考点 | 生物技术实践、现代生物科技专题

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生物技术实践

必读：

6．培养基按物理状态分为液体培养基和固体培养基；按功能分为选择培养基和鉴别培养基。

7．常见的两种接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

8．三种常用的灭菌方法有：(1)灼烧灭菌，如接种环、接种针；(2)干热灭菌，如玻璃器皿和金属用具等；(3)高压蒸汽灭菌，如培养基等。

9．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数过程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→筛选能生长的微生物菌落。

11．果胶酶的作用是将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。

12．酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量表示，影响酶活性的因素有温度、pH和酶的抑制剂等。

13．固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。

14．DNA粗提取的原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在 0.14_mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。

15．PCR技术的原理是 DNA复制，需要的条件是引物、模板、原料、耐高温的TaqDNA聚合酶等，过程是变性、复性和延伸。

16．蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定。

17．植物有效成分的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。

18.凝胶色谱法的原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质,相对分子质量较小的蛋白质路程长,移动速度慢;相对分子质量较大的蛋白质,路程短,移动速度快,先分离出来。

19.玫瑰精油适于用水蒸气蒸馏法的原因是其具有很强的挥发性,能随水蒸气蒸馏而不被破坏,难溶于水,与水不发生反应。

20.橘皮精油提取采用压榨法,原因是橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题。

21.精油提取效率主要受蒸馏温度和蒸馏时间的影响。要提高精油品质,在操作中需要通过控制温度来实现延长蒸馏时间的目的。当原料量等其他条件一定时,提取量随蒸馏时间的变化趋势是在一定时间内提取量随时间的延长而增加,一定时间后提取量不再增加。

22.石油醚可以作为胡萝卜素的萃取剂,是因为石油醚具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶,无水乙醇不能用作胡萝卜素的萃取剂,其原因是乙醇能与水混溶。

必背：

1.果醋制作的原理:

(1)当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。

(2)当氧气充足,缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。

2.葡萄酒的自然发酵与工业酿酒的区别是前者的菌种来自附着在葡萄皮上的野生型酵母菌;后者可接种人工培养的酵母菌菌种。

3.葡萄酒呈现深红色的原因:在发酵过程中,随着酒精度数的提高,红葡萄皮的色素进入发酵液中,使葡萄酒呈现深红色。

4.果酒制作中,酒精含量达到一定程度后不变,CO₂也不产生,原因可能是原料耗尽或高浓度的酒精抑制了酵母菌的细胞呼吸。

5.现代腐乳生产是在严格无菌条件下将优良毛霉菌种直接接种在豆腐上,这样可避免其他菌种的污染,保证产品品质。

6.腐乳制作中,豆腐与盐的质量比为5∶1。盐的作用是析出豆腐中的水分,抑制微生物生长及调味。盐浓度过低时不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败变质;盐浓度过高时会影响腐乳的口味(苦咸)。

7.腐乳制作中,卤汤中酒的含量一般控制在12%左右,酒精具有抑制微生物生长及调味的作用;酒精含量过高,腐乳成熟的时间会延长;含量过低,不足以抑制微生物生长。

8.含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶是因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用,而抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。

9.泡菜制作过程中盐的作用是:灭菌、渗出蔬菜中过多的水分以及调味。盐水浓度太高会引起乳酸菌细胞渗透失水,影响乳酸菌生长繁殖,甚至导致乳酸菌死亡。

10.发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量的原因是发酵不同时期亚硝酸盐含量会发生变化,及时测定是为了把握取食泡菜的最佳时机。泡菜腌制过程中,亚硝酸盐的含量变化是先增加后减少,最后稳定在较低水平。

11.无菌技术的目的是获得纯净培养物,关键是创造无菌条件,防止外来杂菌的入侵。

12.选择培养基是指允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

13.统计菌落数往往比活菌的实际数目低的原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。

14.判断培养基是否被杂菌污染的方法是设置未接种(或接种等量无菌水)的培养基作为空白对照。

15.测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后,将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养,大肠杆菌菌落呈现黑色,通过计数得出水样中大肠杆菌的数量。

16.选择培养的目的是增加目的菌株的浓度;振荡培养的目的是增加培养液中的溶氧量,使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率。梯度稀释的目的是使纤维素分解菌分散开,以便能够得到单细胞菌落。

17.固定化酶将酶固定在不溶于水的载体上,其优点是酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时固定在载体上的酶还可以被反复利用。

八、现代生物科技专题

必读：

1．DNA重组技术的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。

2．限制性核酸内切酶主要从原核生物中提取，具有专一性，使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

