|
普通注意事项： 各种基准物质烘干的温度要求并不一样； 烘干过程，称量瓶的盖子应置于称量瓶上，倾斜一定角度使半盖状态，不要把盖另置于烘箱板上，这是为了防止有异物从烘箱顶部跌落到样品中，也防止把烘箱板上的异物带入样品中； 样品应置于温度计探头附近； 烘好后，把干燥器移到烘箱边，用纸条圈住称量瓶，捏住纸条两头，以最短的时间把称量瓶移入干燥器中，盖好干燥器，半个小时内，小心移开干燥器盖少许，以放出部分热空气； 半个小时候则要称量，不能待太长时间； 称量时始终一个原则，不要让称量瓶吸附到水气、污迹或其它异物，所以直接用手接触称量瓶、用药匙取样品、开着天平门称量甚至呼吸气吹到称量瓶都是不正确的操作； 正确的称量操作应是减量法称量，为什么呢，因为减量法称量，称的是烘好的样品，确保样品大部分时间在天平的干燥环境中，如果增量法称量，则要确保器皿干燥且外表也须干净，由于是在天平中操作，所以不能碰到器皿以引起天平读数异常，所以操作起来会麻烦很多称量过程中，只能用称量瓶盖轻轻敲打称量瓶边缘，使药品均匀落到待测器皿中，敲药时间尽量的短，这要求较熟练的操作； 尽可能的多称几个样品，结果取最可能的数值，舍弃较大和较小的数值。 关键： 烘干、冷却、称量 普通注意事项： 费（裴）林氏甲液的用水为煮开后再冷却的蒸馏水； 裴林氏乙液用棕色瓶加橡皮塞保存； 吸取费（裴）林氏试液置于锥形瓶时，最好用刻度吸管而不是移液管，放液时，锥形瓶壁应倾斜45度，吸管垂直，尖部靠在瓶壁，放完溶液时，吸管应在多次在瓶壁的不同位置停几秒（注意不要在有水珠或另一种液滴的地方）； 吸取裴林氏乙液置于锥形瓶时，因为此液浓度较高，流到瓶中的速度较慢，吸管应在多次在瓶壁的不同位置停的时间要稍长一些； 测定样液浓度控制在还原糖含量约为0.45-0.5g/100mL，即消耗滴定液量为20mL左右； 为了避免隐色体被空气中的氧所氧化，而又显蓝色，必须使整个测定过程在沸腾着的溶液中进行，以便驱除液体中的空气； 测预滴定的目的是为了在正式测定时好控制时间； 测定时加入比预滴定消耗样液体积V0少0.5-1.0mL的滴定用样液，使沸腾并维持沸腾2mins,加入3滴1%亚甲基蓝指示剂，继续用滴定用样液以每2秒1滴的速度滴定至溶液刚好由蓝色转变成红色为滴定终点，总沸腾时间为3 mins，整个滴定过程须控制在3 mins内完成； 用蔗糖转化液与葡萄糖液去标定费（裴）林氏试液的结果，应相差不大 如果测定时滴定所消耗的样液的体积与标定时滴定所消耗的基准试液的体积相当，则不用较准。 关键： 吸取费（裴）林氏试液、沸腾并维持沸腾2 mins、整个滴定过程须控制在3 mins内完成 普通注意事项： 原则上样品越少，越容易消化，但样品越少，计量的误差可能性也越大，所以控制到蛋白质含量为0.10g左右，加入0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及20mL浓硫酸应是比较合理的消化方法； 消化过程中，液化较完全时可以摇动一次，把所有的黑色物质摇洗下来，摇动方法是取下漏斗，戴上棉手套，用手掌紧握瓶颈，由前向侧后甩，液体的状态是半旋转半振荡，注意控制力度不要让液体溅离瓶口； 变色时因为是缓慢变色，所以可以两种方法计时，一是完全变色后半小时即停止消化，二是刚变色后一个小时停止消化； 消化液完全冷却后才能加水、转移、定容，这三个步骤都会导致发热，所以必须确保水溶液最后在定容到刻度时冷却到室温，当然要多次洗涤凯氏烧瓶（即凯氏定氮瓶）以确何转移完全； 消化液最好不要放置过液，需要过夜测定时，请先转移定容好消化液。