光学显微镜物镜参数解读

zhanghuaguan 2021-06-18

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显微镜物镜参数

图1

1.放大倍数：物镜上第一行数字中的“10”和“4”表示物镜的放大倍数为10倍或4倍，这里放大倍数不是面积的放大倍数，而是指像的长度或宽度的放大倍数，且显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。

2.分辨率：分辨率是指所能分辨两个物点间的最小距离。显微镜的分辨距离越小，表示它的分辨率越高，也就是表示它的性能越好。显微镜的分辨率大小是由物镜的分辨率来决定的，而物镜的分辨率则由它的数值孔径(镜口率)和照明光线的波长决定的。当光线均匀地透过标本时，显微镜的分辨距离可用公式：D=0.61λ/NA(D表示物镜的分辨距离，单位nm；λ表示照明光线波长，单位nm； NA表示物镜的数值孔径) 表示，所以显微镜的分辨率与数值孔径成正比。（D值越小，分辨率越高）

图2

3.数值孔径( 镜口率)：物镜中“0.25”和“0.10”分别为两个物镜的数值孔径，它表示物镜的前透镜收集来自样品光线的能力，数值孔径的大小可用公式NA=Nsinα，其中N表示介质的折射率，空气中N=1，而在油镜下，N 可提高到1.5；α表示物镜孔径半角( 图2) ，物镜孔径半角越大，进入物镜的光线就越多。

图3 物镜( 左) 和目镜( 右) 放大物像的原理示意图

4. 机械镜筒长: 图1物镜上的“160”即指该物镜必须在机械镜筒长度为160mm的显微镜上才能使用。由物镜定位面至目镜定位面的距离为160mm，该距离称为机械筒长，即取下物镜和目镜以后，所剩下的镜筒长度。各国对机械筒长的规定不同，主要有160mm、170mm 和190mm 等几种。

5.盖玻片厚度：国际上规定，盖玻片的标准厚度为0．17±0．01mm。图1物镜上所标记的数字“0.17”即表明该物镜要求盖玻片的厚度为0.17mm，若盖玻片的厚度大于0.18mm时，杂光( 不是反光镜反射的光) 就会进入物镜，从而产生相差，当盖玻片的厚度小于0.16mm 时，应该进入物镜的光线不能进入物镜，进而也产生相差影响观察效果。另外，由于香柏油与玻璃的折光率相近，所以油镜物镜不存在盖玻片厚度不规范引起的相差问题，也就是说盖玻片的厚度对油镜物镜观察效果影响几乎可忽略不计，在有、无盖玻片的情况下都可以使用( 如血涂片) 。所以，有的油镜上不标“0．17”而代之以横线“－”。