随着我国水产养殖业的不断发展，高密度养殖、大量投喂人工全价饲料带来的养殖水体富营养化现象越来越普遍，所谓“调水、解毒”的概念越来越被水产养殖业者接受，经常有水产养殖业者询问我们该如何“调水、解毒”。 上期回顾 全是干货！养殖水体怎样“调水、解毒”？4.如何科学的进行养殖水体日常水质调节 4.3.维持整个水体微生态系统结构上的多样性、功能上的稳定性是保持良好水质和底质的基础！科学使用水产微生态制剂，是水产养殖业者日常“调水、解毒”的重要工作。 微生物是地球上最基础的生产者和分解者。任何物质在自然界的转化都离不开我们肉眼无法看到，却无处不在、种类繁多、功能各异的微生物。 在水产养殖水体科学补充水产微生态制剂，常用的有乳酸菌群及代谢产物、芽孢杆菌、光合细菌等类别，目的是使养殖水体中微生态系统更加完善和健康，水体自净能力得以应付不断增加的外来物质，使水体物质转移保持正常速度，减少有毒物质的累积。 5.怎样科学的使用乳酸菌制剂？
乳酸菌是一类能利用可发酵碳水化合物（如糖类），主要产物为乳酸的无芽孢、兼性厌氧革兰氏染色阳性细菌的总称。绝大部分品种广泛存在于动物体的消化道内。目前，水产养殖业中使用乳酸菌产品泼洒在水体外环境中的量远大于拌料内服的量。常用菌种包括：嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌、植物乳杆菌、双歧杆菌等。根据农业部2045号公告（2013），准许多种乳酸菌以饲料添加剂的方式使用于养殖动物。 目前水产投入品市场上乳酸菌制剂产品质量良莠不齐，某些液态乳酸菌制剂产品说明书标称其包装内含有在自然界中有相互竞争、相互抑制关系的多种不同类型活菌品种，有些产品说明书标称的活菌含量高的离谱，这些违背基础原理，随意标注所含品种及活菌含量的产品随处可见，对水产养殖业者科学使用水产微生态制剂调节水质造成了极大困扰。无论是液态、膏状或固态（粉剂、压片或压块）乳酸菌制剂产品，随着产品存放时间的延长、环境条件的变化、包装物内培养基不断的消耗，产品活菌数都会出现一定程度的、甚至是明显的快速下降。 恒温动物的肠道环境非常适宜乳酸菌群生存，人们经常食用的酸奶含有大量的乳酸菌活菌，用于补充有益肠道微生物，酸奶在低温状态下，通常保质期都不超过60天。水体中泼洒乳酸菌制剂后，乳酸菌活菌在短期内因水体环境不利、营养缺乏等原因逐渐死亡，真正在水体中起主要作用的是乳酸菌在发酵过程中产生的代谢产物。某些生产企业在产品说明书上标称其产品配合红糖一起泼洒，只是为水体同时提供了碳源，并不能在水体中培养出大量的目标乳酸菌群。
即便是购买到纯的菌种和定向培养基，水产养殖业者自行简易扩培过程中由于培养基不能彻底灭菌（121℃下处理30分钟），环境条件无法达到要求，扩培时基本都有大量杂菌感染，极易出现菌液发臭现象，标志着扩培失败，所以我们不建议水产养殖业者自行扩培。
乳酸菌代谢产物泼洒于养殖水体后能为土著微生物菌群提供营养源，促进土著微生物菌群发挥基础生产者和分解者的作用。通常在养殖水体使用乳酸菌制剂24小时内，肉眼可见水体变肥、水色变浓，早餐投喂时养殖对象食欲明显增强等调节水质的作用。优质乳酸菌活菌适量内服后，菌体在动物体消化道内产生乳酸、抗菌肽等物质抑制消化道内病原微生物的生长，同时能提高饲料消化吸收率、降低饲料系数，减少肠道疾病的发生机率。 