【原】用于蛋白质纯化的生物缓冲剂有哪些？

为什么要纯化蛋白质？

蛋白质纯化在生物化学领域具有重要的研究价值！通过感兴趣的纯化蛋白，研究人员可以分析其结构，观察酶活性，研究基因问题以及从特定细菌抗体等中开发抗生素等。

建议用于蛋白质纯化的缓冲液

pH缓冲剂对于维持蛋白质纯化所需的稳定环境pH范围至关重要。在不影响目标蛋白活性的前提下，目标蛋白的类型和纯化方法是选择合适缓冲液时要考虑的两个关键因素。因此，在确定最适合您实验的缓冲液之前，您应确定纯化方法，要研究的细胞样品以及您打算事先获得的结果[2] [3]。我们在此向您介绍6种通常用于蛋白质纯化的生物缓冲液，如下所示：

1）BIS-TRIS

CAS号： 6976-37-0
        pH值范围： 5.8 - 7.2

用途和注意事项：

◆用作电泳的电泳缓冲液，凝胶缓冲液和样品缓冲液

◆与ACES缓冲液一起用作电泳电泳的运行缓冲液（BIS-TRIS / ACES）

◆用于琼脂糖凝胶电泳

◆用作阴离子交换色谱，NMR光谱和X射线晶体学的缓冲液。

◆被认为是高毒性缓冲剂二十碳烯酸的极佳替代品。

◆它与人肝脂肪酸结合蛋白（FABP）相互作用并影响蛋白质动力学。

◆与Pb2 +和Cu2 +形成强络合物，与其他常见金属的相互作用较弱。

2）MOPS

CAS号： 1132-61-2
       pH值范围： 6.5 - 7.9

用途和注意事项：

◆用于色谱法进行蛋白质纯化

◆与牛血清白蛋白（BSA）的多肽骨架相互作用，影响蛋白质的稳定性

3）PIPES

CAS号： 5625-37-6
pH值范围： 6.1 - 7.5

用途和注意事项：

◆用于色谱法进行蛋白质纯化

◆与MES缓冲液和MOPS缓冲液相似，PIPES用作含溶液的金属离子的非配位缓冲液，因为该溶液缺乏与大多数金属离子形成螯合物的能力

4）TES

CAS号： 7365-44-8
pH值范围： 6.8 - 8.2

用途和注意事项：

◆用作酶分析的缓冲液

◆用于凝胶过滤色谱和亲和色谱

5）TRIS

CAS号： 77-86-1
pH值范围： 7.2 - 9.0

用途和注意事项：

◆用于阴离子交换色谱

◆用于缓冲液（TAE或TBE）中进行凝胶电泳

◆用于制备Laemmli缓冲液，用于变性和上样SDS-PAGE中的蛋白质样品

◆不适合用于比辛尼考尼酸（BCA）分析

◆可能会干扰蛋白质测定的布拉德福德染料结合法

6）TRIS-HCL

CAS号： 1185-53-1
pH值范围： 7.2 - 9.0

用途和注意事项：

◆用于疏水相互作用色谱法（HIC），作为分离和透析溶液的成分

◆用于离子交换色谱上样

◆用于亲和层析的底物溶液

◆用于SDS-PAGE，作为洗脱缓冲液的成分