一种抗肿瘤药物制剂的制作方法

专利名称：一种抗肿瘤药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗肿瘤药物制剂及其制备方法，属医药技术领域。
技术背景据世界卫生组织1997年度报道，1996年全球58亿人口中因癌症死亡约有630万人，约 占总死亡人数的12%,其中近60%死于肺癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、口腔癌、肝癌、宫颈 癌及食管癌，是仅此于心血管疾病的第二大死因。从1996年以来全球每年新确诊的肿瘤患者 均在1030万人以上，到1999年底全球肿瘤患者总数已逾4000万人。世界卫生组织2001年 报道，世界癌症发病率和死亡率比1990年上升了22%，今后20年还将上升大约50%。近年 来乳腺癌和前列腺癌的发病率呈上升趋势，胃癌发病率略有下降，但癌症总体发病率呈上升 趋势。西方发达国家较易发的癌症类型依次为乳腺癌、肺癌、前列腺癌、结肠癌、直肠癌和 卵巢癌。 —流行病学研究提示，我国不仅肿瘤死亡率呈明显上升趋势，而且兼有发展中国家和发达 国家髙发谱并存的特点。据国家卫生部信息中心的报道，近年来危害我国民众的主要癌症类 型依次为胃癌、肝癌、肺癌、食管癌等。据我国卫生部统计，20世纪90年代我国肿瘤发病 率已上升为127例/10万人。近年来我国每年新增肿瘤患者160-170万人，总数估计在450万 人左右。恶性肿瘤是严重威胁人类健康的一类常见疾病，寻找有效的抗癌药物和方法，是世界医 学面临的重要课题。中药是祖国医学用来防治疾病的有力武器，人们发现中药治疗恶性肿瘤， 无论是在减轻临床症状，提高生存质量，防止复发转移，延长生存期，还是在与放化疗配合， 增效减毒等方面都有很好的效果。现代药理研究结果表明龙葵、天花粉、薏苡仁等中药有抗肿瘤作用。 龙葵为植物茄科龙葵SolanumnigrumL.的全草，苦、辛、凉，小毒，归肺、胃、肝、脾、 大肠、膀胱经。败毒抗癌、疗疮消肿、散血逐瘀、祛湿利水。龙葵载于《唐本草》，苏敬谓 '即关河间谓之苦菜者，叶圆花白，子若牛李子，生青熟黑。'《图经本草》称龙葵为'苦葵'、 '天茄子'，苏颂谓'叶圆似排风而无毛，花白，实若牛李子，生青熟黑亦似排风子。《本草纲 目>〉草部隰草类称龙葵为'水茄'、'天泡草'和'老鸦酸浆草'，李时珍谓'皆处处有之，四月生苗，嫩时可食，柔滑，渐高二、三尺，茎大如筋，似灯笼草而无毛，叶似茄叶而小，五 月以后开小白花，五出黄蕊，结子正圆，大如五味子，上有小蒂数颗同缀，其味酸，中有细 子亦如茄子之子，但生青熟黑者为龙葵'。
龙葵全草含生物碱苷'龙葵碱(e-Solanigrine)、 S-龙蔡喊(S-Solanigrine);另含龙葵定 碱(Solanigridine)、澳洲茄碱(Solasonine)与澳洲茄边碱；澳洲茄碱与澳洲琉边碱水解后的苷元 是澳洲茄胺(solasodine)，龙葵碱水解后的苷元是龙葵胺，龙葵中尚含少量阿托品及皂苷等。 生物碱含量以未成熟果实为最多，在未成熟的果实中可达4.2%，主要为澳洲茄边碱，果实成 熟后则消失。其苷元是薯蓣皂苷元(Diosgenin)和替告皂苷元(Tigogenin));并含维生素A类物 质和维生素C，树脂。研究表明采用MTT法筛选龙葵碱对不同肿瘤细胞株的细胞毒作用，发现龙葵碱对人肝癌 细胞HepG2的细胞毒作用较强。