浮游植物也可以直接利用乳酸菌代谢产物中多种营养因子，为了最大限度的利用光照使浮游植物发挥作用，在养殖对象活动正常、没有藻类水华现象的前提下，我们建议在天亮后尽早均匀泼洒乳酸菌制剂。 水花或寸片池塘，在苗种下塘前5-7天使用，可以培育出大量适合苗种摄食的天然饵料——轮虫。 一般情况下，液态的乳酸菌制剂酸碱度在3.8左右，具有发酵的酸香味，养殖水体泼洒使用正常剂量后不会造成水体酸碱度的明显下降，使用后由于水体藻类种群数量增加，水体酸碱度的动态变化幅度可能相对扩大。 我们建议水产养殖业者在精养池塘食场水域，根据食场水体大小，每天泼洒适量的乳酸菌制剂，这样能促进食场水域有足够数量的微生物“工人”及时、快速的处理食物残渣和养殖动物排泄物。同时，根据水质监测结果，定期或不定期全池泼洒乳酸菌制剂以培养更多的微生物“工人”。 使用微生物制剂前后三天内尽量不要使用消毒剂和杀虫剂！ 6.怎样科学的使用芽孢杆菌制剂？
芽孢杆菌是革兰氏阳性菌，能在营养缺乏、环境不适宜的情况下在一定时间内形成芽孢休眠体的兼性好氧性杆状细菌。每一个细菌只能形成一个芽孢休眠体，每一个芽孢休眠体萌发后也只能产生一个营养体。在缺氧或者无氧但有营养源和水分等必要条件下，芽孢杆菌的营养体也能存活，但代谢缓慢，净水功能大幅减弱。 芽孢的休眠能力很强，一般条件下可以存活几年甚至几十年。芽孢对热、干燥、紫外线、化学物质和静水压力等有很强的抗性，在121℃时，需要10-30分钟才能杀死。休眠体萌发的基本条件是适宜的温度、湿度及充足的营养源，萌发所需的时间视环境条件适宜度、不同品种等因素长短不一。 常用的芽孢杆菌包括：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌、凝结芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌等品种。根据农业部2045号公告（2013），准许将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌、凝结芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌以饲料添加剂的方式使用于养殖动物。一定量的芽孢杆菌拌料投喂能有效的降低饲料系数，还能起到减少肠道疾病发病率等功效。目前在水产养殖业中更多的是将芽孢杆菌泼洒于养殖水体，分解水体中养殖对象的排泄物、残饵、死亡的生物体等各种有机质。总的来说，芽孢杆菌具有强大的胞外酶系，能分解淀粉、蛋白质等大分子有机物，因此有净水作用。 芽孢杆菌休眠体在水分充足、有营养源、有氧、合适的温度等环境条件适宜的情况下下萌发成为营养体，在萌发过程中和成为营养体之后都需要消耗一定量的氧气。在正常情况下，养殖水体中使用芽孢杆菌制剂前后，水体溶解氧含量并未出现一定幅度的明显降低，这是因为水体中浮游植物光合作用不断生产的氧气量足以抵消芽孢杆菌休眠体萌发时在短时间内消耗掉的氧气量，更能满足芽孢营养体分解有机质所需消耗的氧气。若在阴雨天气使用或者过量使用芽孢杆菌，需要注意打开增氧机或泼洒增氧剂提高水体溶氧。
芽孢杆菌是一种严格的好氧微生物，其生长需要大量的持续的氧气供应。同时因扩培芽孢杆菌的过程中无菌条件达不到要求，使得扩培过程中非常容易感染杂菌，所以即便是购买到纯的菌种和定向培养基，水产养殖业者自行扩培过程中由于溶氧不足、环境条件无法达到要求，扩培得到的产物中基本都有大量的杂菌，有时还会有大量的霉菌滋生，所以我们不建议水产养殖业者自行扩培。
