【原】非瘟频发，口腔拭子采样作为早期替代检测方法的可行性

养猪业 2021-09-09

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非洲猪瘟 (ASF) 对全球养猪业构成严重且持续的威胁，其在欧洲和亚洲的迅速蔓延就是明证。北美国家正在寻找快速有效的方法来采样和测试 ASF。

早期发现对于确保快速反应和控制非洲猪瘟至关重要。本文主要分享使用口腔拭子采样检测的方法。

关键点

口腔拭子采样可快速检测劳动量低、节约成本
早在感染后 3-5 天、临床症状开始之前，就在口腔液中检测到 ASFv 基因组的低至中等水平
需要进一步研究以了解 ASFv 口腔液采样的局限性和最佳实践

口腔拭子采样已成为诊断和监测该病的有效工具，因为它们不需要专门的设备或培训。OF 样本可以提供更快的 ASF 检测形式，被广泛使用。在之前使用感染 ASF 的小猪群进行的研究中，在 OF 中检测到 ASF。每栏 20-25 头猪，进行这项研究是为了模拟工业条件。

收集口腔液样本时，将绳索系在圈内所有猪都容易接触到的区域

方法

对 20 头或 24-25 头猪进行了四次实验，其中两次在加利福尼亚州温尼伯的国家外来动物疾病中心 (NCFAD) 进行，另外两次在梅岛动物疾病中心 (PIADC) 的外来动物疾病诊断实验室 (FADDL) 进行) 在美国纽约。NCFAD 和 FADDL 的实验分别使用高毒力（ASFV Georgia 2007/1）和中等毒力（ASFV Malta'78）菌株。从每组中选出一只猪并将其从围栏中取出，用特定菌株进行肌内感染。注射完成后，将猪放回原来的猪圈。在每项研究中都定期收集绳索样本，确切频率因研究而异。每天或每隔一天收集个体血液、直肠温度和口咽样本，猪被分成两组，以确保每天对每组进行采样。最后，对口腔液、全血和口咽拭子进行 DNA 提取和定量实时 PCR (qPCR)。

结果

所有四个实验在临床表现和时间线方面都有差异，但显示 ASFv 的预期进展缓慢但稳定。所有组在感染后两周的死亡率均达到 50%，早期观察到的临床症状是非特异性的，如发烧、嗜睡和采食下降。一般而言，在种猪感染后 1-3 天 (dpi) 和接触猪接触后 6-10 天 (dpc) 的全血样本中检测到病毒。在dpi/dpc 3-5时，首次在口腔液样本中检测到病毒；然而，所有的口腔拭子在 dpi 3 时呈阳性。接触猪在 3-5 dpc 时口腔拭子呈阳性。

结论

本研究的目的是评估使用绳索口腔液采样作为 ASFv 监测和检测的早期检测方法的可行性。研究表明，即使是 ASFv 毒株，死亡率也可能需要 13-19 天才能表明感染。此外，目前的做法通常用退热药和抗生素治疗发烧、嗜睡和采食下降的临床症状。因此，除非对受感染的猪进行单独采样，否则在达到高死亡率阈值或猪开始出现疾病特定症状之前，可能无法确定 ASFv 感染。全血是目前被批准用于检测 ASFv 感染动物的样本类型。基于全血的监测的劳动力、资源和时间密集型特性对行业来说成本高昂，并且可能使疾病检测变得困难。口服拭子可以提供一种低成本和低劳动力的替代监测方法。与随机的个体采样相比，口腔液体的聚合性质可能会降低遗漏感染猪的风险。

这四个实验的结果表明，在种猪全血检测后一两天的 dpi 范围内，聚集的口腔拭子样本检测到 ASFv 感染，并且与种猪和接触猪的口咽拭子样本相当。需要进一步研究以了解口腔液体作为 ASFv 监测方法的局限性和最佳用途。

根据这项研究和之前的研究，口腔拭子采样可以与其他监测策略结合使用，当下饲料成本连续上涨，而猪价却连续下跌，甚至很多场已经跌破成本线。如果检测死猪和病猪，以及随机个体采样时，能使用口腔拭子采样作为监测猪群中 ASFv 的一种方便且具有成本效益的方式。岂不更好？你们觉得呢？