机制研究表明龙葵碱通过诱导肿瘤细胞凋亡途径达到抗人肝 癌H邻G2的作用，龙葵碱能够引起细胞膜电位降低，即PT孔道(线粒体通透性改变孔道， permeability transition)开放，同时引起细胞内[Ca']升高[Gao SY, WangQJ， JiYB. Effete of solanine on the membrane potential of mitochondrion and [Ca2+] in HepG2. World J Gastroenterol]。 PT孔道的开放导致细胞内Ca^的被动转运，使细胞内[Ca&]升高，从而启动 细胞凋亡机制达到抗肿瘤的作用。研究表明，龙葵碱可显著抑制S180、 H22小鼠肿瘤细胞膜Na+， K+-ATPase及Ca2+, Mg2+-ATPase的活性，其中37.50mg/kg组对S180、 H22小鼠肿瘤细胞膜Na+， K+-ATPase活 性显著降低(PO.Ol)，对S180小鼠肿瘤细胞膜Ca2、 Mg2+-ATPase活性也是具有显著降低作 用(PO.Ol),但对H22小鼠肿瘤细胞膜Ca2+， Mg2+-ATPase活性降低作用并不十分显著(PO.05); 中剂量组对H22小鼠肿瘤细胞膜Ca2+， Mg2+-ATPase活性降低作用十分显著(PO.01);低剂量 组则无统计学意义(P〈0.05)。龙葵碱对肿瘤细胞膜Na+， K+-ATPase及Ca2+, Mg2+-ATPase有 显著的抑制作用，这一作用使肿瘤细胞的异常增生受阻，使其细胞代谢的能量不足，从而无 法进行'正常'的细胞增殖，进而发挥抑制肿瘤细胞的作用。这可能是其抗肿瘤作用的机理 之一(季宇彬，等龙葵碱对肿瘤细胞膜ATP酶活性的影响哈尔滨商业大学学报(自然科学版) 2005第21巻第2期)。实验结果表明小鼠皮下注射龙葵碱剂量达到37.50mg/kg时，S180和H22小鼠肿瘤细胞 RNA水平明显降低，DNA水平明显增高，表明肿瘤细胞内DNA转录形成RNA的代谢受到 抑制，这也意味着肿瘤细胞内基因产物——蛋白质的合成受阻，从而抑制肿瘤细胞的生长。 给药组RNA和DNA的比值与阴性对照组比较差异显著(PO.Ol)，证明37.50、 18.75mg/kg龙 葵碱对S180和H22小鼠肿瘤细胞DNA和RNA的代谢有逆转作用(季宇彬，王宏亮龙葵碱 对荷瘤小鼠肿瘤细胞DNA和RNA的影响中草药，2005，36(8):1200)。天花粉为葫芦科植物栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim或双边栝楼Trichosanthes rosthomii Harms的干燥根，味苦，性寒。气味颇轻，有升有降，阴中有阳。最凉心肺，善解
热渴，大降膈上热痰，消乳痈肿毒痔疮疖，排脓生肌长肉。传统医学中用于治疗热病烦渴， 肺热燥咳，疮疡肿毒等。天花粉蛋白(Trichosanthin， TCS)为天花粉的有效成分，近年来通过 对天花粉蛋白结构和功能的深入研究，发现天花粉蛋白除具有传统中医药的作用外，还具有 抗肿瘤的作用[高富红，孙健，吴国娟动物医学进展2005年第26巻第11期]。给小鼠腹腔 注射天花粉针剂5mg/kg，间隔4d 6d重复给药l次，对小鼠早期移植性肝癌腹水型肿瘤有明 显抑制作用，使动物的生存期延长率达61% 70%，给药组的动物体重增加比生理盐水对照 组显著减少；腹水中癌细胞数，天花粉组占13.50%，对照组占卯.44%，腹水中淋巴细胞数， 给药组占86.43%，对照组占9.56%。不同剂量的天花粉蛋白加入到不同分化程度的胃癌细胞 中，在96孔微孔板培养24h后以MTT比色法测定其杀伤率，结果天花粉蛋白终浓度为 1.0mg/kg时杀伤率达73y。以上。其抗肿瘤机制如下1.抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋 亡肿瘤的发生有其遗传物质基础，主要表现为多基因突变所致的细胞失控性生长，细胞增 殖失控和凋亡受阻是其发生、发展的主要原因，有效的诱导肿瘤细胞凋亡是肿瘤治疗的新手 段之一。有人研究发现天花粉蛋白对小鼠黑色素瘤细胞有明显抑制作用，可明显抑制小鼠黑 色素瘤细胞S期DNA合成，干扰蛋白质代谢，从而抑制瘤细胞的分裂增殖。还有人发现TCS 能够诱导不同分化程度的胃癌细胞调亡，通过下调胃癌SGC 7901细胞的Bcl-2和c-myc基因 的表达而诱导其凋亡，其诱导凋亡的作用与TCS的浓度和作用时间相关。2.抑制肿瘤细胞 蛋白质的合成TCS能抑制真核细胞蛋白质的合成，因而抑制细胞生长，与蓖麻毒蛋白A链 的作用机理相似，天花粉蛋白也是RNAN糖苷酶型的核糖体失活蛋白，作用于核糖体大亚基 rRNA中A4324特定位点，专一性地使真核细胞的核糖体失活，而阻断其蛋白质合成。蕙苡仁为未本科植物薏苡Coix lacryma-jobbi L. var. mayuen( Roman)Stapf的成熟种仁。味 甘淡，性微寒。利水健甘淡微寒，入肺脾肾经，渗湿、健脾是其两大功能。利水渗湿以治小 便不利，除湿利痹以治湿滞痹痛，且能健脾止泻，又能排脓消痈之效，性属和平，泻而不峻，补而不腻。乃清补淡渗之品，唯药力和缓，且质地较重，故用量须倍于他药。《本草衍义》 '此物力势和缓，须加倍用即见效。'《中国药植图鉴》'治肺水肿，湿性肋膜炎，排尿 障碍，慢性胃肠病，慢性溃疡。'《本草新编》'薏仁最善利水，不致损耗真阴，凡湿盛 在下身者，最宜用之。'蕙苡仁含丰富的碳水化合物，其主要成分为淀粉及糖类，并含有脂肪、蛋白质、薏苡仁 酯、亮氨酸、赖氨酸、维生素B,等营养物质。薏苡仁能抑制癌细胞的增殖，可供多种恶性 肿瘤之人食用，尤其适宜于肠、胃、肾、肺等部位的癌症患者。近年研究表明薏苡仁的活性成分(薏苡仁酯、薏苡仁油)及总提取物均有很强的抗肿瘤作 用。人鼻咽癌的治疗以放疗为主，而薏苡仁酯(CXL)能提高鼻咽癌CNE-2Z细胞对放射(600) 做射源)的敏感性和乏氧CNE-2Z细胞的辐射敏感性，也能和射线相互作用产生协同效应，增 强射线对CNE-2Z细胞的辐射敏感性，因此在放疗过程中常用薏苡仁作辅助治疗。此外，CXL 还能选择性的增强平阳霉素的细胞毒性作用，对平阳霉素抑制人彝咽癌细胞增殖起增效作用， 对5-氟脲嘧啶杀伤细胞也具有选择性的增效作用；并能选择性的通过效应修饰机制加强顺铂 的细胞毒性，但不增强顺铂抑制骨髓造血的副作用。表明CXL能增强放疗药物的作用，并降 低其副作用。另有报道CXL对人鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖呈浓度依赖性抑制，即能选择性 的抑制人募咽肿瘤细胞中CNE-2Z的增殖。CXL还能通过对荷瘤小鼠红细胞膜Na+/K+-ATP酶的抑制发挥抗肿瘤作用。其主要途径 是促使Na+/K+-ATP酶活性降低，导致作用底物ATP含量升高，引起cAMP合成的增多，进 而抑制肿瘤细胞的生长；促进红细胞免疫作用已阻止肿瘤血路的转移；促进细胞免疫功能， 杀伤肿瘤细胞；降低血钠浓度，抑制肿瘤生长。薏苡仁总提取物则对晚期原发性肝癌患者的 免疫功能有促进作用，并对患者的肝癌细胞有较好的毒性作用。其与顺铂或丝裂酶素合用能 显著提高对小鼠抑制肿瘤S180及肝癌H22的抑瘤率；对化疗药物所致免疫器官萎縮，巨噬 细胞吞噬功能下降及白细胞减少都有明显的保护作用；还能提高细胞的活性。也能通过抑制 细胞增殖和诱导细胞凋亡来直接抑制SGC-7901胃癌细胞的生长，对胃癌有一定的治疗作用。 还对非小细胞肺癌多药耐药基因有一定的影响，可用于肺癌的辅助治疗。