许多芽孢杆菌制剂的生产厂家在说明书上要求使用者要先活化芽孢后再泼洒于水体。活化的目的是激活包装物内芽孢休眠体使之萌发成为营养体甚至尽可能获得更多数量的营养体。但是，请使用者慎重考虑实际活化条件是否具备！活化芽孢杆菌需要保证活化过程中具备持续充足的氧气供应，菌体萌发后所需要的足量的营养物质，合适的温度、湿度和足够的空间，同时还要根据芽孢杆菌制剂的不同含量来精准的控制活化时间（如长时间、高浓度活化，可能会导致菌体萌发后生存条件恶劣而死亡）。而水产养殖业者无法判断不同生产企业生产的芽孢杆菌制剂的真实含量，也不具备同时提供这些非常专业、细致和苛刻的活化条件，因此我们不建议水产养殖业者预先活化芽孢杆菌制剂，直接用池水稀释均匀后立即泼洒即可。
如何判断养殖水体需要使用芽孢杆菌制剂？无风时用白色水桶在池塘任意点取表层水静置15-30分钟，如桶底出现一层明显沉淀物时；使用显微镜镜检新鲜水样时观察到较多的有机碎屑时；使用水样采集器取底层水目视有明显沉淀物时；建议全池均匀泼洒芽孢杆菌制剂。 一般来说，水温达到15摄氏度或以上，无论晴雨，只要早8时前测得池塘食场底层水和池塘最深处底层水的溶解氧含量都达到或超过4mg/L，且近三天未出现浮头和暗浮头现象，就可以大胆使用芽孢杆菌制剂，无需担心使用后导致水体缺氧。 按含芽孢杆菌100亿个/克的产品计算，100克产品用于667立方米养殖水体，直接用水稀释后立即均匀泼洒。可以在泼洒粪肥等有机肥的同时混合泼洒芽孢杆菌制剂以提高肥效。建议在11时左右泼洒，此时藻类光合作用使得水体溶解氧明显上升，足够提供芽孢萌发时需要消耗的氧气。我们建议泼洒芽孢杆菌后开动增氧机，尽量使菌体在水体中均匀分布。在夏季大风大雨导致沉积于底部的有机质上翻后天气转晴、水体不缺氧、养殖对象活动正常的状态下，更是使用芽孢杆菌等微生物制剂快速分解有机质的好时机。 另外，我们建议水产养殖业者在精养池塘食场，根据食场水体大小，每天泼洒适量的芽孢杆菌制剂，这样能促进食场水域有足够数量的微生物“工人”及时、快速的处理食物残渣和养殖动物排泄物。同时，根据水质监测结果，定期或不定期全池泼洒芽孢杆菌制剂以培养更多的微生物“工人”。 使用微生物制剂前后三天内尽量不要使用消毒剂和杀虫剂！ 7.怎样科学的使用光合细菌制剂？
从微生物学的角度上讲，光合细菌（简称PSB）是一大类能进行光合作用的原核生物的总称，分为产氧光合细菌和不产氧光合细菌两大类。产氧光合细菌主要是蓝细菌，或称之为蓝藻和原绿藻，在分类上属于藻类。 这里所说的光合细菌是能在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用的原核生物。分为4个科：红螺菌科、着色菌科、绿菌科和绿曲菌科。 目前，水产投入品市场上常见的光合细菌制剂有液态、冻干粉等剂型。相对而言，液体制剂较容易大量培养和批量生产，且培养物的活性较强，光合细菌的代谢物含量丰富，应用效果也较好，目前在各剂型中是使用量最大的一种。 在水产养殖中运用的光合细菌主要是光能异养型、红螺菌科中的一些品种，我们主要介绍其中的代表性品种——沼泽红假单胞菌。根据农业部2045号公告（2013），准许沼泽红假单胞菌以饲料添加剂的方式使用于养殖动物。 沼泽红假单胞菌属革兰氏染色阴性菌，是兼性厌氧菌，以小分子有机物、二氧化碳等作碳源，以氨、铵盐、硝酸盐或亚硝酸盐作氮源，生长的适宜水温15—40℃,最适水温为30—36℃。