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作者：解螺旋.毛博 转载请注明来源：解螺旋，医生科研助手 培养液是人工模拟细胞体内生长的生存环境，对于细胞培养起着关键性作用。在这方面，毛博走了弯路之后得到一些宝贵的经验和教训，都是来自实战第一线的干货，字字血声声泪，先贡献给大家。 1培养基，原配的总是最合适的选择培养基没有一定的标准，某种培养基可以适合多种细胞，某种细胞也可以在不同培养液中生长。但是，建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。例如，小鼠细胞株多选1640；进行细胞杂交，基因转移实验，可选择IMDM。 另外，本实验室用惯了的培养基不妨一试。这些都是师兄师姐们用了几十年了。肯定好用的。 21640 还是DMEM，取决于你发文章的决心1640的确是非常便宜的培养基，也很好用。所以在国内的实验室中，用的非常非常多。但是，它的缓冲力最弱，所以有时会对细胞的生长状态有影响，尤其是一些实验室长期传代状态不好的细胞。所以，毛博很败家地推荐：为了早点出文章，有条件还是用DMEM，当然不是昂贵的GIBCO公司的，实在是太贵了。HYCLONE的砍砍价，干粉很便宜，但是明显杂质和质量不如GIBCO。一分价钱一分货。真的是真理哈。 32到3周的量，多了也是浪费一旦在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，应该在2到3周内用完它。因为，一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。2-3周后就降解完了。所以，一次少配一点，就不要偷懒了。 4慎用碳酸氢钠培养基的pH值随着碳酸氢钠量的增加，呈抛物线增长，当碳酸氢钠加到一定量时，pH变化越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加，呈直线增长，碳酸氢钠量越大，渗培养基变成了高渗溶液，细胞会脱水萎缩滴。 5血清分装防膨胀必须贮存于–20 ～ -70℃，若存放于4℃，如同第三条所说的，2～3周就降解了。教大家一个小窍门：可将1瓶500ml的血清，每次40～45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中，由于血清结冻时体积会增加约10 %， 必须预留此膨胀体积5～10ml，否则会把离心管冻裂滴。 6血清解冻，慢是王道血清的解冻和细胞的解冻正相反：细胞是越快越好；血清是越慢越好。血清解冻步骤: -20℃或–70℃冰箱拿出来，放到4℃冰箱，放一天。在这一天中，时不时地去摇晃一下，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。一天过后，拿出来放到室温下，等血清恢复室温了，再分装。 7热灭活？别上它的当！掌握一条原则：除非必须，一般不要热灭活，因为会造成沉淀物显著增多，且会影响血清的品质。这些沉淀物在显微镜下观察，像是“小黑点”，常常误以为是血清遭受污染，又去过滤呀什么的，无端增加没有必要的工作量。这里毛博提醒大家：一般不要热灭活。
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