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Worthington羧基转移丨碳酸酐酶的应用和文献参考

 艾美捷科技 2022-07-20 发布于湖北

羧基转移背景:

碳酸酐酶(CA)催化CO 2 /H 2 CO 3的可逆水合和脱水反应。CA在自然界中广泛存在,存在于动物、植物和某些细菌中。已在哺乳动物中鉴定和表征了 16 种同工酶。由于用于实验目的的红细胞 CA 相对容易获得,因此它是研究最广泛的。

Worthington 碳酸酐酶特异性:

血液中的 CO 2转运和排泄很大程度上依赖于 CA 对红细胞内 CO 2 反应的快速催化(Tufts等人, 2003 年)。牛 CA 可逆地水合烷基丙酮酸盐,并且它对多种底物表现出水合酶活性(Pocker等人1974 和 Wells等人1975)。

Worthington 碳酸酐酶作品

迄今为止,已经在哺乳动物中描述了 16 种 CA 同工酶。红细胞 CA,CA-I 和 CA-II,是最广为人知的。CA-I、CA-II、CA-III、CA-VII 和 CA-XIII 是胞质的。CA-IV、CA-IX、CA-XII、CA-XIV 和 CA-XV 是膜结合的。CA-VI 在唾液中分泌。CA-VA 和 CA-VB 是线粒体。还有三种称为 CA 相关蛋白 (CARP) 的催化形式:CARP-VIII、CARP-X 和 CARP-XI (Coban et al. 2009)。

锌金属总是与组氨酸 93、95 和 118(成熟链编号)结合。与锌键水分子和这些组氨酸直接或间接相连的氢键网络包括 28-Ser、91-Glu、105-Glu、106-His、116-His、193-Tyr、198-Thr、 208-Trp 和 223-Asn。已发现这些残基高度保守(Lindskog 1982 和 Lindskog等人1984)。牛和人 CA I 和 II 包含独特的 C 末端结结构,已证明其在酶学和机械性能方面很重要(Alam等人2002)。

Worthington碳酸酐酶的5个应用

1.血液中CO 2 的测定

2.去除酸度测试试剂中的 CO 2

3.羧基转移

4.还原反应

文献参考:

1.Andersson, B.、Nyman, P. 和 Strid, L.: 人红细胞碳酸酐酶 B 的氨基酸序列 , Biochem Biophys Res Commun 48 , 670, 1972

2.Appleton, D. 和 Sarkar, B.: 碳酸酐酶中的活性相关电离, 美国 国家科 学院院刊 71,1686,1974

3.Behravan, G.、Jonsson, B. 和 Lindskog, S.: 微调碳酸酐酶的催化特性 - Thr 200的研究--> His Variant of Human Isoenzyme II , Eur J Biochem 190 , 351, 1990

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