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采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液 1.发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。 2.寒战。 3.白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞 4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×10 9/L)。 5.血小板减少。 6.皮肤粘膜出血。 7.昏迷。 8.多器官衰竭。 或同时具备上述几种体征时应采血培养。 在评估可疑新生儿败血症时,除发热或低烧外,很少培养出细菌,应该补充2岁以下一般多见于门诊,常伴有明显发热(≥38.5℃)和白细胞增多(≥20×109/L)。可能不发热或不低热,如伴有身体不适,肌痛或中风可能是感 血培养为防止皮肤寄生菌污染,可使用消毒剂(碘酊或碘伏)对皮肤进行严最大限度地减低皮肤污染。感染性心内膜炎,特别是心脏瓣可能由皮肤寄生的微生物引起(例如:表皮葡萄球菌或棒杆菌除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价如果抽取了导管血,也应同时在其他部位穿刺获取非导 皮肤消毒严格按以下步骤进行: 1.首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。 2.然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤(1%-2%碘酊30秒或10%碘伏消60秒),从穿刺点向外以1.5cm~2cm直径画圈进行消毒。 3.最后用70%酒精脱碘。 严格执行三步消毒后,可行静脉穿刺采血。注意对碘过敏的患者,只能用70%60秒钟,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 培养瓶消毒程序: 1.用70%酒精或碘溶液(不要使用碘)消毒血培养瓶橡皮塞子。 2.酒精作用待60秒。 3.在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精, 要点:血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染,由污染菌引起的延长了住院日,延误病情诊断并增加了经济3%~5%血培养中混有污染菌,它们不同类无菌部位标本培养中生长同一种微生48h内)。上述情况下,应考虑是真正的感染。临床实验建立良好的交流关系对各方面都1995~1999年血中分离的70例凝固酶阴入院48h内检出者,39.3%(24例)为污染菌,48h后检出者(9例)为污染菌,污染菌检出时间显著长于病原菌。提示血培养中凝固酶阴性葡 采血量: 对从菌血症或真菌菌血症患者血培养中获得微生物,每个培养瓶抽取的血量2ml增加到20ml时,血培养的阳性率增加,因为培养的血液量增加1ml,阳性率增加3%~5%。 用静脉穿刺获得的血量,成人和儿童不同。儿童,特别是新生儿很难获得大1ml~5ml用于血培养,当细菌浓度足1ml也足以检测菌血症。标本量大于1ml,细菌量也增加,对对于成人血培养的标本量少于不易培养出细菌,每瓶最低限量应是10ml血液,20ml~30ml最合适,血液1:5至1:10。几乎所有现代的血培养系统假如血液量均在以上。虽然静脉采血30ml可增加细菌量,但这不太切合实际,这很容易造 血培养的数量和采血时间: 血培养的数量和采血时间关系到菌血症的病理生理学,一次静脉采血注入到研究已经证实,采集适量的血液注入2~3瓶血对间歇性菌血症,用于培养的血因为细菌流入血液与寒战发作通常间1h,在发烧时血液可能没有细菌,实际上,血培养通常是在寒战或发烧后进我们一般不推荐在任意时间抽取静脉血进行培养,研究资料24h内同一时无论何时,采集血培养应该在使推荐同时采集2~3瓶,每瓶20ml~30ml血样进行培养来做最这也更切合实际。先前的抗生素治疗可能导致血培养结果阴性,微生 有研究证实,对链球菌心内膜炎患者,在做血培养的前两周内患者接受了抗97%下降到91%。由于有很好的血培养技术,对95%以上。 对特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议: 1.怀疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎2或3份血培养瓶,快速进行血培养。 2. 不明病源的发热,如隐性脓肿,伤寒热和波浪热:发热开始采集2或3份24h至36h后,估计温度升高之前(通常在下午)立即采集2份以上血培 3.怀疑菌血症或真菌菌血症,血培养结果持续阴性,应改变学培养方法, 4.感染性心内膜炎,对急性心内膜炎患者1h(2h内)采集3份血培养,如24h后阴性,再采集3份血培养瓶。入院前两周内接受抗生素治疗的2份。 要点:大部分临床医生对成年患者采集血量不足,采集血培养份数不够,采24h内采集一瓶血培养,降低了血培养 运输标准: 采血后血培养瓶或采集管应立即送到临床微生物实验室。血培养瓶和采集管不要冷藏,如果血培养瓶在送往实验室培养或35℃~37℃孵箱中。