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Worthington植物原生质体制备丨纤维素酶方案

 艾美捷科技 2022-07-21 发布于湖北

纤维素酶背景:

纤维素酶是指一组共同作用水解纤维素的酶。

纤维素是由β-1,4键连接的葡萄糖残基的线性多糖。像甲壳素一样,它不是交联的。天然结晶纤维素是不溶的,并以 15 至 10,000 个葡萄糖单位的紧密堆积的氢键脱水葡萄糖链的纤维形式存在。它的密度和复杂性使其非常耐水解,而不会发生初步的化学或机械降解或膨胀。在自然界中,纤维素通常与其他多糖如木聚糖或木质素结合。它是植物细胞壁的骨骼基础。纤维素是食物、燃料和化学品中最丰富的有机来源(Spano等. 1975 年)。然而,其用途取决于其水解成葡萄糖。酸和高温降解不令人满意,因为所产生的糖被分解;酶促降解(纤维素酶)是将纤维素降解成有用成分的最有效手段。尽管纤维素酶分布在整个生物圈中,但它们在真菌和微生物来源中最为普遍。

Worthington 纤维素酶分子特征

里氏木霉基因组包含 9143 个基因,与其他木霉属物种相比,纤维素酶和半纤维素酶基因的数量非常少。 里氏木霉总共包含 200 个糖基水解酶 (GH) 编码基因,其中一些与细菌具有同源性,表明它们可能是通过水平基因转移获得的 (Kubicek 2013)。据报道,41% 的 GH 和其他碳水化合物活性基因出现在 25 个离散簇中(Martinez等人。2008)。其中一些簇还包含编码非核糖体肽和聚酮合酶的基因,这表明这些基因对于木霉在其自然环境中竞争的能力很重要(Kubicek 2013)。纤维素酶的产生是由纤维素、乳糖或槐糖的存在引起的;酶复合物不是组成型形成的。表达受多种阳性和阴性转录因子控制(Kubicek et al. 2009)。

Worthington纤维素酶作品:

纤维二糖水解酶 I (Cel7A) 和纤维二糖水解酶 II (Cel6A) 是所有主要商业制剂中的主要纤维素酶蛋白。内切葡聚糖酶和半纤维素酶占细胞外提取物的不到 10% (Chundawat et al . 2011)。

来自里氏木霉的纤维素酶复合物含有内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡萄糖苷酶。有关这些单个酶的已知序列的信息已整理在下表中。每个单独的酶都作为单体发挥作用。

Worthington纤维素酶的4个应用

1.消化片

2.食品制备过程中纤维素的去除或软化(Toyama 1963)

3.从植物中制备原生质体(Cocking 1960)

4.各种制造工艺(White and White 1997)

相关文献:

1.纤维素酶及其应用,Adv. 化学。系列卷。95,R。古尔德,阿米尔。化学。社会党。出版社,华盛顿特区,1969 年

2.Adney, W.、Rivard, C.、Ming, S. 和 Himmel, M.: 木质纤维素生物质和废物的厌氧消化。纤维素酶和相关酶 , Appl Biochem Biotechnol 30 , 165, 1991

3.Akiba, S., Kimura., Y., Yamamoto, K. 和 Kumagap, H.:黑曲霉抗蛋白酶纤维素酶的纯化和表征, J Ferment Bioeng 79 , 125, 1995

4.Almin, K. 和 Eriksson, K.: 羧甲基纤维素特性对值纤维素酶活性测定的影响, Arch Biochem Biophys 124、129、1968

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