【EASL2022速递】乙肝新药AB-729研究进展汇总

编者按：2022年第57届欧洲肝脏研究协会（EASL）年会-国际肝脏大会（ILC 2022）于2022年6月22-26日在英国伦敦举行。会议期间披露了多项乙肝新药研究进展，肝霖君精选其中的重要进展与大家分享。

AB-729由Arbutus Biopharma公司开发，齐鲁制药获得大中华地区的开发和商业化权。它是一种靶向肝细胞的RNAi类药物，使用了Arbutus公司新型共价偶联N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）递送技术，可供皮下注射。

目前AB-729正处于II期临床研究阶段。在EASL 2022上公布的多项研究结果共同揭示了AB-729能较好地抑制HBsAg和HBV DNA，并探讨了AB-729抑制病毒活性的可能作用机制及应答更佳的人群类型。从目前结果来看，AB-729对HBsAg抑制作用的持久性并不是太足，应该仍然无法避免停药后的复发问题，因此有望作为未来乙肝治愈联合治疗策略的基石药物。

研究一

AB-729停药后对HBsAg抑制的持久性

研究方法

AB-729治疗慢乙肝的II期临床研究正在进行中。在AB-729-001第3部分，41例非肝硬化慢乙肝受试者接受AB-729 60 mg每4周一次（Q4W，队列E，N = 7 ），60 mg每8周一次（Q8W，队列F，N = 7)，90 mg每8周一次 [Q8W，队列I（N = 6）、G（N = 7）和K（N = 7）]，或90 mg每12周一次（Q12W，队列J, N = 7）。队列G为HBV DNA阳性，从第1天开始TDF治疗；其他队列均已通过NA治疗获得病毒学抑制。队列K基线均为HBeAg阳性。符合条件的受试者可以继续使用AB-729治疗直至第48周。AB-729停药后对受试者进行48周或更长时间的随访。

研究结果

40/41例符合条件的受试者同意延长治疗。本次报道了队列E和F的完整治疗数据：在末次给药后的第32周和第36周，队列E和F平均HBsAg变化为−1.0 log₁₀或更多，4/11受试者HBsAg保持< 100 IU/mL。队列E中的一例受试者在停用AB-729并维持NA治疗时发生HBsAg血清学转换。

90 mg组即队列I、J、K和G的平均HBsAg下降情况相似。在队列I、J和G中，12/17受试者第48周HBsAg水平< 100 IU/mL, 其中6人HBsAg< 10 IU/mL。在末次给药后20周，11/18受试者HBsAg水平< 100 IU/mL，其中3人HBsAg < 10 IU/mL。队列K在第32周HBeAg的平均（SE）变化为−0.71（0.44）log₁₀。

没有因AEs导致的死亡或停药。有2例无关的SAE，所有其他AEs均为1级或2级。

   

研究结论

AB-729重复给药总体上安全且耐受性良好，HBsAg的持续下降在不同治疗方案中具有可比性。基线HBeAg状态和HBV DNA阳性均不影响应答。所有队列已有数据中，17/31受试者末次给药AB-729后HBsAg水平< 100 IU/mL，并维持至少20周。以上数据支持继续评估AB-729联合治疗慢乙肝的疗效。

研究二

AB-729停药后对病毒标志物的抑制作用

研究方法

AB-729目前处于与其他抗病毒药物联合治疗慢乙肝的II期研究阶段。AB-729-001研究评估了AB-729联合NA治疗48周的临床效果。参与AB-729-001研究的受试者每4周（Q4W）、8周（Q8W）或12周（Q12W）服用60或90 mg AB-729，持续48周。评估末次给药后至少24周是否可停止NA治疗。停药标准包括ALT < 2 × ULN、HBeAg阴性、HBV DNA检测不到、两项单独测试HBsAg均< 100 IU/mL。NA停药后每2-4周评估一次安全性和PD，包括HBV DNA、HBsAg、HBV RNA以及HBcrAg。

研究结果

目前，AB-729-001研究中的27例受试者在末次给药AB-729后完成了至少24周的随访。其中，7例符合NA停药的所有标准，5/7受试者同意停止所有治疗。NA停药受试者的平均年龄为45岁（33-59），3/5为女性，4/5为亚洲人。1例受试者在队列E（60 mg Q4W），3例在队列F（60 mg Q8W），1例在队列I（90 mg Q8W）。其中3例服用ETV，2例服用TDF。进入研究时，所有受试者均为HBeAg阴性，平均HBsAg 水平为2886.8 IU/mL（1392-6765），HBcrAg在3.0-4.2 log₁₀ U/mL之间。在NA停药前的最后一次随访（AB-729末次给药后至少24周），平均HBsAg 水平为30.49 IU/mL（范围3.95-69.1），HBcrAg在3.0-4.5 log₁₀ U/mL之间。

