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脱落细胞（exfoliative cell）涂片染色法： 较可靠的检查方法 能清晰地显示细胞的结构，容易发现异常细胞 方法简便，检查速度快，阳性率和准确率高 广泛用于宫颈癌、胃癌、食管癌、直肠癌、鼻咽癌等的普查和细胞学诊断等领域 一、取材 （一）阴道 检查目的：组织恶性变、激素功能观察、阴道感染鉴定 取材前一天，应无性交、盆浴、阴道灌洗和涂药，不在月经期 病变多发生在子宫颈柱状上皮和鳞状上皮交界处。取材特别注意宫颈口变化。对阴道后穹窿的液体或宫颈口表面的刮取物涂 片2~3张，固定后染色 （二）食管 使用食管细胞收集器——双腔Y型食管球。一端有可充气的网套橡皮囊，网套与食管壁摩擦将细胞脱落，取出气囊，立即涂片。涂片时轻转气囊位置。 固定与染色：与阴道脱落细胞涂片相同。 （三）痰液 收集清晨漱田后的痰液，取深部咳出来的痰液。 涂片时选择痰液可疑部分，如含血液或类似组织物质的部分涂片，尽量在不同部位多涂一些片，涂片后立即固定。 痰液标本固定比其它标本长些。 痰液检查：诊断下呼吸道恶性变、肺石棉沉着及肺霉菌感染等；痰内嗜伊红粒细胞多少，诊断过敏性哮喘 （四）胸、腹水 大量的胸腹水有很多脱落细胞 取材前，先让病人活动一下，使沉淀的癌细胞能漩浮上来；穿刺抽取胸水或腹水，离心沉淀，弃上清液。取沉淀物做推片或抹片、涂片，稍干，入乙醚酒精固定。染色 （五）胃液、尿液 直接取胃液或尿液，或用胃和冲洗胃拉网的液体，离心沉淀，弃上清液，取沉淀物涂片固定。 一般以抹片为宜，适当增厚些，获得较多的细胞。 若有感染，细胞成分较多，以推片为佳，固定，染色，观察。 （六）乳腺及前列腺分泌物 先用酒精棉球或盐水棉球消毒，由肿块处沿乳腺管方向按摩乳房，挤出分泌物涂片；如分泌物不易挤出，最好在月经周期第四周，用吸乳器吸取分泌物涂片；必要时可用针吸法抽取分泌物涂片。 取前列腺分泌物，从尿中找癌细胞，按摩前列腺，腓尿后取尿液离心深沉涂片 二、固定 取材后，及时涂片固定，不能在室温放得太久，否则细胞会自溶，影响染色和观察 常用95%酒精或乙醚酒精（1：1），固定10~30分钟即可染色，也可长达1小时以上 涂片越早固定越好， 有时细胞容易脱落；固定晚了，结构不清。最好在将干未干的情况下入，固定液固定 三、染色 HE染色法，细胞核蓝紫色，细胞质淡红色 巴氏（Papanicolaou）染色法：见下 Shor染色法：（略） 巴氏染色法 能清晰显示细胞结构，特别是核染色质染色非常清楚，反映细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化 适用于呼吸道、消化道、泌尿道、胸水、腹水和女性生殖道等脱落细胞或器官刮取物涂片的临床诊断 特别对女性生殖道涂片的细胞学检查，产生 多种颜色，研究女性激素水平和检测念叛徒菌、滴虫等 试剂： Harris苏木精，1%盐酸酒精（或0.5%酸酒精），稀氨水 70%酒精,75%酒精，90%酒精，95%酒精 橘黄G液（DG6）：橘黄G(Orange G) 0.5克，95%酒精，磷钨酸(Phosphotungstic acid )0.015克 EA36液：0.5%亮绿SF(Light green SF)水溶液45毫升，0.5%伊红Y(Eosin Y)水溶液45毫升，0.5%俾士麦棕(Bismark Brown)水溶液10毫升，磷钨酸0.2克，碳酸锂(Lithium carbonate)饱和水溶液1滴 方法： ⑴ 将固定好的涂片用95%酒精洗1分钟，75%酒精浸泡，蒸馏水冲洗3分钟； ⑵Harris苏木精染色5~19分钟，流水冲洗1分钟； ⑶1%盐酸酒精或0.5%酸酒精分色，流水冲洗2分钟； ⑷稀氨水碱化1分钟，流水 冲洗数分钟； ⑸70%酒精、90%酒精各2分钟； ⑹橘黄G（DG6）液染60~90秒 ⑺ 95%酒精洗两次； ⑻EA36或EA50液染2~3分钟 ⑼95%酒精洗1~2次 ⑽无水酒精两次各2分钟 ⑾二甲苯透明二次，树胶或DPX封固 三、镜检（显微镜下观察） （一）女性生殖道脱落细胞 表层细胞：核蓝色，角化前细胞浅蓝色，核中等大小，核染色质疏松呈网状；角质细胞的细胞质呈粉红色，核小，核染色质致密。 