DNA甲基化是表观遗传学的重要部分,同组蛋白修饰相互作用,通过改变染色质结构,调控基因表达。对催化DNA甲基化的DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)的研究可以揭示DNA甲基化对基因表达调控的机制。从而研究与之相关的重要生命活动。 ![]() DNA甲基化主要发生在5'-CpG-3'的C上,在DNA甲基转移酶的催化下生成5-甲基胞嘧啶(5mC)。DNA甲基化的主要有三种酶:DNMT1,DNMT2,DNMT3a和DNMT3b以及他们的亚型。DNMT1是细胞中最重要的甲基转移酶,具有从头和维持甲基化的功能,DNMT1对胚胎的正常发育至关重要,并与基因组的不稳定性有关,DNMT1能与多种蛋白相互作用,参与基因的沉默,在许多肿瘤的发生和发展中都观察到DNMT1的过表达;DNMT2的生物功能到目前为止还不清楚;DNMT3a和DNMT3b是主要的从头甲基化的酶,许多原发肿瘤和转化细胞中都观察到了DNMT3B的过表达,DNMT3B在肿瘤发生的过程中对启动子的过甲基化有很重要的作用;DNMTs之间的作用也非常复杂。 近年来,DNA甲基化和人类疾病,尤其是和肿瘤之间关系引起研究人员的关注。许多研究发现,DNA甲基化模式的改变导致了肿瘤的发生。在很多肿瘤中都发现DNMTs的表达异常。这说明DNMTs在生物体内发挥着重要的作用。 DNA甲基转移酶(DNMTs)活性/抑制检测试剂盒DNMT Activity(P-3009)原理: 是无放射性实验.通用的DNMT底物稳定的包被在孔板里,甲基转移酶把甲硫氨酸的甲基集团转移给胞嘧啶,甲基化DNA底物.甲基化的DNA能被抗-5-甲基化胞嘧啶的抗体所识别.比率或者大量甲基化的DNA与酶的活性成比例,然后类似Elisa的反应,比色法测定DNMT的活性,其吸收波长为450nm,DNMT的活性与光密度值成比例. DNA甲基转移酶活性/抑制试剂盒试剂盒优势: 【全覆盖的适用种属】:哺乳动物(细胞,组织),植物,真菌,细菌等 1、快捷的实验操作,完成实验不超过3个小时45分钟; 2、安全创新性的比色实验不需要放射性物质,提取或者亲和层析; 3、超灵敏检测极限:核提取物低至0.5ug,纯化酶低至0.5ng,灵敏度是前任试剂盒的5倍; 4、最优化的抗体和增强液能高特异性的检测5-mc,与未甲基化的胞嘧啶没有交叉反应; 5、微孔板分析,既能适用手工操作,又能适用于高通量分析. 实验流程与发表文章结果展示: |
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