输血相容性检测室内质量控制的失控判定与处理专家共识

摘要

１ 目的和范围

本共识阐述了规范开展输血相容性检测实验室室内质量控制(以下简称室内质控)的基本技术要素，制定了室内质控失控的判定规则和处理原则，以保证输血相容性检测结果的可靠性和有效性。

本共识适用于开展输血相容性检测的实验室(以下简称实验室)。

２ 定义和术语

2.1 输血相容性检测  针对临床输血开展的检测项目，是分析标本的检测结果，并根据结果判断献血者与受血者血液是否匹配的过程。检测项目包括但不限于:ABO血型(正定型、反定型)、RhD血型、抗体筛查、交叉配血。

2.2 输血相容性检测室内质控  实验室人员遵照相关标准及操作规程，选择适当质控物，连续评价检测工作的可靠程度，旨在监测和控制本实验室检测结果精密度，确定检测结果是否可靠、可否发出报告的１项工作。通常室内质控应包括人员、仪器设备、环境、试剂和方法等要素。

2.3 室内质控品  实验室引入已符合相应技术标准，用来实现室内质控的检测物质。通常是1组全血标本或细胞和血浆标本共同组成。

2.4 检测批 预期检测系统的准确度和精密度所处的1个稳定检测区间(如一段时间或一定的检测标本量)。应考虑的影响因素含仪器、方法、试剂及人员等。

2.5 有临床意义的血型抗体 能够导致受血者发生输血反应或者成分血输注无效的同种血型抗体。

2.6 室内质控记录表 用于记录实验室室内质控操作过程及结果的表单。

2.7 室内质控靶值 实验室依据室内质控品提供者所给定的参考值(结果)，结合本实验室使用仪器、方法和试剂，通过检测确定的质控目标(结果)。

2.8 室内质控失控 室内质控品的检测结果超出设定的可接受范围。

３ 输血相容性检测的基本技术要求

3.1人员  从事输血相容性检测的人员应经过专业培训，独立上岗前须经过能力评估且测试合格，并按计划定期参加能力评估和获得授权。

3.2 设备 

●3.2.1所有设备必须满足其预期使用要求 包括根据制造商的技术要求安装，在使用前确保设备的所有功能与制造商操作规程中规定的功能相符，能够达到预期用途。

●3.2.2所有设备必须按照使用说明书要求使用 包括定期监控和维护:验收标准，监控和维护的频次、方法，以及发现问题必须采取的措施。针对设备发生故障或异常情况进行调查与跟踪。

3.3 试剂 必须符合国家和/ 或行业相关要求，制定并执行一定的验收标准，贮存和使用严格按照说明书的要求，使用中始终保持标签的清晰与完整。

3.4检测方法 根据输血相容检测目的所选择的适宜检测方法。临床应用前应做方法确认，包括但不限于检测符合率、检出限等，宜选择已知来源的阴、阳性标本各20份做方法学间的比对。

3.5 室内质控 

●3.5.1应用质控品监控实验的有效性 质控品的选择应考虑类型、稳定性、浓度(如设置弱阳质控品)、均一性。非商品化质控品应有符合相应标准的制备程序，包括稳定性、均一性及性能评价方案等，要有配制和评价记录。

●3.5.2须保留完整的质控记录  包括检测项目，方法学， 析仪器和唯一标识，试剂生产商、批号及有效期，质控品提供者、批号和有效期，质控结果和结论等信息，失控时应分析造成失控的原因，采取纠正措施，必要时一开始就引入预防失控的措施。

3.6设施与环境 

●3.6.1实验室在开展工作前须经过安全风险评估 根据检测工作需求设置不同的控制区域，并制定针对性的防护措施和警告标识。

●3.6.2 制定并记录温度和湿度控制要点 根据检测设备和实验过程对环境的温度和湿度要求,记录温度和湿度失控事件和处理措施。

●3.6.3配置双路电源和/或不间断电源(UPS)  保证关键检测设备的安全运行。

４ 输血相容性检测室内质控

4.1 基本原则

●4.1.1室内质控通过检测质控品来实现 根据每检测批次质控品的结果是否在设定的靶值和控制限内来判断检测结果的质量。在任何情况下，都应在报告检测结果前评价室内质控结果。

