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(微生物学专业优秀论文)金沙江干热河谷区胡枝子根瘤菌多样性与系统发育研究.pdf.pdf

 新胡枝子 2019-07-25
文档介绍:
基因定位在质粒上,由于质粒能够在菌株之间发生横向转移,所以,利用数值分类对根瘤菌进行分群存在着一定的误差。但由于能够定性和定量地反映供试菌生物多样性的程度,并能提供菌株具体的表型性状鉴定特征,因此,在根瘤菌多.全细胞可溶性蛋白质电泳分析蛋白质是生命的体现形式,蛋白质的种类决定生物的性状和功能。用郾烯酞***凝胶电泳对可溶性蛋白质的组成成分进行分析,可以得到反映生物基因组成的蛋白质图谱信息,根瘤菌的表型多样性,也可以通过分析蛋白质电泳图谱的多态性反甈椒ň哂辛丝焖偌虮恪⒅馗葱院玫挠诺悖治鼋峁肫渌掷喾椒ㄈ数值分类、瓺杂交等的结果有较好的一致性,因此,.在根瘤菌表型多样性分荢&.样性研究中,数值分类仍被广泛应用。的全细胞可溶性蛋白多态性,发现不同血清型菌株的蛋白质带谱存在差异。.,,;.;;;;.,.,;.;
.甈椒ㄋ淙患蛞卓焖伲ǚ从车慕鍪蔷甑鞍字释计椎亩嘌裕薹ㄌ供具体的表型性状的描述特征,也无法像数值分类那样有明确的相似性百分比标准来判定新的种群,且有时结果不稳定,分辨率不高。因此在根瘤菌分类中,全细胞可溶性蛋白电泳一般用于对大量未知菌株进行初步分群相分类技术中的一项辅助手段验证其它方法的正确性。.多位点酶电泳多位点酶又称同工酶,由细菌中不同位点的基因编码。多位点酶电泳技术通过电泳将细胞内的同工酶分离,继而用各类酶的特异底物显色,最后比较其电泳迁移率,得到酶谱带型的多态性。因此,多位点酶电泳可以用来评估细菌群体基因的结在根瘤菌分类及多样性研究工作中,多位点酶电泳已被证明是一种对大量菌株进行初步分群的有效方法。等用多点酶电泳结合其它方法,对分离自鹰嘴豆的根瘤菌进行了研究,先后发现了尼和等对株分离自内蒙古的苜蓿根瘤菌进行了种类型的多位点酶测定,获得了种多位点酶电泳图谱类型,结合其它多相分类技术,最终确定了一个。肕治隽朔掷胱晕鞣遣硕沟根瘤菌,这些菌株被分为了个多位点酶电泳图谱类型,而苑掷胱墨西哥的瓴硕垢鼍械腗治霰砻鳎┦跃甑腗嘌蕴卣更为明显,共获得个多位点酶电泳图谱类型。脂肪酸是脂类和脂多糖的主要组分,主要分布于细菌细胞膜上。不同的属、种甚至不同的菌株之间其脂肪酸碳链的长度、双键的位置、取代基团等都存在差异,脂肪酸分析可以准确地反映根瘤菌问的差别。目前,脂肪酸分析技术已经相当成熟,从提取、纯化、气相色谱分析及数据处理均高度自动化,已被广泛地应用于根瘤菌的多样性研究工作中研究了攴质粲个快生型根瘤菌种的菌株的脂肪酸组析中,甈哑毡橛糜诮沂靖鼍旨浜椭帜诘牟钜许晓东&陈文新:汪恩涛等;.;.⒆魑6琈构和多样性。礁鲂轮帧新种赴舅嶙槌煞治成,发现各种根瘤菌的脂肪酸组成不一致,由此提出是鉴定根瘤菌种间差异.;.;.;;
.糯ǘ嘌的有效方法。张小平等较了四川花生根瘤菌和株慢生根瘤菌的脂肪酸组成,表明四川花生根瘤菌与慢生大豆根瘤菌相似,但四川花生根瘤菌:酸的含量显著地高于慢生大豆根瘤菌,而其它慢生根瘤菌不含脂肪酸:.芯坎煌G逍偷拇蠖孤鼍保舛个菌株的,其中.脂多糖分析脂多糖琇植加诟鼍赴耐饽ど希闪字苯佑攵嗵连接而成,与根瘤菌一豆科植物共生体的形成直接相关,不同的根瘤菌株,其糖的种类和排列有差异,通过凝胶电泳和银染技术即可反映出这些差异。因此,际跄揭示根瘤菌的表型多样性。等石;:究了龈龅腖,发现了种不同的停敝っ鞲鼍拇颗嘌⒗嗑搴透龅腖一致,表明根瘤菌在结瘤过程中,筒环⑸浠残碚庖患际蹩捎糜诟鼍诖筇锘肪车募觳狻.岳醋灾泄株大豆快生根瘤菌的刃宰唇辛朔析,充分揭示了中国大豆根瘤菌的生物多样性特征,并获得了昃哂辛己霉采в虽然表型特征是细菌遗传特性的表现形式,通过表型分析比较可以综合地反映根瘤菌的表型多样性,但终究难以全面反映根瘤菌的全部遗传特征。以数值分类为例,即使把数值分类测试项目增加至钭笥遥浣峁灾荒芊从诚妇蜃.%的遗传信息.R糯ǘ嘌是指生物种内基因的多样性,包括种群间和个体间的遗传变异.研究根瘤菌的遗传多样性时,常常从根瘤菌基因组、.基于基因组水平指纹图谱的遗传多样性研究随机扩增系亩嗵个碱基R铮运芯烤甑幕蜃镈进行扩增,扩增产物经电泳分离和指纹图型能揭示基因组染色体罨谋浠.5鼍腇槌捎肭襡嗤个与丑相同,另外鲈蛴險嗤的菌株。一些特殊基因片段应用多种分子生物学方法进行检测。虺治黾际醮戳⒂辍K抢盟婊帕屑罨承虻墓押宋羲岬チ通常为染色后,检测系亩嗵浴是,采用单物扩增,所检测到的基因组区域非常小,多态性不明显,因而在研究.
