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两种儿茶素成分逆转人肝癌和口腔鳞癌MDR作用的体外实验研究

 云南静一号普洱 2019-01-28
【摘要】:目的:研究两种儿茶素成分对人肝癌和口腔鳞癌MDR的逆转作用。方法:用CN1060488A专利法并作改进分离和纯化两种儿茶素单体成分,与化疗药联合作用于体外培养的两株MDR细胞,以MTT法检测细胞耐药性及药物的细胞毒作用,RT-PCR法检测MDR_1基因的表达,FACS检测P-gp的表达、以Rh-123为底物检测P-gp的功能,荧光分光光度法研究肿瘤细胞内药物的累积量,原位组织化学法及琼脂糖凝胶电泳法检测肿瘤细胞的凋亡,PI染色FACS法检测凋亡过程中细胞周期的变化。结果:从广西绿茶中提取得到两种儿茶素单体成分ECG、EGCG;人肝癌细胞BEL-7404和BEL-7404/Adr对ADM的IC_(50)分别为0.94mg/L和36mg/L,人口腔癌细胞KB和KBV200对VCR的IC_(50)分别0.036mg/L和1.91mg/L,两株耐药肿瘤细胞的耐药倍数分别为38倍(BEL-7404/Adr)和53倍(KBV200);ECG的细胞毒性(IC_(50))为:504mg/L(对BEL-7404)、2200mg/L(对BEL-7404/Adr)、462mg/L(对KB)、1250mg/L(对KBV200),EGCG的细胞毒性(IC_(50))为:545mg/L(对BEL-7404)、1300mg/L(对BEL-7404/Adr)、262mg/L(对KB)、480mg/L(对KBV200);用60mg/L的ECG和14mg/L的EGCG分别联合2.3mg/L和1.9mg/L的ADM对耐药人肝癌细胞BEL-7404/Adr的细胞毒增敏倍数分别为15.8倍和19.2倍,用80mg/L的ECG和30mg/L的EGCG分别联合0.24mg/L和0.14mg/L的VCR对人耐药口腔 【论文】两种儿茶素成分逆转人肝癌和口腔磷癌MDR作用的研究 癌细胞KBVZOO的细胞毒增敏倍数分别为8倍和13倍;两种儿茶素单体与 化疗药物联合应用可降低MDR,的表达,下调P一gP的表达,使肿瘤细胞膜 上的P一gP整体泵出药物能力下降沪0.01);两种儿茶素成分可提高肿瘤细 胞内化疗药物的累积量,促进肿瘤细胞的凋亡,使肿瘤细胞增殖阻滞在S/GZ 期。结论:儿茶素成分ECG、EGCG具有体外逆转耐药人肝癌细胞 BEL一7404/A dr和耐药人口腔癌细胞KBVZoo的多药耐药作用,机制可能与 降低MDR,表达,下调P一gP表达,从而提高肿瘤细胞内药物的累积量,促 进肿瘤细胞的凋亡作用有关。

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