量加热熔融的油相中，搅拌混悬后过胶体磨两遍，于软胶囊机上压囊，干燥，包装，即得成品。
试验例1 丹参提取物中水溶性成分与脂溶性成分对大鼠心肌缺血损伤治疗协同作用的影响材料丹参提取物按制备例2方法制备；丹参提取物称取丹参提取物水溶性成分与脂溶性成分，按试验要求配制需要的比例与浓度；氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)，由军事医学科学院药材供应站提供。
实验动物普通级SD大鼠，雄性，体重280g-350g，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。合格证号鲁动质字200106005号。
方法与结果动物随机分为模型组(生理盐水)、硝苯地平组(6mg/kg)、丹参水溶性成分组(30mg/kg)、丹参水溶性成分组(63mg/kg)、丹参脂溶性成分组(30mg/kg)、丹参脂溶性成分组(63mg/kg)、丹参水溶性成分(57.3mg/kg)+丹参脂溶性成分(5.7mg/kg)剂量组、丹参水溶性成分(59mg/kg)+丹参脂溶性成分(4mg/kg)剂量组、丹参水溶性成分(60mg/kg)+丹参脂溶性成分(3mg/kg)剂量组，每组10只。硝苯地平组在麻醉前灌胃给药，其余各组连续灌胃给药3天，末次给药前16小时禁食。ip.乌拉坦(1.2g/kg)麻醉，测肢体II导联心电图。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左缘1cm处，剪开胸壁肌肉及二条肋骨，迅速打开胸腔，暴露心脏，在动脉圆锥与左心耳之间结扎左冠状动脉，立即将心脏放回，排挤出胸腔空气，用止血钳闭合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型记录给药前及给药后1.5h、3h心电图，测量心电图J点的升高值，6h后取出心脏，以冷生理盐水洗净后，-20℃冰箱冷冻过夜。次日，将冷冻的心脏由结扎处至心尖部等厚切成5片，浸入新鲜配制的0.25％N-BT磷酸缓冲液(pH 7.4)中。37℃水浴振摇10～15min。用滤纸吸干切片表面的染色液，分离染色部分和未染色部分，称重，记算梗死面积。梗死面积(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。数据用 表示，以组间t检验进行统计学处理。
结果如表1所示，心肌缺血6小时后，模型组大鼠心肌出现明显的灶状缺血区，达到25％左右。丹参水溶性成分组(30mg/kg)、丹参脂溶性成分组(30mg/kg)组未能降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积；丹参水溶性成分组(63mg/kg)、丹参脂溶性成分组(63mg/kg)组均在一定程度上降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积(与模型组比较，p＜0.05)；组合物剂量组丹参水溶性成分组(57.3mg/kg)+丹参脂溶性成分组(5.7mg/kg)、组合物剂量组丹参水溶性成分组(59mg/kg)+丹参脂溶性成分组(4mg/kg)、组合物剂量组丹参水溶性成分组(60mg/kg)+丹参脂溶性成分组(3mg/kg)显著地降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积(与模型组比较，p＜0.01)；组合物剂量组丹参水溶性成分组(57.3mg/kg)+丹参脂溶性成分组(5.7mg/kg)、组合物剂量组丹参水溶性成分组(59mg/kg)+丹参脂溶性成分组(4mg/kg)、组合物剂量组丹参水溶性成分组(60mg/kg)+丹参脂溶性成分组(3mg/kg)对肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积与丹参水溶性成分组(63mg/kg)、丹参脂溶性成分组(63mg/kg)比较亦有显著性差异(p＜0.05)。
表1 丹参水溶性成分、丹参脂溶性成分、丹参水溶性成分和丹参脂溶性成分组合物对大鼠心肌缺血损伤的影响

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
与丹参水溶性成分中剂量组比较，#P＜0.05；与丹参脂溶性成分中剂量组比较，MP＜0.05试验例2 药物组合物对大鼠心肌缺血损伤的影响材料传统香丹注射液丹参100g、降香1000g按照标准号WS-11489(ZD-1489)-2002方法提取、按注射液制备工艺制备，丹参提取率为12.0％，降香为0.02％，制成1000ml；丹参提取物、降香油按制备例1、5方法制备；丹参提取物与降香油组合物称取丹参提取物、降香油适量，按试验要求配制需要的比例与浓度。
在同生药剂量下香丹注射液1.0mL/kg相当于本药物组合物丹参提取物20mg/kg+降香油20mg/kg。
氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)，由军事医学科学院药材供应站提供。
实验动物普通级SD大鼠，雄性，体重280g-350g，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。合格证号鲁动质字200106005号。
方法与结果
动物随机分为模型组(生理盐水)、硝苯地平组(6mg/kg)、香丹注射液1.0mL/kg组、香丹注射液2.0mL/kg组、丹参提取物组(20mg/kg)、丹参提取物组(40mg/kg)、降香油组(20mg/kg)、降香油组(40mg/kg)、丹参提取物(4mg/kg)+降香油(36mg/kg)剂量组、丹参提取物(36mg/kg)+降香油(4mg/kg)剂量组、丹参提取物(6.7mg/kg)+降香油(33.3mg/kg)剂量组、丹参提取物(33.3mg/kg)+降香油(16.7mg/kg)剂量组、丹参提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)剂量组、丹参提取物(13.3mg/kg)+降香油(26.7mg/kg)剂量组、丹参提取物(26.7mg/kg)+降香油(13.3mg/kg)剂量组、丹参提取物(100mg/kg)+降香油(100mg/kg)剂量组、丹参提取物(200mg/kg)+降香油(200mg/kg)剂量组、丹参提取物(400mg/kg)+降香油(400mg/kg)剂量组。每组10只。硝苯地平组在麻醉前灌胃给药，其余各组连续灌胃给药3天，末次给药前16小时禁食。ip.乌拉坦(1.2g/kg)麻醉，测肢体II导联心电图。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左缘1cm处，剪开胸壁肌肉及二条肋骨，迅速打开胸腔，暴露心脏，在动脉圆锥与左心耳之间结扎左冠状动脉，立即将心脏放回，排挤出胸腔空气，用止血钳闭合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型记录给药前及给药后1.5h、3h心电图，测量心电图J点的升高值，6h后取出心脏，以冷生理盐水洗净后，-20℃冰箱冷冻过夜。次日，将冷冻的心脏由结扎处至心尖部等厚切成5片，浸入新鲜配制的0.25％N-BT磷酸缓冲液(pH 7.4)中。37℃水浴振摇10～15min。用滤纸吸干切片表面的染色液，分离染色部分和未染色部分，称重，记算梗死面积。梗死面积(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。数据用 表示，以组间t检验进行统计学处理。