菌体蛋白质含量高，并含有大量促进鱼虾生长的活性因子，如生物素、维生素、β-类胡萝卜素等，可明显促进养殖生物的生长发育，缩短养殖周期。沼泽红假单胞菌具有适应性强、能耐受高浓度有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力。沼泽红假单胞菌能大量利用水中某些蓝藻门的尤其是铜绿微囊藻等单细胞藻类需要的营养物质，和蓝藻形成生物竞争，在蓝藻水华产生前维持一定频率的、适量的使用，能一定程度的抑制蓝藻数量，预防蓝藻水华的产生。当蓝藻水华产生后，再泼洒沼泽红假单胞菌，不能明显抑制蓝藻水华。 沼泽红假单胞菌菌液有刺鼻的“尿骚味”，一般呈现近紫红色，在包装箱内无光条件下存放一段时间后，会出现上层清液、瓶底有明显红色沉淀物的分层现象，持续剧烈摇动后放置于阳光下一段时间能再次恢复菌体的上下均匀分布，此为活菌质量较好的标志，如图1所示。
图1 长期无光条件存放导致活菌沉淀于瓶底（中）
沼泽红假单胞菌是水产养殖业者购买菌种及定向培养基后，能利用自来水或井水做溶剂，分装在透明塑料瓶或塑料袋里，简易扩培制作成品菌液。这样制作的菌液虽然可能有数量级不同的杂菌，但仍然是可以培育出相当数量极的有效菌的，基本不影响使用效果。
建议在天亮后尽早全池泼洒沼泽红假单胞菌制剂，以利菌体最大限度的利用光照，充分发挥其功能。使用于养殖水体时，按含沼泽红假单胞菌10亿个/ml的产品计算，700mL用于1亩水面（不计水深）；用水稀释后均匀泼洒。可以在泼洒粪肥等有机肥的同时混合泼洒沼泽红假单胞菌制剂以提高肥效。 一般来说，水温达到15摄氏度或以上，天气晴朗时使用能发挥出最佳效果，阴雨天也可以使用。水体过肥、早中晚水色无明显变化的水体、底层水有腥臭味的水体、出现藻类水华早期症状的水体，建议视情况加量使用或隔天连续使用沼泽红假单胞菌制剂。 另外，我们建议水产养殖业者在精养池塘食场，根据食场水体大小，不定期泼洒适量的沼泽红假单胞菌制剂，这样能促进食场水域有足够数量的微生物“工人”及时、快速的处理食物残渣和养殖动物排泄物。同时，根据水质监测结果，定期或不定期全池泼洒沼泽红假单胞菌制剂以培养更多的微生物“工人”。 使用微生物制剂前后三天内尽量不要使用消毒剂和杀虫剂！ 8.怎样科学的使用丁酸梭菌制剂？
丁酸梭菌是一种专性厌氧革兰氏阳性芽孢杆菌，周身有鞭毛，能运动。能够发酵糖类等碳水化合物产酸，并产生淀粉酶，能水解淀粉但不水解纤维素和明胶。水解淀粉和糖类的最终代谢产物为丁酸、醋酸和乳酸和少量的丙酸、甲酸。 丁酸梭菌目前主要作为饲料添加剂使用，可促进动物肠道有益菌群（主要是乳酸菌）的增殖和发育，抑制肠道内有害菌和腐败菌的生长和繁殖，降低饲料系数，间接减少养殖对象排泄物对水环境的污染；丁酸梭菌能在动物肠道内产生B族维生素、维生素K、淀粉酶等物质，具有肠道保健作用；丁酸梭菌的主要代谢产物丁酸是参与动物肠道上皮组织细胞再生和修复的重要物质；丁酸梭菌对青霉素、氨苄西林、链霉素、庆大霉素、妥布霉素、氯霉素等多种饲用抗生素有较强的耐受性,可配伍使用，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康方面有着重要的意义。 丁酸梭菌产生内生芽孢，耐热耐酸，在动物消化道内不受胃酸、胆汁酸等消化液的影响，因而具备高活性；丁酸梭菌营养体形成芽孢休眠体后经喷雾干燥成粉剂，在常温下可保存一年以上，菌数下降缓慢，保存性能低于好氧芽孢杆菌。 