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伴随着基因编辑成为当今生命科学研究的热点之一，检测基因突变的方法也得到迅猛发展，出现了变性高效液相色谱分析，单链构象异构多肽分析，毛细管电泳，直接测序，变性梯度凝胶电泳与化学或酶促裂解等多种突变检验方法。酶错配切割（Enzyme Mismatch Cleavage）在上述方法中是应用简单，操作便捷的一种，而且在初筛样品上具有较高的优越性。 错配酶切割的原理是利用特定酶识别双链DNA中特定的位点，即插入、缺失和突变等导致实验组DNA与野生型DNA杂交后出现的异源双链DNA。目前市场上的错配酶有主要有Surveyor、T7E1和Cruiser。 以Cruiser 为例，简单介绍EMC过程： 其中一些注意事项，小编要提醒您： 1）设计高特异性的 Primers，扩增产物长度为300～600bp。Primers 引物对应目的序列的位置如下： 2）突变组DNA与野生型DNA含量在PCR体系中尽可能按照5:5的比例，避免杂交的异源双链DNA含量过低，影响后续电泳结果。 3）PCR体系中尽可能使用高温高保真酶，以降低噪音干扰。
最后简单比较下三种酶的优缺点： |
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