●4.1.2实验室须制定室内质控管理程序 建立检测质控品的数量、类型和频次、质控靶值和失控限等，设置阴性、阳性和/ 或弱阳性(临界值)的质控标准。

●4.1.3实验室设定阴性和阳性质控的检测频率 须根据检测项目、方法学及实际检测情况ꎬ并满足相关规定和试剂说明书要求。

●4.1.4实验室开展室内质控的时机 开始输血相容性检测、更换试剂品牌或批号以及对仪器设备做重大维护保养、 仪器设备因故障大修后ꎬ均应再次做室内质控。

●4.1.5实验室使用手工操作时的室内质控 每个检测批均须做室内质控检测。

●4.1.6 实验室使用自动化检测系统时的室内质控 质控标本应与待检标本按同样的方式装载入仪器，以24ｈ,1次做室内质控检测。、

4.2质控方法 

●4.2.1确定本实验室室内质控靶值 做室内质控时，以每 批次室内质控品结果与质控靶值比对。

●4.2.2遵循依据靶值确定的失控限(即控制界限)的原则 阴性和阳性质控检测结果须与靶值比对一致，阳性结果的凝,集强度与靶值之间差异≤１＋。

●4.2.3判定室内质控失控 超出设立的室内质控失控限的检测结果即判定为失控ꎬ并按失控处理方案处理。

●4.2.4室内质控数据的评价与总结 应每月进行1次，确保持续性改进，避免同类失控问题再次发生。

4.3 质控项目要求

●4.3.1 ABO和RhD血型 

●4.3.1.1 ABO和RhD血型检测方法 主要包括试管法、微板法和柱凝集法等。

●4.3.1.2 ABO血型鉴定包括正定型,使用单克隆抗￣Ａ、 抗￣Ｂ 试剂,反定型,使用Ａ1型和Ｂ型试剂红细胞,当Ａ1和Ｂ细胞上的Ｄ、Ｅ、Ｃ 抗原并非全部阴性时,应增加使用Ｏ型试剂红细胞。RhD血型检测使用抗￣Ｄ试剂。

●4.3.1.3血型正反定型质控品设置阴性、阳性控制抗￣Ａ 与 Ａ１型红细胞凝集，凝集强度≥３＋，但与Ｂ型红细胞不凝集，抗￣Ｂ与Ｂ型红细胞凝集，凝集强度≥３＋，但与 Ａ１型红细胞不凝集。抗￣Ｄ与 ＲｈＤ阳性红细胞凝集。凝集强度≥３＋，但与ＲｈＤ阴性红细胞不凝集。

●4.3.2抗体筛查 

●4.3.2.1抗体筛查检测方法 主要包括盐水介质法、间接抗球蛋白法(柱凝集法、固相凝集法等)、凝聚胺法、酶法等。

●4.3.2.2确保检出具有临床意义的抗体 间接抗球蛋白法是１种确定的抗体筛查检测方法或检测系统组合，应当为首要考虑的检测方法。

●4.3.2.3 抗体筛查室内质控品设计 包括阴性和告之及低值阳性:

１)弱阳性抗体质控品设置凝集强度２＋—３＋。

２)推 荐使用有临床意义的特异性弱抗体(如抗￣Ｆｙａ、抗￣Ｅ、抗￣ｃ)为 低值阳性质控品，以确保检测的敏感性和试剂保存过程中红 细胞抗原表达的完整性。

３) 使用弱ＩｇＧ抗￣Ｄ与Ｏ型R1R1或者R2R2细胞能够保证整个检测过程操作正确性。 

●4.3.2.4质控品细胞抗原设计 应符合抗体与抗原表达阴阳对应原则，阳性细胞包括纯合子和杂合子细胞。

●4.3.3交叉配血 

●4.3.3.1 交叉配血检测方法 主要包括盐水介质法、间接抗球蛋白法(LISS、柱凝集法、固相凝集法等)、凝聚胺法、酶法等。

●4.3.3.2质控品设置 应能同时检出ABO血型不相容和非ABO血型不相容。

５ 输血相容性检测室内质控失控判断

5.1 失控判断基本标准 

● 5.1.5 室内质控结果 须明确区分阴性和阳性结果，超出可接受范围即判断为失控。

● 5.1.2室内质控结果的凝集强度 应作为设定靶值的1个判断标准，超过设定的靶值范围即为失控。 

● 5.1.3 室内质控品结果与设定靶值一致 凝集强度低于设定靶值，但在可接受范围内时作为预警提示，特别是抗体筛查项目弱阳性抗体质控品低于质控靶值，应进一步分析检测精确度或灵敏度，并采取有效措施防止失控发生。

