ZDAY64:中药质量标准和鉴定（四）中药鉴定的内容和方法（三）显微鉴定

     各位好，我是小周，在讲完基原鉴别和性状鉴别之后，我们今天开始讲新的鉴定方法，显微鉴别法。显微鉴别是利用显微技术对中药进行特征分析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定。

知识点：

（一）显微鉴别

       显微鉴别是利用显微技术对中药进行特征分析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定。组织鉴定是通过观察药材的切片或磨片鉴别其组织构造特征，适合于完整的药材或粉末特征相似的同属药材的鉴别；
　　粉末鉴定是通过观察药材的粉末制片或解离片鉴别其细胞分子及内含物的特征，适合于破碎、粉末状药材或中成药的鉴别。进行显微鉴定时，由于鉴定材料的不同（完整、破碎、粉末）和药用种类及药用部位的不同，选择显微鉴定的方法也不同。

1.显微制片方法
（1）横切或纵切片
（2）解离组织片：如需观察细胞的完整形态，尤其是纤维、导管、管胞、石细胞等细胞彼此不易分离的组织，需利用化学试剂使组织中各细胞之间的细胞间质溶解，使细胞分离。
　　如样品中薄壁组织占大部分，木化组织少或分散存在的，可用氢氧化钾法；如样品坚硬，木化组织较多或集成群束的，可用硝铬酸法或氯酸钾法。
（3）表面制片：鉴定叶、花、果实、种子、全草等类药材，可取叶片、萼片、花冠、果皮、种皮制成表面片，加适宜试液，观察各部位的表皮特征。

（4）粉末制片：粉末状药材可选用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他适当试液处理后观察。为了使细胞、组织能观察清楚，需用水合氯醛液装片透化。其透化的目的是溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿体、树脂、挥发油等，并使已收缩的细胞膨胀。
　　透化方法为，取粉末少许，置载玻片上，滴加水合氯醛液适量，在小火焰上微微加热透化，加热时必须续加水合氯醛液至透化清晰为度。为避免放冷后析出水合氯醛结晶，可在透化后滴加稀甘油少许，再加盖玻片。
（5）花粉粒与孢子制片　　

（6）磨片制片：坚硬的矿物药、动物药，可采用磨片法制片。

（7）含饮片粉末的中成药显微制片

2.细胞内含物鉴定和细胞壁性质检査
（1）细胞内含物鉴定
①淀粉粒：加碘试液，显蓝色或紫色；用醋酸甘油试液装片，置偏光显微镜观察，未糊化淀粉粒有偏光现象；已糊化的无偏光现象。
②糊粉粒：加碘试液，显棕色或黄棕色；加硝酸汞试液显砖红色。
③脂肪油、挥发油或树脂：加苏丹Ⅲ试液呈橘红色、红色或紫红色；加90%乙醇，脂肪油不溶解，挥发油则溶解。
④菊糖：加10%α-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，呈紫红色并很快溶解。
⑤黏液：加钌红试液，显红色。
⑥草酸钙结晶：加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡产生；加硫酸溶液（1→2），逐渐溶解，片刻后析出针状硫酸钙结晶。
⑦碳酸钙结晶（钟乳体）：加稀盐酸溶解，同时有气泡产生。
⑧硅质：加硫酸不溶解。

（2）细胞壁性质检查
①木质化细胞壁：加间苯三酚试液1～2滴，稍放置，加盐酸1滴，因木化程度不同，显红色或紫红色。
②木栓化或角质化细胞壁：加苏丹Ⅲ试液，稍放置或微热，呈橘红色至红色。
③纤维素细胞壁：加氯化锌碘试液，或先加碘试液润湿后，稍放置，再加硫酸溶液（33→50）显蓝色或紫色。
④硅质化细胞壁：加硫酸无变化。

3.显微测量
　　观察细胞和后含物时，常需要测量其直径、长短（以微米计算），作为鉴定依据之一。测量可用目镜测微尺进行。
4.偏光镜的应用
　　偏光显微镜主要用于观察和分析矿物类中药的光学性质，用于鉴定矿物类中药。
　　对于透明矿物，一般使用透射光源的偏光显微镜，对于不透明矿物则使用反射光源的偏光显微镜。
　　亦可用于研究动物、植物类中药的组织及细胞内含物，如淀粉粒、草酸钙簇晶等。

练习题：

1.植物类药材显微鉴定时，加10%α-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，显紫红色并溶解的后含物是

A. 糊粉粒

B. 草酸钙结晶

C. 碳酸钙结晶

D. 菊糖

E. 硅质块

2.植物类药材显微鉴定时，加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡发生的后含物是

A. 碳酸钙结晶

B. 硅质块

C. 草酸钙结晶

D. 糊粉粒

E. 淀粉粒

3.检查脂肪油

A. 碘试液

B. 苏丹III试液

C. 二者均可

D. 二者均不可

4. 加间苯三酚试液与盐酸，植物细胞壁显红色，表明该细胞壁

A. 木质化

B. 木栓化

C. 角质化

D. 硅质化

E. 黏液化

答案与解析：

1.D

本题主要考查细胞内含物的鉴定方法。菊糖由果糖分子聚合而成，鉴定多用10%α-萘酚乙醇溶液，再加硫酸呈紫红色并溶解，多含在菊科和桔梗科植物的细胞中（D对）。糊粉粒需要通过碘试液或硝酸汞试液鉴别（A错）。硅质块通过加入硫酸溶液不溶解来鉴别（E错）。

2.C

加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡产生的细胞内含物为草酸钙结晶（C对）。碳酸钙结晶（A错）为加稀盐酸溶解，同时有气泡产生的细胞内含物。淀粉粒（E错）为加碘试液，显蓝色或紫色的细胞内含物。

3. B

本题考查的是细胞内含物的鉴定。检查脂肪油用苏丹III试液（B对），呈橘红色、红色或紫红色。碘试剂（A错）是鉴别淀粉粒和糊粉粒的试剂，即淀粉粒加碘试液，显蓝色或紫色；糊粉粒加碘试液，显棕色或黄棕色。

4.A

加间苯三酚试液1～2滴，稍放置，加盐酸1滴，因木化程度不同，显红色或紫红色，这是木质化细胞壁的检查方法（A对）；木栓化或角质化细胞壁检查方法是：加苏丹1试液，稍放置或微热，呈橘红色至红色（BC错）；硅质化细胞壁检查方法是：加硫酸无变化（D错）；黏液质化的细胞壁遇玫红酸钠醇溶液染成玫瑰红色（E错）。

小周药师说：

这一节最重要的内容就是细胞内含物的鉴定和细胞壁性质检查。这一块的内容是出现在药用植物学上，细胞内含物有淀粉粒、糊粉粒、油脂、菊糖、粘液、草酸钙结晶和碳酸钙结晶以及硅质。细胞壁又可以分为木质化和木栓化以及纤维素。每一种物质的鉴定方法都要记住，而且每一种方法都有考过。没有什么特别好的记忆方法，只有多看。