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最简单的RNAi——Accell siRNA

 优宁维 2021-12-14

不需要借助任何转染试剂、不需要构建病毒载体、不需要包装病毒颗粒、更不需要借助电转仪,和惯性思维通通SAY NO!
您需要的仅仅是一个Accell siRNA!Accell siRNA可直接在典型的难转染细胞中进行有效的基因沉默,其中包括SH-SY5Y (神经母细胞瘤)、Jurkat (T细胞)和原代神经元等。
事实上,递送方式仍然是目前RNAi在众多难转染细胞应用中的最大屏障之一。为了克服这一困难,Dharmacon研发了一种创新性siRNA,能够促进siRNA的递送,不依赖于病毒载体或脂质体转染试剂,可在几乎所有细胞类型中成功递送。
此外,在进行RNAi时,如果您研究的蛋白质半衰期较长或研究的表型需要较长时间才能实现的情况下,普通的siRNA就存在一定的局限性。到底怎样才能诱导长时效的基因沉默呢?那当然还是我们的Accell siRNA,您可以通过简单的重复补加,从而使靶基因达到一个更长时效的敲低状态。
那么,Accell siRNA到底有多么神奇呢?和普通siRNA相较,它的优势到底体现在哪儿呢?小编今天就带您一探究竟! 

1.可在多种难转染细胞类型中成功进行RNAi,且在多个细胞系中得到验证:
利用有效的算法在HeLa S3, Rat-2, 3T3-L1, Jurkat, THP-1, NHA和SH-SY5Y等细胞中进
行多个基因敲低效率的验证,结果表明Accell siRNA可在难转染细胞中保证基因沉默效率、基本无细胞毒性,对细胞活性影响极小。

 
Accell siRNA适用于普通脂质体转染试剂难转染的细胞系,部分如下表所示:

2.操作简便,RNAi重复性高
您要做的只是将Accell siRNA和Accell Delivery Media(也可使用低/无血清培养基)混
合成mix后,直接加到细胞中培养72h,即可进行相应的表型分析鉴定。


3.延长沉默时效——重复补加Accell siRNA
重复补加Accell siRNA诱导长时效基因沉默的基本操作流程:首先将细胞铺板培养,
24小时后去掉生长培养基,加入delivery mix (Accell siRNA 和Delivery Media的混合物),培养24~48h后,将delivery mix替换为完全生长培养基,继续培养至细胞长满,随后传代细胞,同时按着之前同样的操作重新补加Accell delivery mix。

Tips: 经验证,通过重复补加Accell siRNA,HeLa细胞可持续沉默30天(传9代),SH-
SY5Y可持续沉默20天(传5代)

4.Accell siRNA不会引起炎症反应
较传统脂质体转染方式而言,Accell siRNA基本不会引起先天性免疫应答,RNAi作用
温和,对细胞生理基本无影响。


5.Accell技术与传统脂质体介导技术兼容
为了测试Accell siRNA的长时效基因沉默是否与脂质体介导的siRNA转染相兼容,持
续用Accell PPIB siRNA作用HeLa细胞10天后,再用Dharmacon™ siGENOME™ (未修饰) siRNA GAPDH和Dharmacon™ DharmaFECT™ 1转染试剂进行传统脂质体方式转染,每个基因的总敲除率为80%或更高 (第13天) 。这表明Accell siRNA在实验设计方面的灵活性,Accell siRNA与脂质体介导递送技术结合可实现多基因沉默。

6.特殊化学性修饰增加稳定性,提升转染效率
7.可减少非特异性递送效果,最大程度降低基因沉默中的脱靶效率
…………(更多强大功能等您来询!)

综上,Accell siRNA这些基本属性极大地拓宽了您使用RNAi 研究生物问题和细胞类型的范围。克服了传统意义上难转染细胞的技术漏洞,节省了构建病毒载体、包装病毒颗粒的高额成本,大大节约您宝贵的实验时间。
如果您正在为RNAi效果不好而苦恼,如果您的细胞恰巧是难转染细胞,如果您尝试了多种转染试剂仍不能成功递送siRNA,那么,赶紧联系您身边的优宁维销售咨询Accell siRNA吧~
Dharmacon Accell siRNA涵盖人、小鼠、大鼠全基因组的产品,您只需要把您想要研究的基因ID或名称提供给我们,就可轻松帮您解决RNAi实验难题!

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