但含血若有细菌生长会释放出一些气体,采集管有破裂或 采用自动化连续检测血培养系统,有一点很让人忧虑,那就是标本运送有时这样会导致微生物检测延迟(尽管微生物生长不受影响)目前很少有人 接收标准: 实验室收到血培养后,应按以下步骤操作: 1.检查培养瓶确保它们被安全地放置。 2.用肉眼观查微生物生长的情况,注意血液层上面是否有絮状沉淀、均匀 3.检查瓶子上的标签,确认资料是否齐全,与申请单上的患者资料是否一 4.保证获得适量的血液。 5.检查血液是否超过要求的基线。 6.放置在孵箱中或上机进行检测。 由于菌血症和真菌菌血症的检测对临床感染性基本的诊断十分重要,实验室对儿童和成人,不管抽血量多少,均应该进行培养 不规范处理方法: 送到实验室的血标本应认真处理,减少标本错误和标本污染。标本处理不当医院及实验室工作人员本身携带的病菌均可能造成标本污染。因 1. 血培养或培养管无标签或贴错标签、培养瓶或培养管有渗漏、破裂或明12h以上、用不适当的培养瓶或培养管收集标本。 处理方法:立即与临床医师联系,报告:“标本不规范的具体理由”。 2. 用失效的培养瓶或培养管收集标本。 处理方法:与医生联系,报告:“用过期培养瓶收集血标本,请用效期内的培 3. 送交血标本的量不足或只送一瓶血培养。 处理方法:与医生联系,报告:“送交的血培养标本量不足,请补送足量血液”。 4. 未送推荐的培养瓶数或类型 处理方法:与医生联系,报告:如“只送需氧瓶不符合规程,血培养的基本规”。 要点:每位临床医师都应该对患者负责任,实验室工作人员发现不规范的血 微生物室处理血培养预防感染的安全程序: 1.细菌室工作人员,在所有的血培养处理过程中都应戴乳胶手套。 2.拒收不符合安全标准的血培养瓶或培养管。 3.在生物安全柜内打开或穿刺培养瓶或加一个胶膜防护装置(如:把培 4.在生物安全柜内操作肉眼观察有微生物生长迹象的培养瓶。 5.操作产生的气溶胶,可能含有高浓度的致病菌或真菌,利用实验室的 6.用于培养基的塞子和胶带可能含有高浓度的致病菌,应防止接触。 7.正确处理与血培养有关的污染物。 8.立即报告血培养结果及抗生素敏感试验结果。 血培养检测——阳性结果的处理: 传统手工法血培养应该每天至少检查一次,对48h~72h未生长的培养瓶至少对培养瓶进行肉眼检查,注意下列几点提示有微生物 1.血与肉汤混合物出现浑浊。 2.在血液层上有絮状沉淀,某些链球菌在沉积的红细胞表面上,会有小“棉球样”生长。 3.肉汤内出现浑浊生长。 4.肉汤表面有薄膜生长。 5.出现溶血。 6.产生气体,许多发酵菌可产气,梭菌属会产生大量的气体,出现明显 7.血液层表面或深层有白色颗粒。 8.液体培养基凝固。 如果怀疑血培养阳性,应立即进行革兰染色,以无菌操作从培养瓶中取肉汤滴涂片,自然干燥,加热固定并染色。染色结果应尽快报告,如革兰阳性球革兰阴性杆菌为小杆菌或球杆菌等。革兰染色结果可指并作为实验室进行细菌鉴定补充试验的参考它对于鉴别葡萄球菌和链球菌非常有用。如果血培养阳性革兰染色未发现应做吖啶橙染色进行二次镜检,这对检测弯曲菌菌血症和布鲁菌菌血症很而革兰染色很少发现这些细菌。依据细菌革兰染色形态特点,选择适当1。 1。 5%~10%CO2孵育 ª EMB 血琼脂 PEA或CAN × ×× × ×× × ××× × ×××× b × × × ×× c 48h;EMB;伊红美蓝琼脂;PEA;苯乙基醇琼脂;CAN;多-萘啶酮酸琼脂。 30℃培养。 当革兰染色显示细菌形态均一时,厌氧培养的价值不大。对所有培养阳性, 革兰染色为纯的细菌,可进行初步鉴定并做直接抗生素药敏试验的标准程序,FDA批准的市售产品。可用于初步鉴定的商品试剂,包括:胆汁溶解,酶,乳胶凝集分型实验等。 美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的抗生素敏感试验没有血培养 对各种血培养法中的阳性肉汤培养物进行传种并且立即孵育培养,为进一步5h-7h后有明显的菌落生长,取琼脂表面的菌落用于细菌鉴定和抗 DNA扩增技术可以鉴定血培养中的细菌和检测抗生素FDA不推荐常规使用。 万一需要进一步的研究,至少保存几个星期。为了让细菌活兼性需氧菌和兼性厌氧菌应传种到半固体培养基中,例如动力培养基。严格苛养为长期储存,细菌可悬浮于15%-70℃冷冻。 血培养阳性结果的报告程序: 血培养阳性结果十分重要,应立即口头报告给患者的主治医生,报告的日期应向临床医师提供重要包括革兰染色的形态,血培养阳性的数量和其他的鉴定资料,如革兰阳口头报告后应立即进行书面初步报告。除否则不应更改初步报告的结 当培养24h和48h后,对阴性血培养结果在最短的时间内发出初步报告。有些“血培养3天后无细菌生长”。 真菌培养: 多种方法可提高血液中真菌的检出率,包括使用通气的真空血培养瓶、双相-离心技术和特殊营养的肉汤培养基(如脑心浸液肉汤等)。裂解-特别是对于营养要求苛刻的双相真菌。实5至7天)可提供充足的营养支持白-离心技术可获得最高的检出率。霉菌抑lsolator管结合使用。对于分离糠秕可在培养基表面覆盖一层橄榄油或其他长链脂肪酸。阴性的真菌血培养22-30℃孵育4周后再仍弃。
来自: 地佐兴 > 《血培养》
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