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分离以尿素为氮源的微生物的分离
一、理论基础 1．筛选菌株 （1）实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 或 其他微生物生长。 （2）选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 和 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 （3）配制选择培养基的依据：根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养 微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养 的微生物；加入高浓度的食盐可选择耐盐的菌等。 2．统计菌落数目 （2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理：当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 范围内的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法还有 直接计数。3．设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的 。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养 的培养基作为空白对照。二、实验设计
1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样（浙科版：从哺乳动物排泄物的地方取样）。应先 3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的容器中。2．制备 ：准备牛肉膏蛋白胨（全营养）培养基和选择培养基，将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为 ，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。3．微生物的 与观察：将10g/1g土样加入盛有90 mL/99ml无菌水的锥形瓶中(体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液 ，转移至盛有 的生理盐水的无菌大试管中，将土样以1、10、 103…… 依次等比稀释至107稀释度，并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取 进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。 4．细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数 的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。 答案：
一、1 （1）目的菌珠 抑制 阻止 （2）特定 抑制 阻止 （3）自养 能固氮的微生物； (2).稀释度 细菌 30-300 （显微镜）血细胞计数板3.非测试因素 可信度 无杂菌污染 研究土壤中微生物的二、1. 土壤，铲去表层土 2. 培养基 多于 对照 3.培养 1ml 9ml 0.1mL 4. 30-300 平均数高阶水平
四、视频解析：
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