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例析母种培养基并论配方设计(5)

 lyan63 2021-03-09

十三、母种配方设计的基本原则及相关研究注意事项

食用菌母种配方设计,绝不是一件非常随意的事情,尤其是对于大规模使用(液体菌种配方也相当于母种培养基,但对原料适应性要求更高了),既有经济的考量也有科学的考量和技术考量。

以下内容数量均以1000ml培养基为基准,不同量配制应自行换算。

原则a、不求最好,但求较好,以易得性、易加工处理、价格低廉为标准。除非不得已,不要使用大量的蛋白胨、食用肽产品之类,而应该使用超微粉及自行处理的高蛋白原料酶解物,或者某些煮出物。(这可是干货,可惜看见的人不多)

原则b、基础培养基一定用PDA,这是经过许多年实践证明具有普适性的物质基础。但在大规模使用的情况下,工业果葡糖浆、工业糖蜜、粗糖替代或部分替代葡萄糖是完全没有问题的。

原则c、比较添加对象的总干物质添加量在PDA基本量之外不得超过50g,一般不宜超过10g。总干物质量的过剩必然带来后期使用的问题,包括易老化和抗杂性更差。

原则d、不要使用非常见常用的物质,那种研究没有应用价值,但特殊情况下的培养基不在此列。

原则e、无机盐添加总量不宜超过2g,不宜带来pH值超过1以上的偏离,特别需要调节酸碱度的这方面可以例外。

原则f、添加氮源物质严重影响干物质量的,需要予以酌情替换为更高含氮量物质。高糖培养基例外。

原则g、除观察菌丝生长速度与强度,应该有接出后的萌发强度和定植能力作为培养基的评价参考。(这个一直没有纳入教科书,但完全应该纳入)

原则h、接入对比前的菌种应该在培养皿内活化,并接入距离接种点为圆心一致的圆环位置的种块或种饼。

原则i、对比前的萌发速度和强度对应培养基的特性分别为易吸收和易利用。

原则j、培养基比较,没有严格的数量结论,只能以观察结论定性,因此观察者、光线条件等也必须一致,所以应该使用室内固定灯光,而且应该同一人观察总结。

原则k、培养基添加物的单因素比较后,折量复合,是一种可能更优越的配方,培养基的添加物原则上以天然物质和多元化为佳。

原则l、部分菇种对于某些营养物质的专性偏好,不在这个设计原则之下,如蜜环菌所使用的玉米凝胶态培养基。

原则m、每一个菇种都有其对特殊成分的偏好,没有明显偏好的菇种一定对原料没有什么太严的选择性,所有母种和液体培养基都应该从这方面的探索下手(这是鄙人的压箱底功夫之一,估计最后并没有多少人看见,我发现评述文章看的人多,但理解作者意图的不多,而真正的技术文章,读者反而寥寥无几)。

总结:母种培养基的优化和设计,都不能偏离常规,不能产生显著的附加变化,不能用非一致性背景对比,不能出现超范围表现,不能无原则择优,不能无依据盲选。只有在一定的原则框架下,根据观察到的零星表现,去总结推断添加物的使用。同时,研究培养基不能脱离菇种特性,一些对菇种生活史严重欠缺了解的人,只是基于一般统计学概念去进行的试验研究,除了凑论文数,没有任何科学的或者技术的以及经济应用的价值。

(全文完)

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