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引言 加拿大卡尔加里大学（University of Calgary）Martin Köbel等人在国际妇科病理学会（International Society of Gynecological Pathologists）官方期刊《International Journal of Gynecological Pathology》杂志就子宫内膜癌中p53免疫组化相关问题进行了专文介绍，具体包括染色过程的优化、不同染色结果的描述、相关结果的解读及报告等。 推荐阅读 病理学教师、病理医师、病理技术员、规培学员、在校医学生、肿瘤科医师、妇科医师、外科医师、解剖学教师、患者、健康人群 就子宫内膜癌而言，可预测其预后的TP53基因突变状态应该是最重要的单一分子指标：存在TP53突变者预后不良。临床上还可根据该基因突变的情况来鉴别浆液性癌和子宫内膜样癌。不过，实际工作中大部分病理医师并不能那么容易的进行基因测序，因此快捷、简单、且费用低的p53免疫组化就成了TP53基因突变分析的替代性指标。 一． 免疫组化p53染色的不同着色模式 研究早已表明，TP53的错义突变可导致p53蛋白在细胞核蓄积，免疫组化表现为过表达，具体为至少80%以上、一般近100%的瘤细胞表现为细胞核弥漫强阳性。随着免疫组化研究的增多，本文作者及其他作者均发现p53表达还存在与TP53突变相关的其他异常着色模式。尽管这方面工作大部分是在输卵管-卵巢高级别浆液性癌中进行的，但这些异常着色模式也可见于其他类型肿瘤，且本文作者认为其解读阈值等同样适用于子宫内膜癌；当然还需进一步验证性研究。 对于p53免疫组化结果判读，目前推荐三分类的方案，即野生型表达、过表达、完全缺失，而不能简单的分为正常/野生型和突变两种；对于完全缺失来说则需有阳性内对照成分的着色，如淋巴细胞、成纤维细胞、内皮细胞。野生型着色的特点是阴性、弱阳性、强阳性细胞混杂存在。卵巢癌中进行的验证表明，免疫组化结果与TP53突变状态之间的一致性极高（特异性高达100%）；换句话说，如果p53染色为异常着色（即突变型着色），则几乎可以确定有TP53的突变。需要注意的是，某些剪切位点的突变、或截短突变（truncating mutation）可导致p53免疫组化呈正常野生型表达、但该蛋白却并无功能，这种情况可见于约5%的输卵管-卵巢高级别浆液性癌。 其实对于优化过的免疫组化染色来说，p53还有第四种不常见的着色模式，即具有明确的胞质着色、同时细胞核具有不同程度的着色。细胞核弥漫过表达、同时胞质有弱阳性的背景着色，应解读为p53过表达，而不是胞质表达。对于输卵管-卵巢的高级别浆液性癌来说，胞质表达是因为TP53基因突变打乱了p53蛋白核定位结构域。 综合上述资料，目前可知p53免疫组化染色有四种结果，分别对应TP53基因的不同状态，且由此引申出不同的结果解读。详见表1及图1。 表1. 输卵管-卵巢高级别浆液性癌中所见的p53免疫组化着色模式 图1. 免疫组化p53的不同表达模式。（A）子宫内膜的子宫内膜样癌，免疫组化p53呈正常的野生型表达：部分肿瘤细胞的细胞核阳性、且强度不一。需要注意的是，这种野生型表达不要报告为“阳性”。（B）子宫内膜的子宫内膜样癌，3级，免疫组化p53过表达：几乎所有的肿瘤细胞核均为强阳性，相比中央作为内对照的成纤维细胞来说着色强度更强。需要注意的是，部分胞质有背景着色，表明这一染色方案非常强，但不要解读为胞质异常着色。（C）子宫内膜浆液性癌，免疫组化p53表达完全缺失，内对照中具有中等至强、程度不等的着色。需要注意的是，12点和6点方向正常的萎缩腺体呈野生型表达。（D）子宫内膜的子宫内膜样癌，免疫组化p53为胞质着色，内对照（间质及正常的子宫内膜腺体）则呈野生型的细胞核着色。这种胞质着色的染色结果伴有细胞核类似强度的着色。 需要说明的是，尽管免疫组化可以准确的判断TP53基因的突变状态，且经过训练后可以达到较好的判读一致性，但实际工作中对p53免疫组化结果判读却仍有显著差异。因此后续文章将会对p53免疫组化结果解读的难点进行讲述，具体如p53免疫组化结果的报告、正常野生型着色与3种异常着色之间的鉴别等。 未完待续 参考文献 Köbel M,Ronnett BM,Singh N,et al.Interpretation of P53Immunohistochemistry in Endometrial Carcinomas: Toward IncreasedReproducibility[J].International journal of gynecological pathology,2018. DOI:10.1097/PGP.0000000000000488 |
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