到目前为止，5例受试者完成了NA停药后4-16周随访，无临床或病毒学复发。未报道AEs，未观察到ALT升高。3例受试者HBV DNA水平保持< LLOQ，2例受试者HBV DNA水平短暂上升到30或40 IU/mL，随后无干预下降。

   

研究结论

AB-729治疗使HBsAg下降至< 100 IU/mL后停止NA治疗具有良好的耐受性，可较持续抑制HBV DNA和HBsAg，无早期临床或病毒学复发证据。已经NA停药以及未来可能NA停药的受试者在NA停药后将接受至少48周的随访，以评估持续的病毒学应答。

研究三

AB-729对HBsAg的抑制作用依赖于RNA诱导沉默复合体水平

研究方法

AAV-HBV小鼠接受单剂量的非HBV靶向GalNAc siRNA或HBV靶向GalNAc siRNA（HBV-siRNA，AB-729）（1或3 mg/kg, n = 8），通过化学发光免疫分析法、Ago2免疫沉淀法和茎环定量逆转录聚合酶链式反应评估这些小鼠的血清、血浆和肝脏样本中的HBsAg、总siRNA以及siRNA装配的RNA诱导沉默复合体（RISC）水平。

研究结果

单次注射1和3 mg/kg AB-729后，血清HBsAg出现剂量依赖性下降，在第14天平均最大降幅分别为0.9 log₁₀和1.9 log₁₀。

HBsAg下降的动力学与肝内总AB-729浓度无关，AB-729在给药后4小时达到峰值并随时间的推移迅速下降。相反，最大HBsAg降幅与RISC装载复合体数量的增加相一致。在第14天后观察到RISC装载复合体数量下降，反映了HBsAg水平的反弹。在单次注射AB-729 112天后，HBsAg恢复到基线水平，这与仅检测到微量RISC装载复合体有关。 

研究结论

在慢乙肝患者中，AB-729介导HBsAg抑制的作用机制尚未评估。本研究的临床前数据显示，HBsAg降低与siRNA装配的RISC的药代动力学一致。通过RNA干扰介导的直接抗病毒活性可能是AB-729抑制HBsAg的关键驱动因素。

研究四

HBV DNA阳性慢乙肝患者对AB-729治疗有更强的免疫应答

研究方法

5例未接受NA治疗（HBV DNA+）的慢乙肝受试者与6例接受NA治疗达病毒学抑制（HBV DNA-）的慢乙肝受试者均给予单剂量90 mg AB-729治疗，使用多重Luminex测定法评估两组患者纵向血浆样本中的细胞因子和其他可溶性免疫生物标志物。

研究结果

单剂量AB-729治疗后，全部 HBV DNA+受试者在IFNγ、CXCL1、IP-10、sBTLA、sLAG3、sTLR2、sGITRL、sPD-1、sCTLA4、sPD-L1、sICOS、sCD80、sCD86检测中至少有一项剂量水平较基线短暂升高2-38倍；3/6 HBV DNA-受试者在IFNγ、IL-17a、CXCL9、CXCL13和CD163检测中至少有一项剂量水平较基线短暂升高2-7倍。在HBV DNA+受试者中，IFNγ（4/5）和CXCL1（3/5）的短暂升高与给药后12周内ALT短暂升高有关。相比之下，在HBV DNA-受试者中，只有1/6受试者的ALT升高伴随着IFNγ升高。所有的ALT升高都是轻微的（1级），无肝脏不良反应指标。

研究结论

本研究是第一个比较HBV DNA阳性和阴性慢乙肝受试者接受GalNAc-siRNA治疗后HBsAg降低的免疫应答的数据。结果表明，在AB-729给药后，HBV DNA+受试者比HBV DNA-受试者有更广泛的以IFNγ和T细胞激活为特征的细胞因子和可溶性免疫生物标志物应答。在HBV DNA+患者中也观察到检查点相关标志物的短暂升高，并伴有轻微的ALT升高。表明HBV DNA+慢乙肝患者在使用AB-729后有更强的免疫应答。目前正在评估AB-729对HBV DNA+受试者重复给药并联合NA治疗的疗效。

