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Simoa单分子免疫分析

 TonyBaohn7zc2g 2020-07-14

Simoa(Single Molecular Array)技术基于Quanterix Simoa HD-1数字式单分子免疫阵列分析仪,可直接对血清和血浆中蛋白、核酸等生物标志物进行超高灵敏度检测,Simoa将极大推动特别是癌症的早期检测,术后的监测和精准用药。其主要应用领域包括肿瘤,神经、感染性疾病和免疫炎症等,目前在全球引用该技术发表的文献有200篇左右,包括高分杂志Nature, Nature Biotechnology, JEM, JAMA Neurology等。

工作原理:

Simoa技术的关键在于将免疫复合物捕获并密封在一个含有超过20万个飞升级别小孔的芯片中反应,大幅提升检测灵敏度。故Simoa又称作数字式ELISA,它的检测灵敏度比传统的免疫检测技术平均高1000倍以上。可对传统方法无法检测到的低浓度生物标志物进行准确分析,为生命科学研究、体外诊断、伴随诊断和血液筛查等领域开创了新的研究前景。

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工作流程示意图

技术优势:

√ 灵敏度高:比传统ELISA灵敏度提高1000倍以上
√ 全自动化:保证结果的重复性和精准性
√ 多重检测:同时完成多达 10 种目标分子的检测
√ 高精确度:实验结果的批间变异系数(CVs)低于10%
√ 高线性范围:检测动态范围 > 4个数量级
√ 自主研发:可进行实验方案开发和优化,适合科研创新

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主要应用领域:

1.神经领域:

提升检测中枢神经系统生物标志的能力

通过传统技术,极低水平的神经学生物标志物只能在脑脊髓液中检测到。Simoa技术能够检测血液中极低水平的神经学生物标志物,为改善脑损伤和脑病的诊断方式提供可能。

Simoa检测能在更早阶段检测出与脑损伤和脑部疾病有关的神经学生物标志物,了解疾病长期影响和病理,研究针对神经退行性疾病、神经炎症、创伤性脑损伤和多发性硬化症等。

已发表文献:
· Verberk IMW et al. Plasma Amyloid as Prescreener for the Earliest Alzheimer Pathological Changes. Ann Neurol. 2018 Nov;84(5):648-658.   (IF=9.638)
· Hansson O et al.Blood-based NfL: A biomarker for differential diagnosis of parkinsonian disorder. Neurology. 2017 Mar 7;88(10):930-937.(IF=8.166 )

2.免疫性疾病:

测定正常样本与免疫性疾病样本中的炎症生物标志物
诸多关键炎症因子,如IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17A、IFN-γ、TNF-α等在疾病初期,尤其是近健康人群中表达量极低,现有传统检测技术如ELISA等受到灵敏度的限制无法检测这些指标,导致研究中经常出现空缺值,无法进行分析。基于Simoa技术检测对于测定血清和血浆中引发炎症的分子及抗炎症的分子,有前所未有的灵敏性,使得更多有关炎症对健康和疾病影响的研究获得新进展。

已发表文献:
· Rodero MP et al. Detection of interferon alpha protein reveals differential levels and cellular sources in disease. J Exp Med. 2017 May 1;214(5):1547-1555  (IF=11.240)
· Disanto G et al. Serum neurofilament light: A biomarker of neuronal damage in multiple sclerosis. Ann Neurol. 2017 Jun;81(6):857-870.(IF=9.638 )

3.肿瘤领域:

于肿瘤发展的每个阶段测定生物标志物
即使生物标志物含量极低,仍能通过Simoa技术检测到,为癌症研究在诊断和治疗方面提供新机遇。Simoa检测可用于监测癌症风险、诊断早期癌症、和鉴别良性与恶性肿瘤细胞。Simoa生物标志物同时能用于预测疾病过程的发展和结局、无进展生存期和监测疾病复发。此外,也能监测患者对于治疗的敏感度,并帮助医生和患者作出治疗决策。

已发表文献:
· Decalf J et al. Inhibition of DPP4 activity in humans establishes its in vivo role in CXCL10 post-translational modification: prospective placebo-controlled clinical studies. EMBO Mol Med. 2016 Jun 1;8(6):679-83. (IF= 9.547 )
· Schubert SM et al. Ultra-sensitive protein detection via Single Molecule Arrays towards early stage cancer monitoring. Sci Rep. 2015 Jun 8;5:11034.(IF=5.228)

4.传染性疾病:

推动传染病预防工作

Simoa能够在免疫反应开始前,检测到传染病生物标志物。由于免疫反应开始前是病毒最具传染性和快速繁殖的时期,此技术将是控制疾病传播的关键。传染病也是当今最热门的研究领域之一,研究人员不断寻求在更早期,并且更精准地检测出传染病的方法。Simoa检测能透过更加普及的早期检测,显著降低传染病传播的机会。

已发表文献:
· Petrone L et al. First description of agonist and antagonist IP-10 in urine of patients with active TB. Int J Infect Dis. 2019 Jan;78:15-21(IF=5.186)
· Banz A et al. Sensitivity of Single-Molecule Array Assays for Detection of Clostridium difficile Toxins in Comparison to Conventional Laboratory Testing Algorit. J Clin Microbiol. 2018 Jul 26;56(8).(IF=3.631 )

· Dhummakupt A et al. The Latent HIV Reservoir Resides Primarily in CD32- CD4+ T Cells in Perinatally, HIV-Infected Adolescents with Long-Term Virologic Suppression.J Infect Dis. 2019 Jan 1;219(1):80-88.(IF=6.344)

5.心脏疾病:

推动心脏健康领域的发展
Simoa技术可检测到极低水平的心脏学生物标志物,推动心脏健康发展和开拓未来路向。比起过去的任何一项技术,Simoa检测能够在更早期检测到心脏学生物标志物,这些标志物有助于预测常见的心血管疾病、心脏衰竭的发生、及末期肾脏疾病的转变。另外,Simoa检测能辨别出生物标志物的微小变化,有效地帮助高风险病人及早了解疾病进展,并作出个性化预防措施。

已发表文献:
· Zetterberg H et al. Hypoxia Due to Cardiac Arrest Induces a Time-Dependent Increase in Serum Amyloid β Levels in Humans. PLoS One. 2011;6(12):e28263. (IF=3.057)
· Jarolim P et al. Fully automated ultrasensitive digital immunoassay for cardiac troponin I based on single molecule array technology. Clin Chem. 2015 Oct;61(10):1283-91. (IF=7.457)

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