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有头吴脑说行为:不同药剂对小鼠Morris水迷宫实验的影响

 有头吴脑说行为 2022-05-19 发布于上海

1材料和方法

1.1实验动物 

健康雄性昆明种小鼠70只,体质量(25±2)g。所有小鼠先在实验室适应2d,确定其活动、进食均无异常后用于实验

1.2试剂与仪器:

氢溴酸东莨菪碱;亚硝酸钠;无水乙醇。Morris 水迷宫和visutrack动物行为分析软件(上海欣软)。

1.3 Morris水迷宫的方法

Morris水迷宫实验:30只小鼠按照随机数字表法随机分为三组,空白组10只,东莨菪碱组10只,乙醇组10只,Morris水迷宫实验包括定航实验和主动探索实验。前4d为定航实验,每天训练4次,每次从不同的入水点将小鼠面向池壁放入水池。水面高出平台1cm,水中加入适量墨汁,使小鼠看不到平台,温度维持在22~24℃。测试时间为90s,在平台上停留超过2s即为寻台成功。每次测试前小鼠在平台上有10s的前适应,测试完毕无论成功与否还有10s的后适应。小鼠从入水到寻台成功所需时间记作逃避潜伏期,寻台失败则逃避潜伏期记作90s,每一天训练4次结果的平均值作为当天训练的总结果。第5天为探索实验,撤去平台,选择平台所在象限对角象限作为入水点,记录90s内小鼠的穿台次数。

图1 水迷宫的基本构造

1.4Morris水迷宫实验模型建立

①记忆获得障碍模型在动物进行定航和主动探索实验之前15~20min,给动物腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(胆碱能M受体拮抗剂,1mg/kg).②记忆再现障碍模型于动物下次测试之前15min给小鼠灌服乙醇(35%,0.1mL/10g体质量),15min后进行重测试。主要观察指标:避暗实验中的避暗潜伏期、避暗错误次数、小鼠将头部及前爪全部伸入洞口的次数(简称探头次数);Morris水迷宫实验中的每次训练定位航行逃避潜伏期的时间和主动探索穿越平台的次数。

水迷宫实验仪器 型号XR-XM101 上海欣软

2 Morris水迷宫实验结果

2.1定位航行实验结果

由图3可知,与空白对照组比较,随着时间的延长,东莨菪碱模型组小鼠每日定航实验中逃避潜伏期均显著延长(P<0.05或P<0.01),乙醇模型组小鼠逃避潜伏期也延长,但无明显差异。

图3 东莨菪碱模型和乙醇模型小鼠逃避潜伏期时间比较

由图4可知,东莨菪碱模型组小鼠每日定航实验中总路程仍明显增多(P<0.05或P<0.01),乙醇模型组与空白组相比无明显差异。

图4 东莨菪碱模型和乙醇模型小鼠定位航行总路程比较

2.2主动探索实验结果

训练结束后,第5d为主动探索实验,撤去平台,选择平台所在象限对角象限作为入水点,记录90s内大鼠的穿台次数。由图5可见,东莨菪碱模型组穿越平台的次数较空白组明显减少(P<0.05),具有统计学意义。乙醇模型组与空白对照组相比无明显变化。

图5 东莨菪碱模型和乙醇模型小鼠主动探索次数比较

3讨论

Morris水迷宫是一种经典的学习记忆功能评价方法,定航实验和探索实验分别反映了动物的空间学习能力和空间记忆能力。本实验的定位航行和主动探索实验结果显示:东莨菪碱小鼠模型组定位航行逃避潜伏期明显延长而主动探索穿越平台的次数明显减少(p<0.01或p<0.05),乙醇模型组无明显差异(p>0.05)。提示东莨菪碱能够造成空间学习记忆障碍模型,而乙醇组不能作为空间学习记忆障碍模型的造模药物。

综上所述,本文综合比较了三种不同药物建立的学习记忆障碍模型,对其形成记忆损伤的持续时间和用药剂量进行摸索和比较,成功建立了有效的小鼠学习记忆障碍模型,在恰当的时间进行药物干预,从而更好地评价改善学习记忆障碍新药的效果。

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