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在单克隆抗体药物研发中，需要确认受试抗体与药效靶组织抗原决定部位的结合，检测抗体是否与非靶部位组织抗原结合，确定非临床安全性试验的相关动物种属，以及预测毒性靶器官。组织交叉反应实验是进行临床前单抗类药物临床前安全性研究的重要手段，可以在体外检测单抗或相关抗体样生物制品与组织上的抗原决定部位结合。
1、免疫组织化学技术
免疫组织化学（IHC）是应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分，进行原位的定性、定位或定量的研究。免疫组织化学染色技术的特点是将形态学改变与功能、代谢变化结合起来，直接在组织切片，细胞涂片或培养细胞爬片上定位一些蛋白质和多肽类物质的存在，并可精确到亚细胞结构水平，结合电子计算机图像分析系统或激光扫描共聚集显微术等技术，对被检物质进行定量分析，具有有较高的敏感性和特异性。免疫组化染色是医学和生命科学研究中经常要使用的研究方法。
在TCR试验中通常被用于对一系列人和动物的冰冻组织切片进行染色。有研究者通过两种不同类型的单克隆抗体药物贝伐单抗和美罗华,探讨免疫组织化学常规二步法和直接法在人体组织交叉反应中的应用[1]。免疫组织化学常规二步法采用相应二抗,通过底物酶显色,显示单克隆抗体药物与相应组织的结合情况。直接法采用标记后的单克隆抗体药物,通过生物素-链霉卵白素系统放大后显色,显示单克隆抗体药物与相应组织的结合情况。研究结果发现不同类型单克隆抗体适合不同的免疫组织化学方法,最佳的实验方法是在尽可能减少背景性染色的同时,采用最低的浓度即能显示单克隆抗体与人体组织的特异性结合。
近年来，随着科学技术的发展，Western印记分析、组织芯片、流式细胞等技术也开始应用于组织交叉反应试验。
2、Western印迹分析
Western印迹分析可根据分子量大小对蛋白进行分离，然后通过相应的抗体对待检蛋白进行特异强的检测，是一种对复杂蛋白样品进行检测分析的良好方法。Western印迹分析是生物化学和免疫遗传学中常用的一种蛋白分析方法，其技术环节多，操作时间长。美迪西提供新药研发外包服务，其生物部在体外生物学领域有丰富广泛的经验，通过酶水平测定、细胞水平测定、细胞生物学、生物化学、体外同位素测定、稳定细胞株建立、基因敲除、RNAi和MicroRNA技术等，提供一套完整的生物学服务。
3、组织芯片
组织芯片技术也是一项运用于TCR试验的技术，但是组织芯片取样面积小，常常不能涵盖器官完整的组织细胞结构，存在漏检等技术问题，一般建议用于研发早期TCR试验前的高通量筛查。有研究者发现首先利用组织芯片进行初筛，然后在人体和不同动物种属组织中进行高通量的免疫组化试验，并提高对结果判读的准确性，有效地提高了组织交叉反应试验的效率，加快实验流程，适合产业化。
4、流式细胞术
20世纪70年代发展起来的流式细胞术，是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术，能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选，且能保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏。
TCR试验的目的是发现单抗药物和靶抗原以外表位结合,为体内试验毒副作用的监控提供参考，目前主要使用体外免疫组织化学、免疫细胞化学及免疫荧光等方法,在正常人及实验动物组织评估有无交叉反应。总之单抗类抗体及基于抗体类药物组织交叉反应试验是单抗类临床前评价的重要组成部分，对于单克隆抗体药物的研发至关重要。
[1] 单抗药物组织交叉反应中不同免疫组织化学方法的比较性研究[J].
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