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【疑问 1】DNA 复制时，两条子链的合成都是连续的吗？【释疑】不是。由于 DNA 复制的方向只能是 5' → 3'，而两条模板链的方向是反向平行的，一条链的走向为5' → 3'，另一条链为 3' → 5'。这就很难说明，DNA 在复制时两条链如何能够同时作为模板合成其互补链。为了解决这个矛盾，日本学者冈崎等提出了 DNA 的不连续复制模型，认为 3' → 5' 方向合成的 DNA 实际上是由许多 5' → 3'方向合成的 DNA 片段连续拼接起来的（图 1），这些刚合成的 DNA 片段就叫冈崎片段，连续合成的链叫前导链，不能连续合成，由冈崎片段拼接形成的链叫滞后链。所以DNA 的复制是半不连续复制。 
【疑问 2】DNA复制为什么只能从5'到3'，不能从3'端到5'端呢？ 这个和执行DNA复制的酶，也就是DNA聚合酶（DNA polymerase）的活性有关。因为DNA聚合酶只能把核苷酸加到3'-OH末端。（见下图） 
因此DNA复制只能从5’到3'（下图箭头方向，DNA replication），也就在复制过程中形成了先导链（leading strand，下图b）和滞后链（lagging strand，下图c），滞后链上还有一个个的冈崎片段（Okazaki fragments）。 
【疑问 3】DNA 复制需要 DNA 连接酶吗？ 【释疑】需要。由于滞后链是不连续合成的，会产生很多冈崎片段。DNA 聚合酶只能在单个的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，不能在 DNA 片段之间形成磷酸二酯键，这些冈崎片段是由 DNA 连接酶连成长链的 。 【疑问 4】DNA 复制为什么需要引物？ 【释疑】DNA 聚合酶有两大特点：第一，只能从 5' → 3'依次连接单个的脱氧核苷酸，不能连接两个已有的 DNA片段；第二，DNA 聚合酶不能发动新链的合成，只能催化已有链的延长反应。在 DNA 模板上先合成一小段 RNA，DNA 聚合酶再从引物的 3'—OH 端开始合成新的 DNA 链 ，这一小段 RNA 就是引物。【疑问 4】细胞内DNA 复制时，为何需要RNA片段为引物，而不是DNA片段？（如果有一 个能起始链延长的特定DNA聚合酶来催化合成引物的话 , DNA复制就可稍简单些） 。原因如下[1]：（1）从生命起源上看，RNA在生命起源中起主导与中心作用，然后才产生了蛋白质与DNA。因此有些生物现仍以RNA作为遗传物质。并且，生命活动中所有生物都是以RNA作为信息中介来完成DNA指令的使命。所以，DNA合成时需要RNA引物很可能是早期DNA活动需 RNA参与的遗迹而被保存下来。（2）从DNA聚合酶的活性看，没有RNA聚合酶的参与就不能提供DNA合成时必需的3'-OH端，也就无法启动DNA的合成。所以DNA复制需要RNA 作引物。（3）从DNA复制的忠实性上看，一般认为，线状DNA两端的碱基对并不稳定，因此在合成起始段时，开头的几个碱基如果发生差错将不易校正。因为靠极短的寡核苷酸的堆积所能提供给双链结构稳定性的力太小，以致氢键相当微弱，使原有的校正功能难以检出不配对碱基予以校正，所以引物起始部位的差错率不能通过校正而减少。也就是先延长一个要丢弃的引物，使新加上的碱基有严格的碱基配对，以保证复制的忠实性。另外，使用RNA作为DNA 合成的引物，主要在于它易被DNA聚合酶Ⅲ作为DNA 合成终止的信号所识别，使DNA聚合酶I进行切口移位，以减少DNA复制的出错率。如果用DNA作为引物，就不能被 DNA聚合酶Ⅲ识别（RNA、DNA的化学组成不同），从而影响了DNA的复制。参考文献：[1]王昌留.DNA复制时为何需要RNA作引物[J].生物学教学,1998(12):21.
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