若在排卵期，上皮角化增厚，背景清晰，白细胞很小，红蓝相间的角化细胞与前角化细胞非常多，颜色鲜艳 中间层细胞：梭形、船形或圆形；核中等大，圆形、卵圆形或杆状核，多偏位；胞质有空泡，呈浅蓝色或褐红色。若受激素影响，中间层细胞成群增多 基底层细胞：内层细胞细胞质少，核圆形，呈深蓝色，位于中央，多见于阴道萎缩及宫颈糜烂等；外基底层细胞圆形或卵圆形，胞质丰富，呈浅蓝色。如激素分泌大大下降，涂片上的大多数细胞来自内、外基底层 宫颈鳞状上皮癌变：细胞核大小不一，有的癌细胞核仁明显，有时可见裸核和多核，核染色质增粗，核染色深；胞体形态多样，呈多边形、圆形、纤维状、蝌蚪形，成群或分散分布 细胞和细胞核增大，核染色质增粗，染色深，称核异质。受炎症刺激发行细胞形态和核染色质改变 （二）食管 食管经常脱落的细胞是复层鳞状上皮细胞。可分三层：表层细胞、中间层细胞和基底层细胞。形态一阴道脱落细胞相似。 少数脱落细胞是上皮基底层矮柱状细胞 食管细胞恶性变，上皮细胞呈恶性细胞特征 （三）痰液脱落细胞 多来自呼吸道和口腔，是从上皮表层脱落下来的鳞状上皮或假复层柱状纤毛上皮 呼吸道炎症：可找到恶性细胞，恶性变特征，如细胞大小不一，细胞核大而染色深等 （四）胸水和腹水脱落细胞 常含多量的间皮细胞：圆形，胞质丰富，HE染色呈淡粉色，细胞核呈肾形或圆形，偶见核仁1~2个，偶见核分裂相，细胞退化时，细胞质产生 空泡，将核挤到细胞一侧，形成戒环状细胞 急性或慢性炎症：还可见大量巨噬细胞：形态变化很大，有时细胞界限不清，有伪足，染色呈淡粉色，有时细胞呈戒环状细胞，并与间皮细胞形成的戒环状细胞不易区别 胸、腹水中的恶性细胞，少数来自原发性恶性间皮瘤；绝大多数由各脏器肿瘤浸润到浆膜表面，肿瘤坏死破裂直接脱落到胸、腹水中，或肿瘤转移，浆膜或淋巴坏死破裂而来，也有从肿瘤直接脱落的细胞 有时胸、腹腔脏器内的肿瘤，如无上述因素，则由其它原因产生胸腹水积液并无癌细胞，积液中的癌细胞与其它液体中的癌细胞基本一致，特征更明显 （五）胃液和尿液脱落细胞 胃液的鳞状上皮细胞：主要来源于口服、咽喉和食管黏膜上皮；柱状细胞来源于胃黏膜上皮。胃液的细胞一般变化不大，细胞单个或成群出现，细胞核圆形或椭圆形，核膜薄而清晰，核染色质微细而均匀，核仁1~2个；大多数细胞胞质消失而呈裸核。恶性变时，具备恶性细胞特征 泌尿系统的上皮细胞：自然排出的尿液中还有精子；肾小管为单层柱状、立方或扁平；在肾盂、肾盏、输尿悉、膀胱和尿道近膀胱部为移行上皮（变移上皮）'尿道外口为鳞状上皮。 自然排出的尿液中，脱落细胞类型和形态变化很大，有的细胞难鉴别其来源。 总之，尿液中的脱落细胞最多来自膀胱，其次是输尿管、肾盂、肾小管和尿道。若发行恶性变，根据细胞的恶性特征来诊断 （六）乳腺分泌物及前列腺分泌物： 乳腺导管上皮多来自大导管上皮：呈泡沫状细胞及鳞状上皮细胞。静止期，腺泡细胞较小，细胞质淡季，相相对较大，圆形或卵圆形，染色质均匀纤细，着色较深，核仁不明显；妊娠和授予乳期，细胞较大，胞质多，细胞质内有明显空泡，核常偏位，有双核或多核 炎症时，上皮细胞增多；泡沫状细胞显著增多。分泌物中常出现导管上皮细胞。分化较好；有时可见白细胞。若恶性变，与其它腺癌相似：细胞核改变，核大，大小不一，染色质增粗，大细胞核仁明显，小细胞无核仁，多见核分裂，细胞质有空泡或呈“戒环状细胞”；有时可见裸核细胞及坏死细胞 前列腺分泌物：腺细胞为主，大多为矮柱状细胞。恶性变，腺细胞成群出现，大小差别很大，具恶性肿瘤细胞特征
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