5.2 ABO和RhD血型检测失控判断标准 

● 5.2.1ABO血型质控 正定型和反定型结果与设定靶值不符、相差>１＋凝集强度时，判断为失控。

● 5.2.2 RhD血型质控 结果与设定靶值不符、相差>１＋凝集强度时ꎬ判断为失控。

● 5.2.3ABO和RhD血型质控 反应格局中任一凝集强度1次低于或高于设定靶值时，预警提示失控，连续3次低于或高于设定靶值即判断为失控。

●5.2.4 ABO和RhD血型质控凝集强度 不符合试剂说明书设定标准或违背实验室设定的质控规则时即判断为失控。

5.3 抗体筛查失控判断标准 

● 5.3.1 抗体筛查 高值、低值、阴性对照质控结果与设定靶值比对不一致和/或在试剂红细胞批号不改变的情况下任一凝集强度相差≥２＋时判断为失控。

● 5.3.2抗体筛查 质控品与任一谱细胞凝集强度1次低于或高于设定靶值时，预警提示失控，连续3次低于或高于设定靶值即判断为失控。

● 5.3.3抗体筛查质控凝集强度 不符合试剂说明书设定标准或违背实验室设定的质控规则时即判断为失控。

5.4 交叉配血失控判断标准 

● 5.4.1交叉配血质控结果 与设定靶值比对不一致和/或任一凝集强度相差≥２＋时判断为失控。

● 5.4.2交叉配血质控凝集强度 1次低于或高于设定靶值时，预警提示失控，连续3次低于或高于设定靶值即判断为失控。 

● 5.4.3交叉配血质控凝集强度 不符合试剂说明书设定标准或违背实验室设定的质控规则时即判断为失控。

6输血相容性检测室内质控失控处理

6.1失控处理基本原则

● 6.1.1实验人员应填写室内质控失控报告单 上报质量主管或相关管理者，由其决定同批次检测结果的有效性。

●6.1.2 实验人员应尽量查明失控原因 提出解决方案，消除失控的原因，以防止再次发生失控。

●6.1.2.1 对属于失控的情况 应重做室内质控确认在控后，重新测定同批次的失控标本。

●6.1.2.2对不属于失控的情况 经质量主管或相关管理者批准、签发同批次标本的检测结果。

●6.1.2.3 对其他情况 须重做室内质控。

●6.1.3 实验人员进一步做选择性复查判断失控原因 为验证上述初步分析，进一步查清失控原因，必要时可对检测标本采用其他方法验证，确保准确发出检测结果。 

●6.1.4实验室应建立验证制度 在出现质控失控时，应有 其他检测方法或相应措施验证待检标本的检测结果。

●6.1.5常见的失控原因 主要包括但不限于实验人员、仪器设备、检测试剂、质控品、方法学、实验操作选择和环境因素。

●6.1.6实验人员在室内质控失控后应立即对该检验批检测 的全过程做回顾与分析主要包括但不限于:

１)仪器的稳定性。

２)检测程序。

３)检测方法。

４)检测试剂的放置位置、污染情况、变更制造商、批号、临近效期等情况。

５)室内质控品的放置位置、污染情况、变更制造商、批号、临近效期等情况。

●6.1.7失控后通常采取的措施 主要包括但不限于:确定失控类型、查找和分析原因、针对原因采取纠正措施、验证纠正措施的有效性、验证措施有效后恢复正常检测、评估最后1次室内质控在控检测标本的结果、填写室内质控失控报告单 等。

6.2失控处理

●6.2.1失控后未得到有效解决前的处理 同批次检测结果都应判断为无效。

●6.2.2 检测项目失控后的处理 可选择其他室内质控在控 的适宜检测方法或措施检测。

●6.2.3根据失控原因分析需实施的纠正措施 

１)重复检测排除人为误差。

２)对仪器做维护、保养，以排除仪器引起的失控。

３)更换试剂和/ 或质控品以验证是否为试剂问题。

４)查清抗筛细胞在使用或储存过程中是否出现抗原表达减弱而引起失控等。

●6.2.4重开输血相容性检测 实验室应在消除质控失控因素并经检测验证有效后，方可再进行输血相容性检测。