大家应该都知道,circRNA是由可变剪切形成的环装的RNA: 嗯,这篇文献的主要内容呢,就是看一个circRNA如何结合启动子和Enhancer来促进这个STUP基因的表达。首先肯定是做二代测序,分析了一下circRNA和mRNA在肿瘤中的表达情况: 在高表达的基因中啊,他们通过circRNA序列与mRNA基因的启动子对比:分析出了一对组合,就是circRNA ApF和STUP这组,在表达上,这个circRNA与mRNA有着较高的相关性: 同样他们分析了一下STUP的基因序列,发现了基因后端,有一部分序列具有保守型: 在分析了整个STUP染色体结构拓扑异构后,有一个惊人的发现,就是在STUP基因后段的保守序列,有一段与启动子相结合的位置(蓝框里圈出来的): 而这个位置正好是circRNA ApF结合的STUP启动子的区域,那么事情就明朗化了。 于是作者就提出了假设,是否是由于circRNA ApF结合的STUP启动子的区域及增强子区域,起到了增强STUP表达促进了肿瘤的形成? 当然首先是做表型的实验,他们先把circRNA ApF和STUP的相关序列使用CRISPR分别突变,检测表型的变化,发现确实突变后无法结合会导致肿瘤增殖受到抑制: 接着是一系列的RIP和RNA pulldown实验,来证明circRNA与STUP启动子以及增强子的结合关系: 最后大概就是这样的情况,circRNA通过与STUP启动子以及增强子的结合,促进了STUP基因的表达,促进了肿瘤的增殖表型: 看到这里是不是觉得已经初步了解了高分的circRNA的研究,都在做什么了吧?好了,要看这篇文献的话,就回复“circ”(不要在评论区回复),夏老师今天就给你们策到这里吧,祝你们心明眼亮。 |
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