说过了IVF的优势,我们再简单和大家聊聊IVF的操作流程。 IVF操作具体分四步: 体外受精用培养皿准备 实验开始前一天在35 mm培养皿中加入2个200 μL TYH培养基液滴 精子的采集 (1) 将符合要求的性成熟(8周以上)的雄鼠颈椎脱臼处死,取出附睾上体尾部,去除脂肪与血迹后,置于一个TYH液滴内。 (2) 利用眼科剪在液滴内横断附睾尾,当精子充分游离出附睾尾后,将组织从液滴内取出,将培养皿置于培养箱。 图1. 雄鼠取精操作 卵母细胞的收集 处死超排后的雌鼠,取出两侧的输卵管,置入培养皿取出卵丘细胞团放入200 μL TYH培养基。 精卵混合 用10 μL移液器从精子滴吸取获能后的精子,加到卵子液滴中,根据卵团大小情况以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。将精卵混合后,把培养皿置于培养箱中培养。 体外受精完成后将胚胎移入假孕母鼠子宫,21天后小鼠就会出生了。 图2. 胚胎移植操作 |
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