个基因组的引物组合,从而反映出细菌全序列的基因变化。在根瘤菌研究中,技术主要用于研究种内的遗传多样性似简单、快速,但是对反应条件敏感、易出现假带,常使结果的重现性较差:而且并不是所有的随机引物都能产生足够的多态性者通过使用双引物、提高退火温度陨,设计引物时注意序列长度和含量.却胧行У亟档图俅岣逺闹叵中院投嗵T诖嘶∩希⒄钩傻乃颰,使峁哂辛酥值奶匾煨裕琑等应用.技术,结合其他技术确定了舻囊桓鲂碌母鼍,简称蠢┰龀ざ榷嗵性,是年由荷兰科学家蚔发展起来的一种检测嗵缘姆椒ā其主要特点是对基因组兴盖校胨油妨雍笤儆糜胫涠缘乃进行选择性扩增,镉帽湫跃郾┨0纺旱缬痉掷耄净蚍派湫宰韵杂得到不同长度的肝仆计祝缓蠼计咨韬蟮男畔⑹淙爰扑慊孟喙厝砑分析即可得到聚类树状图。结合荧光标记发展成的际.笰从梢栽诓庑蛞瞧魃贤瓿桑莞颖曜蓟缺阌诓煌间指纹图谱的比较和建立参比菌株的指纹图谱信息库,也增加了的稳定性和可靠性。结合了和挠诺悖槊舳雀摺⒎直媪η浚肝图谱的差异可以与菌株或相近种内基因的变化相对应,这是其它表型分析和分子生物学方法所做不到的。因此,可以在亚属、种和亚种水平对微生物进行分类,尤其对区别高度相关的菌株桓鲋只蛲桓錾镄具有很大的潜力U小平等对分离自我国四川、滓巴布韦和以色列的昊ㄉ鼍辛薃指纹图谱分析,结果发现所有供试菌株的相似性水平只有%,表现了极大的遗传多样性。肁际醴治隽朔掷胱訤已知种,这说明慢生根瘤菌具有很大的多样性。等对晟窖蚨垢瘤菌进行了研究,从工作中常应用多个随机引物,从中选择能提供丰富的遗传信息和检测区域几乎覆盖整.龋虼搜芯在根瘤菌分类中,的应用很广泛和.的慢生根瘤菌,得到了个群,只有鋈悍质粲贐瑀的各个虶的根瘤中分离根瘤.;...;
谙妇蜃橹校惴捍嬖谧乓类如.Ω司蛭手馗垂灿行蛄校.珺.榷痰闹馗葱蛄校稚⒋在于细菌染色体基因组的基因间,含有多个拷贝,长度小于T诓煌木遗传差异性分类研究中.嘤糜谥帧⑹羲降姆秩骸等用的根瘤菌,表明它们分属于%%械囊糯ɡ嘈推子隡產兄恢拢行┥踔敛煌谝阎8鼍值囊糯ɡ嘈停硐殖隽极大的遗传多样性。由于不同生物型、菌株、种、属的分类鉴定.踔量捎糜谇止叵捣浅.和畑由于其序列相似性很高,其分类地位一直存在争议。等分析了这两株菌的特性,发现其相似性仅为.ィ得鱏.和畑确实应为两个分类地位。等人首次采用接近全长的甊治黾际醵岳醋圆煌值母鼍杲辛吮冉戏治觥菌,其图谱存在显著差异,比较而言,与结瘤的根瘤菌群内的遗传差异更大。狿指纹分析技术·蛲庵馗椿匚囊蜃樱琀的染色体上,重复序列的位置不一定相同,因而根据其保守序列设计引物,以总为模板进行┰觯ü缬咎醮冉戏治觯芙沂揪昙淙旧寤蜃榇嬖诘.技术普遍应用在根瘤菌的遗传多样性和甊芯苛朔掷 内容来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.             

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