细胞被支原体污染是每个实验室常见但不自知的事。

在此之前强调一下我的相关研究是有关衣原体的，而不是支原体。每次听到别人问我，你的支原体做的怎么样的时候，虽然我嘴巴上给你解释我做的是衣原体，但是我的内心是一万只草泥马奔过的。所以看过这个分享的人要是再问我你做的支原体怎么样，我。。。。。。

这周主要讲有关支原体污染细胞的原因和样子。

在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，（63%，多恐怖）因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染后，细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。

首先，什么是支原体呢？（以下来自于百度百科）

支原体是细胞外生存的最小微生物，是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.2～0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状，分枝状等多种态。

从上面那段话我们可以知道：

• 1. 支原体存在于我们周围，他可能就如尘埃一样存在于我们的环境中。
  作者有话说：所以为什么在细胞间工作台四周的通风一定不要遮挡，紫外灭菌时，通风一定要开着，做实验时，通风也要开着。总之通风在你整个实验过程中均需要开着。因为75%的循环风可以让支原体不能进入你的工作区域。

• 2. 可透过一般的滤膜，所以不要寄希望于过滤可以清除支原体污染的液体。

其次，支原体怎么污染的细胞

支原体是一个可以胞外生长的细菌，只要接触到你的细胞培养过程中的任何东西都会发生支原体污染。所以细胞培养的每一步均要小心翼翼。

第三，支原体污染的细胞长什么样子呢？

如果你发现以下的情况就要警惕是否支原体污染了：

• 1. 细胞形态改变；
  

  
  形态改变.png

• 2. 细胞生长过慢；

• 3. 细胞状态变差；

• 4. 细胞膜周围出现很多不动小黑点；
  

  
  细胞膜周围小黑点.png

• 5. 细胞间隙之间出现了不动小黑点；
  

  
  image.png

• 6.再看一张杀支原体前后的图片
  

  
  杀支原体前.png
  
  杀支原体后.png

那支原体应该怎么预防呢？

• 1. 支原体不耐干燥，所以要保证你的细胞间通风是正常工作的，经常清洗filter，保持房间干燥整洁。另外所使用的东西在有液体撒出时，及时清理，保证你的瓶子，离心管干燥。

• 2. 支原体对热抵抗力差，所以煮沸或高温均可以杀灭支原体。提示所有的细胞用具都要高压灭菌，所有废液都应该处理。

• 3. 对紫外线敏感，所以细胞间要定期开紫外线。

• 4. 支原体易被脂溶剂、清洁剂、常用消毒剂，如酒精、酚、甲醛、来苏尔等灭活。所以应该定期用这些物品清理孵箱，细胞台。在清理孵箱时不要忘记清理filter。

• 5. 实验室应该定期杀杀支原体。
  那怎么检测支原体是否污染，以及怎么杀灭支原体，我们下周分享啊。
  谢谢大家！