定容好的消化夜也不能放置时间太久（如几天）才进行蒸馏滴定； 蒸馏时，加样液过程可以从容操作，但是加碱后，必须紧密有序，碱的流入过程应是充满整个漏斗口的，在碱还没有放完时就应准备好加水以封住漏斗口，确保蒸发器中已有氨从漏斗口泄漏，而导致结果偏低； 加入的氢氧化钠溶液除与硫酸铵作用外，还与消化液中的硫酸和硫酸铜作用，若加入的氢氧化钠不够，则溶液呈蓝色，不生成褐色的氢氧化铜沉淀。所以，加入的氢氧化钠必须过量，并且动作还要迅速，以防止氨的流失； 停止蒸馏时，由于反应室外层的压力突然降低，可使液体倒吸入反应室外层，所以，操作时，应先将冷凝管下端提高液面并清洗管口，再蒸一分钟后关掉热源。蒸馏是否完全，可用精密pＨ试纸测冷凝管口的冷凝液来测定，中性则说明已蒸馏完全； 滴定量应至少消耗8mL以上的标准液。 关键： 样品称量入凯氏烧瓶、加碱 附件：做蛋白质试验化验室的常见问题有，你犯了几个： 1 没有用长条纸称量； 2 不知道样品精确度是多少，用何种天平称量； 3 直接从原试剂瓶中取药称量； 4 凯氏烧瓶角度不对（应45-60度之间）； 5 不固定凯氏烧瓶就进行消化，就是随便挂上去，太危险； 6 消化温度不知如何控制，什么时候该小火，小到多少，什么时候该大火担心不加石棉网会使凯氏烧瓶破裂； 7 不知如何把握凯氏烧瓶以振摇消化液，也没有准备厚手套； 8 不知道过夜保存的应是消化液而不是定容液（消化液定容后应及时蒸馏）； 9 第二天发现定容液液面低于刻度时又加水到刻度； 10 标定基准物没有烘到要求温度； 11 以为蒸馏要在通风橱中进行； 12 不知道定氮仪如何装，如何清洗，总是拆下来人工清洗，结果洗不干净又打破了不少零件； 13 不知如何正常使用定氮仪，对后面的操作如清洗、加碱注意事项、蒸馏火力控制等无所适从； 13 对结果没有考虑到要计算干基还是湿基； 14 吸管吸样品液后没有用滤纸把沾在吸管外壁的样液吸干； 15 用吸管去吸标准液加到滴定管中去； 16 没有取下滴定管自然垂直查看刻度； 17 用2000mL的大烧瓶作蒸发器而不作任何固定，危险重重，对用大三角瓶作为蒸发器觉得不可理议； 18 对原始记录管理不到位。 普通注意事项： 在通风橱中操作； 注意用提取剂多洗几次小烧杯； 每次振荡要充分但不能太剧烈； 小心放气； 充分沉降后才读数； 小心吸取样液，不要吸到底层样品，造成结果偏大； 水浴蒸发溶剂尽量完全，以避免在烘箱中味太重或起火事故，烘箱鼓风机打开。 关键： 振摇、吸取样液、烘干时间 上班前 开门注意通风，检查门窗、空调设备、其它电器设备等是否正常； 用水注意先把水龙头的水拧开一段时间； 看看今天是否要用烘箱，确定即打开，注意升温情况。 上班过程 烘箱、电炉、马福炉、高压锅等不用即时关掉，无人看守时也必须关掉； 经常收拾化桌面，清理用过的用具、玻璃仪器等； 经常检查试剂配制使用情况，是否有过期试剂、标准液等 对于架上试剂瓶经常拭擦以保持干净无灰尘； 原始记录必须是实验过程中的实际数据，不能随意涂改，如果对结果有怀疑，也不能划去或撕毁，而在备注注明情况，重新做试验并记录，直到结果满意； 原始记录是应统一表格，归档保存，按每月整理收藏，（不常有的原始记录酌情处理）； 仪器用具分类摆放，用过的仪器用具即时清洗干净，自然晾干（或烘干），置于指定位置存放，以备后用；（注意尽量不要用前匆匆忙忙清洗仪器用具） 下班 确认未完成试验样品及仪器的安全性 关闭所有电源，培养箱、冰箱除外； 确认关好水龙头； 确认关好所有门窗； 本文部分素材来源于食品论坛，如涉及版权及稿费问题，请与我联系 |
|
|
来自： 逐梦经典 > 《化验室建设及安全》
