史上最详细教程 | 一文带你精通WB从条带处理到数据分析（上）

准备工具

1.Photoshop    2.Image J  

  3. SPSS    4. GraphPad Prism 6

如果你拿到的是蓝色的条带，如下图：

那我们就需要变个色，弄成黑白的。然后制作成待发表用的图片。当然有些小伙伴现在用化学发光仪曝光的，WB条带就是黑白的，处理起来就方便一点。

01

去色

文件→打开图片，图像→调整→去色

02

新建画布

文件→新建

画布大小：高度，宽度建议大于10厘米，15厘米都可以，画布建大了没关系，后面可以剪切，建小了不方便操作。

03

复制，粘贴条带

矩形选择工具选择条带，然后快捷键：Ctrl+C，复制所选的条带，Ctrl+V，粘贴到刚才新建的画布上。

04

调整条带大小

我们有时候复制过来的条带不一样大小或者不齐，这个时候我们就需要调整，快捷键：Ctrl+T，拉拽条带至合适大小即可。

05

添加文字标注

条带对齐之后，要给条带做标注。选择横排文字工具。上面菜单栏可以调节字体的大小，字体，颜色。字体我们一般选择Times New Roman，适用于发表的要求。

06

合并图层

让刚才做好的几个图层合并成一张图片。这里先保存一张TIF格式的图片（包含所有图层），方便以后修改。文件→另存为。

调节图片亮度/对比度，可以自己慢慢调整到适当数值，让条带更好看。

（调整前）

（调整后）

07

裁剪图片

注：

      1.在合并图层要先保存tif格式的图片，方便以后修改；

       2.保存为jpg格式是用于发表用的。

08

Image J

得到了做好的WB图片后要测条带的灰度值，当然Photoshop也可以测量灰度值，我个人觉得用Image J更专业也比较方便。（实际上是我不会，O(∩_∩)O哈哈~）

09

Image J测WB条带灰度值

打开图片：file→open

10

扣除背景影响

Process→Subtract Background

Rolling ball radius：50，light background，让背景变白一点，因为我们的条带是黑的。

11

设置测量参数

Analyze→Set Measurements。勾选Area，mean gray value，min and max gray value,integrated density。

12

设置单位

Analyze→set scale。Unit：pixel。

13

反转条带颜色

edit→invert

14

选择要测量的条带，选好后测量

Analyze→measure，当然你也可以使用快捷键：Ctrl+M。

15

如步骤14测量好之后导出数据

File→save as ，直接默认保存即可。数据结果可以用Excel打开。

下一期再教大家如何用GraphPad Prism 6做WB结果的柱状图，和用SPSS分析WB的统计数据。因为在一期全部做的话，内容太多，图片也多。