双荧光自噬病毒加CQ1，让自噬流无所遁形

在荧光显微镜下采用RFP-GFP-LC3融合蛋白来示踪自噬流早已成为检测自噬流的通用方法。它的原理是绿色荧光蛋白对酸性环境敏感，一旦自噬体与溶酶体融合成自噬溶酶体，绿色荧光在酸性环境下不发光，而红光则稳定发光，因此通过颜色变化就可以区分自噬体与自噬溶酶体。

虽然利用双荧光标记蛋白克服了自噬流难以观察的局限性，但此方法需要摸索合适的时间点，并对每组细胞拍摄大量图片予以统计。强烈推荐大家将stub-RFP-sens-GFP-LC3病毒与CQ1相搭配，从而实现高通量的自噬相关基因筛选或是药筛。

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 不同细胞都适用 

病毒载体可以高效感染各种细胞，且载体带有puro抗性，可筛选稳定株。以SKOV3为例。

自噬未发生：LC3蛋白弥散在细胞内，没有明显的自噬点

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 自噬前中后时期全面监测 

自噬流是一个动态的过程，高通量的荧光成像分析系统可以在不同时间点对活细胞进行拍照分析。

自噬前期：自噬体逐渐增多，红色荧光绿色荧光均发光，呈现黄色点

自噬后期：自噬体与溶酶体融合，绿色荧光衰减，红色点增多

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 分析客观准确快速 

CQ1以相同条件对实验组细胞及对照组细胞的全部图片进行分析统计，并给出平均值，保证结果的客观准确。30分钟就可实现对96孔板的拍摄统计。