液态或膏状丁酸梭菌制剂产品，随着产品存放时间的延长、环境条件的变化、包装物内培养基不断的消耗，包装物内活菌数都会出现明显的快速下降。目前水产投入品市场上丁酸梭菌制剂产品质量良莠不齐，某些液态丁酸梭菌制剂产品说明书标称其包装内含有在自然界中有相互竞争、相互抑制关系的多种不同类型活菌品种，有些丁酸梭菌制剂产品说明书标称的活菌含量高的离谱，这些违背基础原理，随意标注所含品种及活菌含量的产品随处可见，对水产养殖业者科学使用水产微生态制剂造成了极大困扰。 在水体中泼洒含有一定量活菌的丁酸梭菌制剂后，丁酸梭菌活菌在富氧的环境中迅速死亡。水体中某些土著微生物可以吸收利用丁酸梭菌的代谢产物，因此，在水体中泼洒丁酸梭菌制剂能起一定程度的肥水作用。
丁酸梭菌是一种专性厌氧微生物，其生长繁殖需要在完全无氧的条件下进行，扩培丁酸梭菌的过程中对无氧无菌条件要求相当严格。所以水产养殖业者即便是购买到纯的菌种和定向培养基，自行扩培过程中由于培养基无法彻底灭菌、环境条件无法达到扩培要求，扩培得到的产物中基本都有大量的杂菌，所以我们不建议水产养殖业者自行扩培。
优质丁酸梭菌活菌制剂适量拌料内服后，可以促进水生动物肠道健康，增强机体免疫力，降低饲料系数，一定程度上减少水生动物排泄物的排放量。由于我们养殖的水生动物品种繁多，针对不同养殖对象使用丁酸梭菌活菌内服的具体用量尚在不断研究中。 丁酸梭菌制剂泼洒到养殖水体中起的作用和在养殖水体中泼洒乳酸菌制剂所起的作用大致相同，养殖水体泼洒一定剂量的丁酸梭菌代谢产物制剂后不会造成水体酸碱度的明显变化。从使用成本的角度考量，我们不建议在养殖水体中泼洒丁酸梭菌制剂。 9.酵母菌在水产养殖业的运用 酵母菌是一种真菌，广泛分布于自然界，是异养兼性厌氧微生物，在有氧的情况下，它把糖分解成二氧化碳和水，在缺氧的情况下，酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。 根据农业部2045号公告（2013），准许酿酒酵母和产朊假丝酵母以饲料添加剂的方式使用于养殖动物。目前，酵母菌主要作为畜禽养殖动物的饲料添加剂。酵母菌也可以用于水产养殖动物，主要是饲料添加，补充蛋白质、B族维生素和酵母细胞壁多糖成分。 还有红法夫酵母作为着色剂可以用于水产养殖动物。 10.硝化细菌、反硝化细菌在水产养殖业的运用 硝化细菌和反硝化细菌是广泛存在于自然界的微生物，养殖水体中并不缺乏。在富氧条件下硝化细菌等微生物将水体和土壤（底泥）中氨转化成亚硝酸盐，再将亚硝酸盐转化成硝酸盐。亚硝酸盐不能被藻类或高等植物直接利用，而硝酸盐能被藻类或高等植物吸收利用，进而转化为氮气释放到空气中，从而完成水体中氮元素的转移和循环。反硝化细菌能在无氧的条件下将硝酸盐转化成为亚硝酸盐，而养殖水体在富氧的条件下几乎不发生反硝化作用，因此，保持养殖水体各水层尤其是底层水的高溶解氧值是养殖成功的核心基础！ 硝化细菌活菌需要持续消耗氧气，因此很难在密封的包装物内长期存活，一般保质期极短。我们建议，水产养殖业者无需额外补充硝化细菌或反硝化细菌到水体中，只需维持养殖水体持续的高溶氧保证水体中原本就大量存在的硝化细菌和反硝化细菌在富氧的条件下发挥其功能。 （未完待续） 作者简介
周鑫军
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