结果如表2所示，心肌缺血6小时后，模型组大鼠心肌出现明显的灶状缺血区，达到26％左右。丹参提取物20mg/kg、降香油组20mg/kg、香丹注射液1.0mL/kg组未能降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积；丹参提取物40mg/kg、降香油40mg/kg、香丹注射液2.0mL/kg组均在一定程度上降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积(与模型组比较，p＜0.05)；组合物剂量组丹参提取物(4mg/kg)+降香油(36mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(6.7mg/kg)+降香油(33.3mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(36mg/kg)+降香油(4mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(33.3mg/kg)+降香油(6.7mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(13.3mg/kg)+降香油(26.7mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(26.7mg/kg)+降香油(13.3mg/kg)显著地降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积(与模型组比较，p＜0.01)；组合物剂量组丹参提取物(4mg/kg)+降香油(36mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(6.7mg/kg)+降香油(33.3mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(36mg/kg)+降香油(4mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(33.3mg/kg)+降香油(6.7mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(13.3mg/kg)+降香油(26.7mg/kg)、组合物剂量组丹参提取物(26.7mg/kg)+降香油(13.3mg/kg)对肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积与丹参提取物40mg/kg组、降香油40mg/kg组比较亦有显著性差异(p＜0.05)；组合物剂量组8丹参提取物(100mg/kg)+降香油(100mg/kg)、组合物剂量组9丹参提取物(200mg/kg)+降香油(200mg/kg)、组合物剂量组10丹参提取物(400mg/kg)+降香油(400mg/kg)极其显著地降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积(与模型组比较，p＜0.001)；组合物剂量组9丹参提取物(200mg/kg)+降香油(200mg/kg)与组合物剂量组10丹参提取物(400mg/kg)+降香油(400mg/kg)比较，对肢体导联心电图J点的升高及缺血面积无明显差异(p＞0.05)。
组合物剂量组丹参提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)对肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积与香丹注射液组2组比较亦有显著性差异(p＜0.05)。
表2 丹参提取物、降香油、丹参提取物和降香油组合物对大鼠心肌缺血损伤的影响()

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
与丹参提取物中剂量组比较，#P＜0.05；与降香油中剂量组比较，Mp＜0.05；与香丹注射液组2比较，aP＜0.05。
权利要求
1.一种由丹参提取物和降香油组成的药物组合物，其中丹参提取物由丹参脂溶性成分和水溶性成分组成，100％＞丹参酮含量≥15％，100％＞丹参酚酸含量≥20％，脂溶性成分与水溶性成分的比为1∶10-20，丹参提取物和降香油的比为1∶0.11-9。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，优选为丹参提取物中100％＞丹参酮含量≥50％，100％＞丹参酚酸含量≥50％。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，可以以软胶囊、滴丸、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或微粒剂的形式存在。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，优选为软胶囊、滴丸。
5.权利要求1或2所述的药物组合物在制备治疗或预防冠心病、心绞痛等药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其使用剂量范围是400mg～8000mg。
7.根据权利要求6所述的应用，优选为400mg～4000mg。
全文摘要
本发明提供了一种由丹参提取物和降香提取物组成的药物组合物和用途，具体涉及一种由丹参水溶性成分、脂溶性成分和降香挥发油组成的药物组合物以及该组合物在制备治疗或预防冠心病、心绞痛等心肌缺血疾病方面的应用。
文档编号A61K9/14GK101023983SQ20061004247
公开日2007年8月29日 申请日期2006年2月23日 优先权日2006年2月23日
发明者雷庆忠, 蒋王林 申请人:山东绿叶天然药物研究开发有限公司