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细胞慢病毒感染的MOI值

 外科黄文斌 2022-07-15 发布于广东

细胞感染时,MOI值怎么计算, 浓度过高细胞很容易死亡,浓度不够就会导致细胞感染不上,头疼的很,以下是关于病毒的MIO值计算的绝对珍藏软文,加入收藏中,细胞转染随时查阅.

首先说一下MOI是什么?MOI是“Multiplicity Of Infection”的缩写,翻译为感染复数或感染指数,含义是成功感染时的慢病毒和细胞数量比值。在实验中,我们也将某个细胞达到80%感染效率所需的MOI值定义为该细胞的MOI值,MOI指数可以通过前辈们发表的文献查找,也可以自己去探索测定。



以下是启达部分细胞的MOI值参考列表:(MOI值与细胞的代次和活力有关)

启达货号产品名称中文名称价格MIO值
CD0092A431人皮肤鳞癌细胞14005
CD0012A549人非小细胞肺癌细胞11005
CD0447B16-F0小鼠皮肤黑色素瘤细胞14006
CD0062BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞110010
CD0039HCT116人结肠癌细胞
13005
CD0094HeLa人宫颈癌细胞11003
CD0021293人胚肾上皮细胞10006
CD0180Hepa1-6 小鼠肝癌细胞12003
CD0587HCMEC/D3人脑微血管内皮细胞150060
CD0040HT-29人结肠癌细胞13003
CD0290HUVEC人脐静脉内皮细胞2500100
CD0114Jurkat人急性T淋巴细胞白血病细胞150010
CD0209LLC小鼠Lewis肺癌细胞9006
CD0088LNCaP人前列腺癌细胞15005
CD0052MCF-7人乳腺癌细胞14002
CD0053MDA-MB-231人乳腺癌细胞14001
CD0013MRC-5人胚肺细胞14001
CD0297NB4人白血病细胞 170010
CD0156PC12  大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞120020
CD0032SKOV-3人卵巢癌细胞 140015
CD0066U-2OS人骨肉瘤细胞11005


慢病毒颗粒用量的取决因素:

慢病毒滴度、MOI、感染体积、细胞密度(融合度)



已知目的细胞的MOI,应使用多少慢病毒?

图片

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1×10^8 TU/mL病毒感染细胞所用培养基体积和病毒量参考,以293T细胞为例:

培养容器每孔 细胞数*正常培
养体积
感染时
的体积
MOI=1
的慢病毒量
MOI=10
的慢病毒量
MOI=A
的慢病毒量
96-well2.38×104100 µL100ul0.2ul2.4ul0.24*A ul
48-well4.75×104200 µL200ul0.5ul4.8ul0.48A ul
24-well9.5×104500 µL400ul1.0ul9.5ul0.85*A ul
12-well1.9×1051ml500ul1.8ul19ul1.9*A ul
6-well4.75×1052ml1ml4.8ul47.5ul4.75*A ul
T25 flask1.19 x 1065ml1.5ml11.5ul118.5ul11.85*A ul

划圈圈的知识点:

1.不同细胞种类及实验操作存在差异,建议使用细胞计数的方法测算每孔细胞数。细胞种板时的细胞汇合度为20-30%,一般以细胞感染3天后生长至80%-90%融合度为宜。 

通常情况下,在溶液上层的慢病毒颗粒很难接近细胞。减少培养基的感染体积能提高病毒的感染效率。培养1天后,再将培养液补充至正常体积。但当细胞板孔较小时,如果感染体积减半,液体的表面张力会使慢病毒颗粒分布不均匀,所以小孔培养板的感染体积和正常培养体积相差不大。 

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