有报道认为抑制血管生成是抗肿瘤的途径之一。薏苡仁注射液(主要成分为蕙苡仁脂肪油)可通过抑制血管生成 而达到抗肿瘤的目的；它能通过抑制血管内皮分裂和迁移，使细胞周期阻止于GhM期，DNA 合成期(S期)比例减少；抑制肿瘤细胞释放血管生成正相调控因子；以抗体的形式阻断血管生 成正相调控因子或其受体；干扰内皮细胞分化成完整的毛细血管，防治新生血管与宿主血管 之间的吻合形成[赵素霞，程再兴，李连珍等河南中医2004年第24巻第2期]。半支莲为唇形科植物半支莲Scutellaria barbataD. Don的全草。含生物碱、黄酮甙、酚类、 甾体、鞣质等成分。[性味与归经]辛、苦、凉。入肝、肺、胃经。清热解毒，活血，利尿。 经试验对部分癌肿有一定抑制作用。临床用于肺癌、肝癌、直肠癌、胃癌等山豆根，本品为豆科植物越南槐SophoratonkinensisGagnep.的干燥根及根茎。性味苦、 寒。入心、肺、大肠三经。清火，解毒，消肿，止痛。药理研究表明其有抗肿瘤作用小鼠 灌服广豆根浸剂60克/公斤/日，共16 21天，对于接种的子宫颈癌有明显的抑制作用。对肉 瘤一180的抑制率也达到25%以上。从广豆根中分离出来的苦参碱，对小鼠艾氏腹水癌无论 试管试验或整体动物试验都有效，氧化苦参碱则无效，对小鼠肉瘤一180则都有效。氧化苦 参碱的化疗系数为自力霉素(MitomycinC)的7.8倍。山豆根中所含的紫植素类(Pterocarpoid)、 槐树素(Sophoiaponicin)对肉瘤一180也有抑制作用，其母核Chromanocoumaran则无效，一
般讲右旋异构体比左旋者活性强，甙的活性比甙元强。应用白血病人的白细胞，以美蓝脱色 测定脱氢酶的活性，或用瓦伯呼吸器测定白细胞呼吸，山豆根(未鉴定品种)对急性淋巴细 胞型白血病和急性粒细胞型白血病患者白细胞的脱氢酶均有抑制作用，对前者的呼吸有轻度 抑制作用。白英为茄科植物白英Solanum lyratum Thumb. (S. dulcamara L. var. lyratum(Tbunb.) Sieb. EtZucc.)的全草。性味甘，寒、有小毒。归肝，胃经。清热利湿、解毒消肿。主要成分为P-羟基甾体生物碱甙，其水提取物及乙醇提取物均有抗肿瘤作用，在体外SL-C和SL-D对人宫 颈癌汀C-26有明显的抑制作用。 发明内容在文献调研的基础上，我们在研究中发现了一种抗肿瘤药物制剂的处方，具体地讲，它 是由龙葵1 10份、薏苡仁1 10份、紫草根1 10份、丹参1 10份、白英1 10份、天花粉 1~10份、连翘1 10份、甘草1 10份、黄芪1 10份、山豆根1 10份、半支莲1 10份组成， 其最佳比例为龙葵3份、薏苡仁3份、紫草根3份、丹参2份、白英3份、天花粉3份、连 翘3份、甘草1份、黄芪3份、山豆根6份、半支莲6份。其日处方量为龙葵3g蕙苡仁 3g天花粉3g紫草根3g山豆根6g半支莲6g白英3g连翘3g黄芪3g丹参2g甘草lg。方解恶性肿瘤属中医'癥瘕'、'积聚'范畴。《内经》云'正气存内，邪不可干'、'邪 之所凑，其气必虚'。正气虚弱为肿瘤发病的主要病因，正气虚弱，邪毒乘虛而入，邪正相争， 正不胜邪，邪毒聚积而成毒瘤，横溢流注，则瘤毒转移遍身。在本方中，龙葵、天花粉、蕙 苡仁败毒抗癌、疗疮消肿；半支莲、紫草根、山豆根、连翘、白英清热解毒，消肿散结、止 痛，利湿；黄芪益气托毒；丹参活血散瘀；甘草调和诸药。综观全方，可扶正祛邪，解毒消 肿。适应症肝癌、肺癌、膀胱癌、白血病、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎。我们采用现代中药提取技术得到药用组合物，与任选的药学上可接受的基质相混合，按 特定工艺制成药物制剂，具体方案如下1. 将上述11味药按处方量称取，加入8 12倍量的水，煎煮2次，每次60 120分钟， 放凉，静置过夜，过滤，合并滤液，浓縮得A液，备用2. 向八液中加入95%乙醇，使含醇量达75%,静置过夜，倾出上清液，回收乙醇，将 其浓缩得B液，备用；3. 将B液与任选的药学上可接受的基质相混合，按特定工艺制成药物制剂。 下列实施例说明本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例1胶囊剂(5000粒)处方龙葵1875g薏苡仁1875g天花粉1875g紫草根1875g山豆根3750g半支莲3750g
白英1875g连翘1875g黄芪1875g丹参1250g甘草625g1. 将上述11味药按处方量称取，加入8 12倍量的水，煎煮2次，每次60 120分钟， 放凉，静置过夜，过滤，合并滤液，浓縮得A液，备用2. 向A液中加入95。/。乙醇，使含醇量达75%，静置过夜，倾出上清液，回收乙醇，将 其浓縮得B液，备用；3. 将B液与适量的辅料混匀，制成颗粒，装入胶囊，制成5000粒，即得。实施例2胶囊剂(50000粒)处方龙葵18750g蕙苡仁18750g天花粉18750g紫草根18750g山豆根37500g半支莲 37500g白英18750g连翘18750g黄芪18750g丹参12500g甘草6250g1. 将上述11味药按处方量称取，加入8 12倍量的水，煎煮2次，每次6(M20分钟，放凉，静置过夜，过滤，合并滤液，浓縮得A液，备用；2. 向A液中加入95。/o乙醇，使含醇量达75%，静置过夜，倾出上清液，回收乙醇，将 其浓縮得B液，备用；3. 将B液与适量的辅料混匀，制成颗粒，装入胶囊，制成50000粒，即得。
权利要求
1.一种抗肿瘤药物制剂，其特征在于它是由龙葵1～10份、薏苡仁1～10份、紫草根1～10份、丹参1～10份、白英1～10份、天花粉1～10份、连翘1～10份、甘草1～10份、黄芪1～10份、山豆根1～10份、半支莲1～10份组成的；
2. 根据权利要求l， 一种抗肿瘤药物制剂，其特征在于它是由最佳比例为葵3份、蕙苡仁3 份、紫草根3份、丹参2份、白英3份、天花粉3份、连翘3份、甘草1份、黄芪3份、 山豆根6份、半支莲6份组成的；
3. 根据权利要求l， 一种抗肿瘤药物制剂，其特征在于它是由以下步骤实现的a. 将上述11味药按处方量称取，加入8 12倍量的水，煎煮2次，每次60~120分钟， 放凉，静置过夜，过滤，合并滤液，浓縮得A液，备用；b. 向A液中加入95n/。乙醇，使含醇量达75%，静置过夜，倾出上清液，回收乙醇，将其 浓縮得B液，备用；c. 将B液与任选的药学上可接受的基质相混合，按特定工艺制成药物制剂。
全文摘要
本发明公开了一种抗肿瘤药物制剂，其特征在于它是由龙葵1～10份、薏苡仁1～10份、紫草根1～10份、丹参1～10份、白英1～10份、天花粉1～10份、连翘1～10份、甘草1～10份、黄芪1～10份、山豆根1～10份、半支莲1～10份组成，其最佳比例为龙葵3份、薏苡仁3份、紫草根3份、丹参2份、白英3份、天花粉3份、连翘3份、甘草1份、黄芪3份、山豆根6份、半支莲6份。采用现代药物提取技术提取得到药用组合物，与任选的药学上可接受的基质相混合，按特定工艺制成药物制剂。
文档编号A61K36/8945GK101147785SQ200610152949
公开日2008年3月26日 申请日期2006年9月21日 优先权日2006年9月21日
发明者李玉娟, 王翰斌 申请人:北京琥珀光华医药科技开发有限公司