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如果是灭菌前调节，灭菌后培养基PH发生变化该如何？如果灭菌后调节，怎样保证用PH计测量时不染菌？ 常规的培养基应该是在灭菌之前调PH值，高压对大多数培养基的PH值影响不大（除非你的培养基含有特殊成份）。 一般是灭菌前调节ph,如果灭菌后调，容易染菌。而且培养基配方中的ph都是指灭菌前的ph。灭菌后，培养基ph一般会下降0.2 灭菌前调节ph 灭菌前调节ph 一本美国人k巴克编的由科学出版社出版的<分子生物学实验工作手册>上是这样认为的:灭菌培养基的ph不能高于7.5.必须在中性条件下灭菌,待溶液冷却后再用无菌的碱调节ph.没办法,科学来不得偷懒!我曾经配过ph8.0的LB,但是高压灭菌后再测实际只有7.8左右.所以别人说得还是有道理的.还有不要在ph6.0以下灭菌琼脂溶液.含有矿物盐的溶液不能和琼脂一起灭菌.葡萄糖不能和含有氨基酸/蛋白胨或者磷酸盐的组分一起灭菌.磷酸盐不能和含有氨基酸/蛋白胨或者其他矿物盐溶液一起灭菌. 玻璃瓶装培养基，灭菌前调节； 发酵用培养基，灭菌后调节。 lpp321 wrote: 能解释一下这些配伍禁忌的原理吗? wqwq69 wrote: 同意!我们的摇瓶和小罐都是消前调节,大罐是消后用碱调节! 发酵用培养基，灭菌后调节 这样如何避免染菌，是用PH试纸吗 cyuzi wrote: 一般来讲，培养基灭菌后，pH值都会下降，通常是加碱调节pH值，其实微生物在酸或碱的溶液中无法存活，尤其是碱溶液。工业生产中也有用液氨调节pH值的例子，如果实在是担心，加个滤器好了。发酵实验或生产，可灭菌的pH电极应该是很普及了吧，如果实在没有，就混匀后取样，用pH计测定好了，如果连pH计也没有，还是干脆别做这方面的研究了，哈哈，just kidding. 楼主得问题一定是对于在三角瓶或试管中得培养基灭菌后的ph有疑问，应该是在灭菌前测定，不过我认为应该做试验比较灭菌前后ph变化的规律。 我们有好多次发现培养基配方不同，灭菌前后ph的变化差异很大，有升高，也有降低，最重要的是应该用空白的培养基调整成不同的ph进行比较找出其中规律，或者在培养基中加入缓冲体系，可以最大限度的保证ph的相对稳定，在一些文献中看到也有人利用CaCO3来调节ph，CaCO3本身不溶于水对培养基影响不大，但是它的特性是在酸性环境中可以通过释放CO2来降低酸度，同时溶解到水中的Ca离子也是碱性离子，可以在一定范围调节ph。 摇瓶是灭菌前调节.罐子是灭菌后调节 sicy3 wrote: 有的罐子在灭菌前也要调ph，我原来做生产的中小罐消毒，在灭菌前都要调ph，灭菌后根据质检的检测结果决定是否要调。 其实，对于一般的培养基，无论是摇瓶还是发酵罐，都是在消前调pH。 对于摇瓶，在研究配方和工艺时有一项内容就要考察消前的初始pH，在确定后，再测定消后的pH，作为发酵罐上消后pH控制的依据。 由于发酵罐是蒸汽直接消毒，由于冷凝水的原因，pH一般要适当提高一点或降低一点（视培养基pH的酸碱性和冷凝水的量而定）。罐上只要控制住冷凝水的量，就能很好控制消后pH，无须消后再调（除非是操作失误！）。 对于少数特殊培养基，如几种成分需要分开消毒的，不在此列。 lpp321 wrote: 能否将“分子生物学实验室工作手册”共享一下啊 都是灭菌前调 在微生物生长过程中由于PH 变化较大也有调节PH值的。 灭菌前调比较合理。灭菌后是补救措施。 |
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