3．载体的种类有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

4．基因工程的基本操作程序：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。

5．获取目的基因的方法有：从基因文库中获取，利用PCR技术和人工合成法获取。

6．基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

7．目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。

8．目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法，常用的受体细胞是受精卵。

9．蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

10．面对转基因技术的利弊，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食。

11．基因身份证是把个人的致病基因和易感基因检测出来，记录在磁卡上，做成个人基因身份证。

12．生物武器的种类包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌。

13．植物组织培养技术的理论基础是植物细胞具有全能性，过程是：离体的植物组织、器官或细胞脱分化――→愈伤组织再分化――→胚状体或丛芽→试管苗。

14．植物体细胞杂交技术中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体；诱导细胞融合的方法有离心、振动、电激等物理方法或聚乙二醇等化学方法。

15．动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植技术、动物细胞融合等。

16．动物细胞培养过程：取动物组织块→分散组织细胞(用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理)→配制细胞悬液→原代培养→传代培养。

17．动物体细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

18．动物细胞融合技术中涉及的促融方法有聚乙二醇(化学方法)、灭活的病毒(生物方法)或电激(物理方法)等。

19．杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生某种特异性抗体(单克隆抗体)。

20．胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。

21．卵裂期的特点是细胞分裂方式为有丝分裂，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，或略有缩小。

22．早期发育的胚胎分为桑椹胚、囊胚和原肠胚3个阶段。

23．哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能以及受精等主要步骤。

24．培养哺乳动物早期胚胎的培养液成分：无机盐类、有机盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。

25．胚胎移植不属于生殖方式，仅属于一种技术，可用于有性和无性生殖产生的胚胎的移植。

26．胚胎移植的意义是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。

27．对囊胚进行分割时要注意将内细胞团均等分割。

28．哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。在形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性。

29．生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理。

必背：

1.限制酶主要是从原核细胞中分离得到的,其原因是原核细胞易受外源DNA的侵袭,具有限制酶的原核细胞可选择性地破坏不同于自身DNA的外来DNA,从而适应环境。

2.PCR扩增DNA的大致过程是目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,在DNA聚合酶作用下子链延伸,如此重复循环多次。

3.启动子的分子位置和生物作用:位于基因首端的DNA片段是RNA聚合酶识别和结合的部位,它能驱动基因转录出mRNA。

4.农杆菌转化法中农杆菌的作用是可感染植物,所含的质粒能将目的基因转移并整合到受体细胞染色体DNA中。

5.转移的基因能在受体细胞内表达的原因是生物界共用同一套遗传密码。

6.微生物细胞作为转基因受体细胞的优点是繁殖快,多为单细胞,遗传物质相对较少。

7.用两种限制酶同时处理质粒和含目的基因的片段,主要优点是可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化(也能防止反接)。

8.转基因抗虫或抗病农作物个体检测方法是用相应害虫或病原体分别感染转基因和非转基因植株(做抗虫或抗病的接种实验),观察比较植物的抗虫性或抗病性。

9.细胞内的代谢产物一般不会过度产生和积累的原因是代谢产物过多以后,可以负反馈抑制与之相关的酶的活性,从而使代谢产物的量不会过多。

10.与杂交育种相比,植物体细胞杂交的优势是克服远缘杂交不亲和的障碍,获得杂种植株。

11.选取茎尖培育脱毒植物的原因是茎尖病毒极少,甚至无病毒。

12.动物细胞培养需要添加血清的原因是人类对细胞所需营养没有完全搞清,而动物血清成分复杂,可保证细胞营养需要。

13.单克隆抗体主要的优点是特异性强、灵敏度高、并可能

大量制备。

14.判断哺乳动物卵子已经完成受精的重要标志是卵黄膜和

透明带的间隙可以观察到两个极体。

15.卵裂期的主要特点是细胞分裂方式为有丝分裂,细胞的数量增加,但胚胎的总体积不增加,或略有缩小。

16.外来胚胎在受体子宫内存活的基础是受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫排斥反应。

17.胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。

18.胚胎干细胞(ES细胞)的应用价值是治疗人类因细胞功能异常引起的某些疾病;培育人造组织器官,解决供体器官不足和免疫排斥反应的问题;揭示细胞分化和凋亡的机理。

19.胚胎的性别鉴定的主要方法是用Y染色体的DNA作探针,利用DNA分子杂交技术,检测待测胚胎细胞的DNA;显微镜下观察胚胎细胞有丝分裂中期,细胞中性染色体的组成。

20.引起转基因生物安全性争论的原因是目前科学家对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制等了解得相当有限;转移的是异种生物的基因;外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的。

21.发现转基因生物出现安全性问题之后的措施是立即停止实验,并销毁重组生物。

22.生态工程建设的目的是遵循自然界物质循环的规律,充分发挥资源的生产潜力,防止环境污染,达到经济效益和生态效益的同步发展。