研究五

AB-729治疗慢乙肝患者的HBsAg降低与T细胞活化和CD8 T细胞耗竭减少有关

研究方法

慢乙肝受试者每4周或每8周重复给药AB-729 60 mg直至48周，随访12周。采用Luminex、IFN γ T细胞荧光斑、流式细胞术免疫表型分析和基于胸苷的T细胞增殖试验评估受试者的纵向血浆和外周血单个核细胞（PBMC）样本（Q4W, PBMC：n = 5; 血浆：n = 6）（Q8W, PBMC：n = 2; 血浆：n = 7）。

研究结果

治疗结束时，5/5接受AB-729 Q4W治疗的受试者显示IFNγ诱导的HBV特异性T细胞增加。3/5受试者在16-28周显示IFNγ-HBV特异性T细胞增加，这与HBsAg应答的平台期、轻度至中度ALT升高（1-2级）相一致，并在此之前已有T细胞增殖。2/5的受试者在治疗结束时或12周随访期均有IFNγ-HBV特异性T细胞显著增加。接受AB-729 Q8W治疗的两例受试者也观察到IFNγ-HBV特异性T细胞增加。

从第28周开始观察到CD8 T细胞耗竭的下降，其在治疗结束时和8-12周随访期都有出现（AB-729 Q4W队列; 4/6受试者）。CD8 T细胞耗竭的下降与HBsAg应答的平台期相一致。

41个血浆细胞因子/趋化因子水平未观察到显著升高。AB-729 Q4W队列观察到sBTLA、sCD86、sCTLA-4、sPD-1的轻度升高，AB-729 Q8W队列观察到sBTLA、sGITR、sCTLA-4轻度升高。两队列均未发现与肝脏不良事件相关的安全指标。

   

研究结论

每4周或8周重复剂量AB-729治疗可使HBsAg减少，伴有HBV特异性T细胞的活化和增殖，同时ALT轻度至中度升高。在治疗结束和8-12周随访时，CD8 T细胞耗竭的下降提示HBV特异性T细胞免疫恢复可能是持久的。

   肝霖君有话说

目前披露的多项研究结果显示，AB-729可通过RISC装载复合体水平、细胞因子增加、T细胞增殖活化以及T细胞免疫恢复等多种途径介导HBsAg的抑制，且对于HBV DNA阳性患者的免疫作用更为强烈，虽然文章提到AB-729抑制HBsAg的持久性较好，但我们看到在随访20周时HBsAg已经有回升趋势，且在机制研究时的小鼠模型中也发现了HBsAg的反弹现象，还需要更长的随访数据来判断，因为靶向HBV生命周期的药物的主要问题就是停药复发的问题。

该项研究没有以HBsAg清除作为主要疗效指标，但从目前的疗效结果来看，AB-729有望成为未来联合其他病毒抑制或免疫调节类药物来治愈慢乙肝的基石药物。

   参考文献：（可上下滑动查看）

[1] Man FY, Elina B, Wattana S, et al. Long-term suppression maintained after cessation of AB-729 treatment and comparable on-treatment response observed in HBeAg+ subjects. EASL2022. Abstract (SAT443).

[2] Man FY, Simone S, Wattana S, et al. Continued suppression of viral markers observed following discontinuation of nucleos(t) ide analogue therapy in chronic hepatitis B subjects with low hepatitis B surface antigen levels after 48 weeks of treatment with AB-729. EASL2022. Abstract (SAT448).

[3] Emily PT, Maria S, Ingrid G, et al. Pharmacodynamics of durable HBsAg suppression by AB-729 short interfering RNA correlates with pharmacokinetics of RNA-induced silencing complex (RISC) loading within liver. EASL2022. Abstract (SAT395).

[4] Sharie CG, Bhavna P, Christina I, et al. Inhibition of hepatitis B surface antigen by RNA interference therapeutic AB-729 is associated with increased cytokine signatures in HBV DNA+ chronic hepatitis B patients. EASL2022. Abstract (SAT396).

[5] Sharie CG, Bhavna P, Christina I, et al. Reduction of hepatitis B surface antigen mediated by RNA interference therapeutic AB-729 in chronic hepatitis B patients is associated with T cell activation and a decline in exhausted CD8 T cells. EASL2022. Abstract (SAT397).